淫羊藿苷对精神分裂症模型大鼠认知功能的改善作用及机制

目的:研究淫羊藿苷(ICA)对精神分裂症模型大鼠认知功能的改善作用及机制。方法:将SD大鼠分为空白对照组、模型组和ICA低、中、高剂量组(15、30、60 mg/kg),除空白对照组外,其余组大鼠均腹腔注射N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂MK-801(0.2 mg/kg)复制精神分裂症模型,每天1次,连续14天。造模成功后,ICA各剂量组大鼠灌胃相应药物,空白对照组和模型组灌胃等体积水,每天1次,连续28天。采用Morris水迷宫实验、旷场实验、强迫游泳实验和Y迷宫实验观察大鼠行为学变化;采用Nissl法染色观察大鼠海马组织病理变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠脑组织中胆碱能相关指标[乙酰胆碱(Ach)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)、乙酰胆碱酯酶(AchE)]的水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测大鼠脑组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、环磷腺苷反应元件结合蛋白(CREB)的mRNA的表达水平;采用Western blot法检测大鼠脑组织中BDNF、ERK、CREB蛋白和凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)及其相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)]的表达或磷酸化水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠逃避潜伏期、T1~T3时段活动路程长度、累积不动时间和脑组织中Caspase-3蛋白的表达水平均显著增加或升高(P<0.05);穿台次数、交替率、海马组织中Nissl染色阳性神经元数以及脑组织中Ach和ChAT水平、Bcl-2/Bax比值、BDNF m RNA和蛋白的表达水平、ERK和CREB mRNA的表达水平、ERK1/2和CREB磷酸化水平均显著减少或降低(P<0.05)。与模型组比较,ICA高剂量组大鼠逃避潜伏期、T1~T3段活动路程长度、累积不动时间、Nissl染色阳性神经元数、脑组织中AchE水平和Caspase-3蛋白的相对表达量均显著减少或降低(P<0.05);穿台次数、交替率,脑组织中Ach和ChAT水平、Bcl-2/Bax比值、BDNF m RNA和蛋白的表达水平、ERK和CREB mRNA的表达水平、ERK1/2和CREB的磷酸化水平均显著增加或升高(P<0.05)。ICA低、中剂量组大鼠上述部分指标较模型组显著改善(P<0.05)。结论:ICA可改善精神分裂症模型大鼠的认知功能,其作用机制可能与调节胆碱能系统、抑制神经元凋亡、促进BDNF/ERK/CREB信号通路的表达有关。     

参苓白术散合麦门冬汤对染矽尘肺纤维化（肺脾两虚型）大鼠肺组织细胞HMGB1、PDGF的影响＊

目的 本研究遴选中医培土生金法的代表方参苓白术散合麦门冬汤加减方灌胃治疗染矽尘肺纤维化（肺脾两虚型）大鼠，观察中药治疗各组对染矽尘大鼠肺组织HMGB1、IL-6、PDGF、K-Ras蛋白含量，基因表达水平作用的影响改变。方法 对健康SD大鼠随机分为正常对照组和造模组。造模组分别给予大黄煎液灌服造模法与二氧化硅（SiO₂）气管滴注诱导染矽尘肺纤维化造模法结合，制造染矽尘肺纤维化（肺脾两虚型）模型，待造模成功后，造模组随机分为5组，分别给予生理盐水、激素、中药高剂量、中药中剂量和中药低剂量进行治疗。各组动物于造模成功后30 d处死。ELISA检测各组肺组织高迁移率族蛋白1（HMGB1）、白介素6（IL-6）、血小板衍生因子（PDGF）、K-RAS蛋白含量并提取各组肺组织RNA,采用反转录合成cDNA，通过RT-PCR技术扩增HMGB1、IL-6、PDGF、K-RAS基因。结果 中药各组肺组织HMGB1、IL-6、PDGF、K-Ras蛋白含量，基因表达水平明显低于染矽尘组（P < 0.05），但中药各组肺组织HMGB1、IL-6、PDGF、K-Ras蛋白含量，基因表达水平明显高于对照组（P < 0.05）。结论 中药各组能显著降低肺组织HMGB1、IL-6、PDGF、K-Ras蛋白含量和基因表达，HMGB1与PDGF间存在正相关关系。     

枸杞多糖调节单核细胞功能探讨

目的观察枸杞多糖(LBP-X)调节单核细胞功能的机理。方法依据本课题前期的研究方法获得外周血单核细胞,并用不同浓度LBP-X(0.000、0.312、1.250、5.000 mg/mL)诱导培养。中性红和MTT实验分别分析LBP-X诱导单核细胞的吞噬和增殖作用;同时,LBP-X诱导单核细胞分泌溶菌酶、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6),并检测;用Western Blot法检测LBP-X诱导单核细胞抗原呈递分子人白细胞抗原DR(HLA-DR)表达。结果 LBP-X增强单核细胞的吞噬作用(P0.05,P0.01),且增加单核细胞溶菌酶、TNF-α和IL-6的分泌(P0.05,P0.01),但对单核细胞增殖没有影响(P0.05);LBP-X增强单核细胞HLADR的表达(P0.05,P0.01)。结论 LBP-X激活单核细胞,且可能增强单核细胞的抗原呈递功能。     

火麻仁油藻油混合物安全性实验研究

目的评价火麻仁油藻油混合物安全性。方法采用KM小鼠和SD大鼠为实验动物,分别进行急性毒性试验、遗传毒性试验以及30d喂养试验。结果急性毒性试验中,样品组与阴性对照组比较,自发活动、反应速度、精神状况、组织器官等均无异常(P0.05);遗传毒性试验中,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核含量测定,样品各剂量组与阴性对照组比较,差异无显著性(P0.05);小鼠精子畸形试验中,样品各剂量组与阴性对照组比较无显著性差异(P0.05);30d喂养试验中,各剂量组大鼠体重增重、进食量及食物利用率与对照组比较无显著性差异(P0.05),血生化指标和血常规指标与对照组比较无显著性差异(P0.05)。结论在此次的实验中,未发现火麻仁油藻油有毒性作用,为无毒物。     

基于cAMP/CREB信号通路探讨天王补心丹对复合失眠模型大鼠学习记忆水平及神经因子的影响

目的:探讨天王补心丹对复合失眠模型大鼠学习记忆水平及神经因子的影响。方法:50只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、天王补心丹低、高剂量组和艾司唑仑组。采用多平台水环境联合咖啡因、环磷酰胺腹腔注射制备失眠模型。造模完成后采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆水平;免疫组织化学法(IHC)检测大鼠海马BDNF、NGF阳性细胞的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测海马中BDNF、NGF的含量;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测海马中BDNF、NGF受体mRNA的表达水平。结果:与模型组比较,天王补心丹低剂量、高剂量组在上平台潜伏期、游泳总路程、第1次抵达平台时间上明显缩短,跨越平台次数和目标区域运动时间增加;IHC显示天王补心丹高、低剂量组累计光密度值(IOD)较模型组升高;ELISA及Real-time PCR显示海马中BDNF、NGF的浓度较模型组升高,天王补心丹高、低组BDNF、NGF受体mRNA表达较模型组有不同程度的上调。结论:天王补心丹能够改善失眠大鼠的学习记忆水平,这可能与调控BDNF、NGF的表达具有关联性。     

从IRS-PI3K信号转导通路探讨寿尔智胶囊对阿尔茨海默病模型大鼠的作用

目的观察寿尔智胶囊对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠胰岛素受体底物-1(IRS-1)和胰岛素受体底物-2(IRS-2)及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的影响,探讨其相关作用机制。方法 SD大鼠40只分为中药寿尔智组、西药安理申组、空白对照组与模型组,每组10只;向大鼠海马区注射凝聚态Aβ_(25-35)建立AD模型,予相应药物灌胃。免疫组化法测定海马CA1区IRS-1、IRS-2、PI3K。结果 AD模型组大鼠IRS-1、IRS-2、PI3K的表达均有不同程度的下调,而寿尔智胶囊治疗后的大鼠海马组织IRS-1、IRS-2、PI3K的表达均有显著增加。结论寿尔智胶囊可能通过增加IRS-1、IRS-2、PI3K的表达,激活海马神经元胰岛素信号转导通路。     

北京地区住院医师规范化培训中医临床思维培养现状调查

目的:以北京地区4所三甲医院为例,调查中医住院医师规范化培训中医临床思维培养现状。方法:采用电子版本自填式问卷,从"对中医临床思维培养重要性的认知""目前规培中中医临床思维培养存在问题""影响规培中培养中医临床思维的原因""规培中如何培养中医临床思维能力"4个方面对在北京地区4所三甲医院参与规培的研究生进行调查。结果:共103名参与者接受了本调查,88份问卷纳入统计分析。超过80.00%的受访者认同"中医临床思维是保持和提高中医药临床疗效优势的基础,是中医药传承发展的核心内容,中医临床思维培养应作为规培的重要目标之一"。超过60.00%的受访者认为规培中中医临床思维培养"西化""弱化"和"僵化"问题突出,其原因包括整体社会环境的影响以及当前中医规培管理评价机制尚未能充分突出中医临床思维。超过50.00%的受访者认为将传统师承模式引入规培,能有效培养中医临床思维。其外,门诊抄方、参与教学查房、总结带教老师临床经验,也是提高中医临床思维能力的重要途径。结论:中医临床思维作为中医药传承发展的核心内容,如何培养中医临床思维已成为规培的重要目标之一。面对规培中中医临床思维培养"西化""弱化"和"僵化"问题突出的现状,在规培中强调跟诊式教学、案例教学和实践教学意义尤为重大。     

芍甘木瓜汤通过BDNF/TrkB/CREB信号通路改善脑卒中偏瘫痉挛状态大鼠神经行为学研究

目的 观察芍甘木瓜汤对脑卒中偏瘫痉挛状态大鼠神经行为学的影响,并探讨对脑源性神经营养因子（BDNF）/酪氨酸蛋白激酶B（TrkB）/环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）信号通路的调控机制。方法 取50只SD大鼠采用改良线栓法制作大脑中动脉梗死模型,选取建模成功大鼠随机分为模型组、巴氯芬（0.008 g/kg）组和芍甘木瓜汤低、中、高剂量（0.05、0.10、0.15 g/kg）组。另取10只SD大鼠不栓塞大脑中动脉作为假手术组,于再灌注2 h后ig给药,每天1次,连续2周,假手术组和模型组ig等量生理盐水。干预前后分别采用Zea Longa量表、改良Ashworth量表评价神经行为学、肌张力变化,采用大鼠多导生理记录仪测定上肢伸直幅度;酶联免疫法检测大鼠干预前后血清BDNF、TrkB水平;苏木素-伊红（HE）染色观察缺血半暗带脑组织病理变化,透射电镜下观察缺血半暗带脑组织神经元超微结构;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测缺血半暗带脑组织BDNF、TrkB-FL、TrkB-T1、CREB mRNA表达;Western blotting检测BDNF、TrkB-FL、TrkB-T1、CREB蛋白表达及p-CREB水平。结果 干预后巴氯芬组和芍甘木瓜汤各剂量组的Zea Longa量表、改良Ashworth量表分级均较干预前和模型组（干预后）显著改善（P<0.05）,上肢伸直幅度均较干预前和模型组（干预后）均显著增加（P<0.05）,血清BDNF、TrkB水平均较干预前和模型组（干预后）显著升高（P<0.05）,缺血半暗带脑组织病理变化和神经元超微结构均较模型组明显改善。模型组缺血半暗带脑组织BDNF、TrkB-FL mRNA与蛋白表达,p-CREB蛋白水平均显著低于假手术组（P<0.05）,巴氯芬组和芍甘木瓜汤各剂量组均较模型组显著升高（P<0.05）;模型组缺血半暗带脑组织TrkB-T1 mRNA与蛋白表达显著高于假手术组（P<0.05）,巴氯芬组和芍甘木瓜汤各剂量组均较模型组显著下降（P<0.05）。各组缺血半暗带脑组织CREB mRNA表达差异无统计学意义。结论 对脑卒中偏瘫痉挛状态大鼠ig予以芍甘木瓜汤可改善其神经行为学,降低肌张力,增加血清BDNF、TrkB水平,减轻缺血半暗带脑组织病理和神经元超微结构变化,推测与激活BDNF/TrkB/CREB通路,上调BDNF、TrkB-FL mRNA与蛋白表达,下调TrkB-T1 mRNA与蛋白表达,增加p-CREB水平有关。     

针刺大鼠足三里触发IL-33信号的负反馈调节发挥对接触性过敏性皮炎的抑制作用

目的观察电针作用于足三里(ST36)对白细胞介素-33(IL-33)介导的肥大细胞活化的影响。方法SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针治疗组、针刺对照组。用2,4-二硝基氟苯(DNFB)对大鼠背部皮肤致敏及左侧耳部激发诱导成接触性过敏性皮炎模型。电针治疗组给予电针"足三里"穴,针刺对照组在"足三里"穴下0.5cm处的非穴位施行电针。测量大鼠耳片厚度;甲苯胺蓝染色检测鼠耳肥大细胞浸润,ELISA法检测鼠耳组织IL-33的释放;提取大鼠腹膜肥大细胞,在含有IL-33的培养基中培养,ELISA法检测每组大鼠腹膜肥大细胞匀浆上清炎性因子(IL-6、TNF-,IL-13 and MCP-1)水平;蛋白质印迹法检测每组大鼠腹膜肥大细胞NF-B的表达。结果电针"足三里"减轻了DNFB诱导的接触性过敏性皮炎大鼠耳部的肿胀,减少了鼠耳组织肥大细胞的浸润,抑制了局部炎症区IL-33的分泌,明显下调了IL-33诱导的大鼠腹膜肥大细胞炎性因子IL-6、TNF-,IL-13,MCP-1的释放以及NF-B蛋白的表达。结论电针"足三里"可以通过抑制局部炎症区IL-33的分泌减轻接触性过敏性皮炎的炎症反应,可作为治疗接触性过敏性皮炎的有效疗法。