雌二醇对雌性家兔胃窦肌电活动影响的数学模型构建与分析

目的 通过观察雌激素受体在胃窦的表达，并利用构建的数学模型研究雌激素对雌兔胃窦平滑肌肌电活动的影响，探讨雌激素对胃动力的调节作用。方法 应用免疫荧光技术检测雌激素受体在胃窦壁的表达；采用BL-420F生物监测仪监测：1. 比较假手术组与卵巢摘除组家兔胃窦肌电活动指数的差异，每组各3只; 2. 观察苯甲酸雌二醇剂量（0、0.1、0.15、0.2、0.25和0.3 mg/kg）对胃窦肌电活动的影响，每个剂量组各3只。构建数学模型，分析量效关系和作用机制。结果 雌激素受体在胃窦壁的表达呈阴性；卵巢摘除后胃窦肌电活动指数极显著性降低（P<0.01）；随着雌二醇剂量的增加，胃窦肌电活动指数先增加，后降低。方差分析表明，相邻各组间胃窦肌电活动指数差异性显著（P<0.05）或极显著（P<0.01）。以雌二醇剂量为自变量x，胃窦肌电活动指数为因变量y，拟合得到函数：y=2.80 + 5.65 × exp{-0.5×［(x-0.159)/0.038]2}为高斯函数（R=0.9884，P>0.05），表明雌二醇对胃窦平滑肌的调控是基于胃窦自身内在调控机制的基础上进行的，且对其内在调控机制的影响巨大。结论 胃窦壁上不存在雌激素受体；雌二醇与胃窦肌电活动指数的量效关系数学模型符合高斯函数模型特征，雌二醇对胃窦平滑肌的活动起到促进作用，且是基于对胃窦肌电活动内在调控机制的影响下间接实现的。     

丹参SmCOP1与调控丹参酮和丹酚酸合成相关转录因子互作筛选＊

目的 预测分析并克隆丹参E3泛素连接酶SmCOP1（constitutively photomorphogenic1），并对其靶基因进行初筛，为丹参次生代谢关键调控因子MYB以及bHLH等转录因子泛素化研究做准备。方法 本研究利用拟南芥AtCOP1蛋白序列，用HMMER3程序和在线程序SMART，在丹参全基因组数据库筛选到丹参中的E3泛素连接酶SmCOP1序列，经RT-PCR技术获得丹参cDNA，以其为模板设计引物扩增，并利用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白进行相关分析。通过酵母双杂实验对其调控丹参酮和酚酸物质机制进行初步研究。结果 结果表明SmCOP1的2个蛋白均为不稳定亲水性蛋白，其N-端为环形锌指结构域（RING–finger），C-端为WD40重复结构域。通过建立进化树表明SmCOP1b和AtCOP1是直系同源的关系，而SmCOP1a和SmCOP1b是旁系同源的关系。Y2H实验显示SmCOP1a与SmPAP1互作。结论 成功克隆并预测分析丹参E3泛素连接酶SmCOP1，并初步发现其可能通过靶向MYB转录因子SmPAP1对其泛素化修饰参与调控酚酸类物质的代谢。     

转录因子Sox2 SUMO修饰位点突变体的构建及真核表达

目的:构建Sox2及突变体Sox2 K247R的真核表达载体, 并在293FT细胞中表达.方法:以含有Sox2基因全长的馈赠质粒为模板, 用循环延伸PCR法得到该基因的突变体Sox2 K247R, 并将野生型及突变型基因定向亚克隆到真核表达载体pCMV-HA上.得到的重组质粒经限制性内切酶消化和DNA测序鉴定.其后用脂质体包埋法将pCMV-HA-Sox2及pCMV-HA-Sox2 K247R分别单独转染或与pCMV-Myc-SUMO1共转染293FT细胞.采用Western blot分析蛋白表达情况及SUMO修饰情况.结果:经酶切和DNA序列测定, 重组子序列正确, 突变体第247位密码子由AAG转变为CGG.Western blot结果显示野生型及突变型的Sox2都在细胞内得到了很好的表达, SUMO修饰位点突变后, Sox2不能与SUMO蛋白结合.结论:Sox2野生型及突变型真核表达载体构建成功, 在蛋白水平体现了SUMO修饰的差异性.     

兔抗人Rig-I蛋白N端CARD结构域多克隆抗体的制备与鉴定

目的:制备人维甲酸诱导基因I(hRig-I)N端CARD结构域(hRig-I-N)多克隆抗体.方法:从逆转录病毒载体MigRI-hRig-I中扩增hRig-I基因N端CARD结构域852 bp长度的基因片段,克隆入pGEX-4T3中,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下,表达GST-hRig-I-N融合蛋白,将表达的融合蛋白纯化,免疫家兔制备抗体,并以间接ELISA法测定抗体效价,以Western blot、细胞免疫荧光方法鉴定抗体的特异性.结果:在大肠杆菌中成功表达融合蛋白GST-hRig-I-N,ELISA法检测抗体的效价达到1:125 000,Western blot及细胞免疫荧光检测结果显示抗体可与原核及真核表达的hRig-I-N蛋白特异结合.结论:制备了高效价、高特异性的hRig-I-N抗体,为进一步研究hRig-I-N的功能奠定了基础.     

土壤水分有效性对梨枣叶片光合参数和抗旱性的影响--测试文章

利用自动称量和补水系统，对三年生梨枣树进行适宜水分、轻度和重度干旱三种土壤水分处理（土壤含水量分别为田间持水量的75%±5%、60%±5%和45%±5%），旨在探究不同土壤水分对梨枣叶片光合参数和抗旱性的影响。结果表明：(1) 轻度干旱对梨枣叶片的光合参数没有显著影响，但重度干旱引起净光合速率（Pn）、蒸腾速率（Tr）、气孔导度（Gs）、胞间CO₂浓度（Ci）和光能利用率（LUE）明显降低，而水分利用效率（WUE）和气孔限制值（Ls）增加。(2) 轻度干旱对梨枣叶片丙二醛（MDA）含量影响不大，过氧化氢酶（CAT）活性则显著上升；而重度干旱下MDA含量显著上升，同时超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）活性以及抗坏血酸（ASA）和还原型谷胱甘肽（GSH）含量明显升高，但仍不能消除重度干旱对梨枣叶片膜系统造成的严重伤害。因此，轻度干旱并未引发梨枣叶片显著的生物学胁迫，而在重度干旱条件下梨枣叶片的光合能力和膜系统均受到严重影响。     

花后干旱条件下冬小麦顺序和非顺序衰老同化物积累及转运特性--测试文章

以小麦顺序衰老（正置茎）和非顺序衰老（倒置茎）茎为材料，比较研究了自然天气和干旱条件下小麦正置茎和倒置茎叶片绿叶面积、光合速率、蔗糖磷酸转运酶活性以及地上器官同化物积累和转运特性，旨为进一步研究小麦叶片非顺序衰老的生理生化机制提供思路和理论指导。试验表明：无论是自然天气条件还是干旱条件，温麦19、豫麦19和兰考矮早8倒置茎倒二叶的绿叶面积、光合速率和叶片干重均明显高于旗叶，表现出旗叶早于倒二叶衰老的特征；倒置茎花后同化物转运量、转运率和对籽粒的贡献率、穗重以及叶片蔗糖磷酸合成酶活性均明显高于正置茎。表明小麦叶片的非顺序衰老与花后同化物的快速转运有关，这种衰老方式对小麦籽粒的后期充实是有利的，并且对干旱条件有较强的适应能力。     

葛根异黄酮防治中老年妇女疾病研究进展

葛根异黄酮是葛根含有的具有中老年妇女保健作用的植物雌激素，具有弱的雌激素样作用。本文综述了葛根异黄酮在防治骨质疏松、心血管疾病、生殖系统肿瘤，美容养颜抗衰老等中老年妇女疾病中的作用研究进展。     

携带IL-18的溶瘤腺病毒的构建及对肝癌细胞的体外实验

目的:构建端粒酶启动子和缺氧启动子调控的增殖腺病毒CNHK600-IL-18,观察其在肝癌细胞中的增殖能力和对肝癌细胞的杀伤作用。方法:TCID50法检测pSG600和CNHK600-IL-18在3种不同细胞内96 h的增殖情况。MTT法检测pSG600和CNHK600-IL-18在不同MOI条件下对3种细胞的杀伤情况。用CNHK600-IL-18感染BJ细胞,收集上清液,测其诱导T细胞产生的INF-γ量。结果:Western印迹结果显示,CNHK600-IL-18感染SMMC-7721细胞后能检测出IL-18表达。CNHK600-IL-18感染BJ细胞后,其上清液能诱导T细胞产生INF-γ。CNHK600-IL-18在BEL-7404和SMMC-7721细胞中96 h增殖倍数分别是31 658和125 396,分别是在BJ细胞中增殖的400倍和1 587倍。结论:CNHK600-IL-18能特异地在肝癌细胞中增殖并产生具有生物活性的IL-18,对肝癌细胞有明显的杀伤作用。     

不同施肥处理对党参产量和次生代谢物含量的影响研究

采用单因素随机区组实验设计,研究不同施肥处理对党参产量和次生代谢物合成积累量的影响,确定合理的施肥配比和采收期,为党参规范化栽培提供依据。试验结果显示,适量氮肥有利于党参根直径和根生物量的提高,磷肥可以促进党参多糖含量的增加,有机肥可以提高党参炔苷的含量。党参产量、多糖及醇溶性浸出物含量随着生长时间的延长而增加,党参炔苷含量随着生长时间的延长而减少。综合各因素分析,试验区党参的合理采收期应为10月下旬,施用有机肥对党参生物量和次生代谢物的积累最有利。