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目的用动态模板PCR基因合成法合成与克隆含人胰岛素分泌信号的人降钙素(human calcitonin hCT)基因并经序列分析予以确证。方法根据Genebank的人胰岛素分泌信号和人的hCT基因的序列,将其分成6个片断合成单链寡核苷酸作为PCR的引物和cDNA合成的模板。其中,在互相邻近的每两条引物之间均有19—20个碱基互补,6条合成的单链寡核苷酸在PCR反应中相邻的两条单链寡核苷酸互为引物和模板,经过3个PCR循环,直接扩增出人胰岛素和降钙素的编码序列,经过25—30循环,获得足量的PCR产物,即含人胰岛素分泌信号的hCT基因。采用琼脂糖凝胶回收法,回收目的片段胰岛素分泌信号和hCT基因全长DNA。纯化后,将此段DNA插入到克隆载体PMD18-T载体上。转化用CaCl2法制备的感受态细菌JM109,恒温震荡培养箱培养1h后,涂在含氨苄青霉素和X—gal的LB固体培养基上培养。利用氨苄抗性筛选和蓝白斑筛选实验,筛选出阳性克隆,用碱裂解法提取质粒,应用双酶切和DNA测序鉴定重组质粒。结果经动态模板PCR基因合成法合成获得212bp产物,经酶切鉴定和DNA测序确定所合成片断为胰岛素分泌信号和hCT基因全长,证明克隆到的含人胰岛素分泌信号和降钙素的基因为编码人胰岛素分泌信号和人降钙素的全长DNA序列。结论本研究为基因合成提供了一种新的可靠的方法,成功地克隆了含人胰岛素分泌信号的人降钙素基因,为人降钙素基因与后续研究提供了新的研究方法。 相似文献
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神经肌肉型脊柱侧凸外科治疗进展 总被引:1,自引:0,他引:1
神经肌肉型脊柱侧凸(Neuromuscular Scoliosis)是由一组肌神经性疾病引起的冠状面的脊柱畸形。这些疾病可发生于大脑、脊髓、周围神经、神经一肌肉连接和肌肉等部位,导致头部失控、颈部和躯干的失平衡及不协调等。虽然致病原因较多以及每个病人的表现多不一致,但在基本特征、发病形式、评估及处理等方面有许多共同点。其手术治疗在许多时候,由于额外的因素比特发性脊柱侧凸更复杂,具有更高的风险性。 相似文献
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目的:观察自控微动带锁髓内钉(AMLN)内固定对骨折愈合的影响。 方法:对16只山羊两侧股骨干横断截骨,分别采用AMLN和Gross-Kempf (GK) 钉固定,术后7、14、28和56 d分批处死,行组织学观察和生物化学测量。 结果:(1)AMLN钉固定组骨外膜骨痂,桥梁骨痂能早期加速形成,并逐渐形成连接骨痂和封闭骨痂,使皮质骨松化,骨痂不断长入,骨折修复与塑形提早实现,明显优于GK钉固定。不同愈合期骨痂的定量分析表明,两者具有显著差异(P<0.05)。(2)AMLN钉固定组的骨痂胶原、不溶性胶原、钙、磷含量均高于GK钉固定组(P<0.05)。 结论:AMLN钉固定符合“弹性固定准则”,骨折端间歇生理性动应力的产生与传导,较好解决了应力遮挡与应力传导的平衡问题,骨折边愈合边塑形,加速了骨折愈合进程。 相似文献
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目的:为临床经胸骨上段显露脊柱颈胸段提供解剖学基础。方法:对40具成人尸体模拟经胸骨上段显露颈胸段脊柱的入路进行解剖,并进行有关的数据测量。结果:甲状腺中静脉有48.8%的人一侧缺如。胸骨劈开后撑开的横径为(60.8±1.64)mm。两侧胸膜在前界中段之间有分离型、接近型、接触型和掩复型,后两者占50.4%。食管在T3椎体平面超出气管左缘(0.5±0.08)cm。胸导管由颈血管鞘后方到注入静脉的行程位于颈静脉角三角区。左、右侧喉返神经分别有94.5%、59.6%走行在气管食管沟内,并与甲状腺下动脉有复杂的关系。胸骨角正对T4/5椎间盘、T4下1/3和T5上1/3椎体(62.5%)水平,喉返神经左、右侧返折点分别平对T3/4椎间盘、T4椎体(75.6%)和T1/2椎间盘、T2椎体(82.0%),主动脉弓、右锁骨下动脉上缘分别对T3(73.7%)和T1椎体(70.0%)水平,经胸骨上段入路的颅侧和尾侧分别平对C3/4椎间盘、C4椎体(75.6%)和T3椎体、T3/4椎间盘(86.8%)。结论:经胸骨上段显露脊柱颈胸段具有暴露充分,操作方便,具有推广价值。 相似文献
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神经肌肉型脊柱侧凸(Neuromuscular Scoliosis)是由一组肌神经性疾病引起的冠状面的脊柱畸形[1].这些疾病可发生于大脑、脊髓、周围神经、神经-肌肉连接和肌肉等部位,导致头部失控、颈部和躯干的失平衡及不协调等.虽然致病原因较多以及每个病人的表现多不一致,但在基本特征、发病形式、评估及处理等方面有许多共同点.其手术治疗在许多时候,由于额外的因素比特发性脊柱侧凸更复杂,具有更高的风险性[2].…… 相似文献
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目的 探讨椎间盘镜下椎间融合治疗腰椎不稳症的可行性及优越性.方法对21例腰椎不稳症行椎间盘镜椎管减压,置入膨胀式椎间融合器( B-twin)行椎间融合.结果18例得到随访,时间6个月~2.5年,平均1.5年,按Macnab评分:优10例,良5例,可3例;未发现内置物松动、脱出,融合率100%.结论椎间盘镜椎间融合术具有... 相似文献
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我科自 1998年元月至今采用该技术共诊疗病人 2 30例 ,疗效满意 ,现将护理体会报告如下。1 临床资料1 1 一般资料 本组 2 30例 ,男 10 5例 ,女 12 5例 ,年龄 9~80岁 ,平均 37岁 ,软骨骨折 5例 ,半月板损伤 42例 ,游离体38例 ,滑膜炎 41例 ,骨关节炎 5 3例 ,骨膜皱裂综合症 10例 ,脂肪垫挤压综合症 15例 ,前交叉韧带损伤 2 6例。1 2 方法及结果 术后第一天 ,开始功能锻炼 ,平均术后下床时间为 4d ,术后平均住院时间为 6d ,术后给予认真康复指导 ,均获满意疗效 ,无并发症发生。2 护理2 1 术前护理2 1 1 术前准备 ①术前检查心、… 相似文献