茵栀黄注射液基于FXR调控MDR3治疗肝内胆汁淤积的作用机制

目的:通过研究茵栀黄注射液(Yinzhihuang injection,YZH)对人正常肝细胞系HL-7702细胞的法尼酯X受体(farnesoid X receptor,FXR),多药耐药相关蛋白3(multidrug resistance associated protein 3,MDR3)基因表达的影响,探讨茵栀黄注射液调控肝脏胆汁酸代谢的作用靶点及机制,为茵栀黄注射液治疗肝内胆汁淤积的临床应用提供实验依据。方法:不同浓度茵栀黄注射液干预HL-7702,采用细胞活性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)探索茵栀黄注射液对HL-7702的活性影响,结合实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法确定茵栀黄注射液的理想干预浓度和时间;用GW4064(FXR激动剂)促进FXR基因的表达,分为茵栀黄注射液组,GW4064组,GW4064+茵栀黄注射液组,正常组,DMSO组;小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默FXR基因,分为siRNA组,siRNA+茵栀黄注射液组,正常组,阴性组。Real-time PCR法、蛋白质免疫印迹(Western blot)法分别检测FXR,MDR3 mRNA及蛋白质的相对表达量,免疫荧光(IF)检测FXR蛋白的表达。结果:研究结果表明茵栀黄注射液对HL-7702的理想干预浓度1.08%,理想干预时间为15.47 h;茵栀黄注射液对HL-7702活性影响呈剂量依赖性;与正常组比较,GW4064组促进FXR,MDR3 mRNA和蛋白的表达(P0.01);与正常组比较,siRNA组抑制FXR,MDR3 mRNA和蛋白的表达(P0.01);与GW4064组比较,GW4064组+茵栀黄注射液组促进FXR,MDR3 mRNA和蛋白的表达(P0.01);与siRNA组比较,siRNA+茵栀黄注射液组促进FXR,MDR3 mRNA和蛋白的表达(P0.01)。结论:茵栀黄注射液促进FXR,MDR3 mRNA和蛋白的表达,茵栀黄注射液通过FXR促进MDR3 mRNA和蛋白的表达来调控肝脏胆汁酸的代谢,本实验为其临床应用于治疗肝内胆汁淤积提供实验依据。     

约束带用于婴幼儿腹部手术的体位固定

婴幼儿腹部手术中的体位固定是手术过程中非常重要的环节,体位固定的好坏与手术中能否顺利操作及术后并发症的发生有着密切的关系。以往我们采用的是普通的固定法,即固定上肢时将纵折的中单横置     

肺癌相关蛋白N35的纯化及鉴定

目的利用免疫亲和层析技术用自行制备的抗人肺癌单克隆抗体N35纯化其相应的肺癌相关抗原N35蛋白并对其进行鉴定。方法培养P35杂交瘤细胞,收集培养上清,利用Protein A-Sepharose CL-4B亲和层析法纯化单抗N35;用纯化得到的单抗与溴化氰活化的Protein A-Sepharose CL-4B制备免疫亲和柱;再将肺腺癌GLC-82细胞的裂解液通过此免疫亲和柱,纯化肺癌相关抗原N35;最后,对纯化得到的N35蛋白进行Western blot鉴定。结果应用Protein A-Sepharose CL-4B亲和层析法纯化得到纯度较高的单抗N35蛋白;应用溴化氰活化的Protein A-SepharoseCL-4B免疫亲和层析法纯化得到相对分子质量80 000的肺癌相关蛋白N35。结论纯化得到的肺癌相关蛋白N35是一种新的肿瘤相关抗原,可为肺癌的生物治疗提供新的靶点。     

负载人HUVECs抗原的DC疫苗诱导小鼠对宫颈癌U14的特异性免疫反应

目的:探讨负载人脐静脉内皮细胞(HUVEC)抗原的DC疫苗诱导小鼠对宫颈癌U14的特异性免疫反应.方法:原代培养和鉴定人HUVECs,制备抗原,负载树突状细胞(DC),免疫小鼠,免疫结束后1周小鼠皮下注射小鼠宫颈癌U14细胞,观察肿瘤生长大小、检测免疫后小鼠脾细胞体外CTL效应、表面CD3+CD8+百分率和血清抗体滴度,通过细胞免疫组化和Western blot血清特异性反应分析.结果:经免疫组化鉴定成功培养出纯度高的HUVECs,抗原负载DC并注射BALB/c小鼠后,PBS组肿瘤生长最快,DC组和HUVEC-DC组肿瘤也有生长,但生长较慢,在2周后HUVEC-DC组肿瘤消失,3周后DC组肿瘤消失.小鼠脾细胞体外CTL结果显示HUVEC-DC组有明显的特异性杀伤HUVEC的作用.CD3+CD8+百分比提示HUVEC-DC组细胞毒性T细胞比例较其他两组高.小鼠血清抗体滴度示有抗体产生,免疫组化检测示组与HUVEC有特异性抗原抗体反应,Western blot显示在相对分子质量(Mr)130 000和220 000处有特异性条带.结论:负载人HUVECs抗原的DC疫苗和DC疫苗对小鼠宫颈癌U14有抑制作用,HUVEC-DC疫苗诱导了小鼠的细胞和体液免疫,并诱导了针对HUVECs细胞中的某些抗原的应答,这些抗原可能是整合素αν和VEGF-R2.     

抗氧化酶遗传多态性与慢性阻塞性肺疾病的关系

氧化／抗氧化失衡是慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病的主要机制之一。遗传因素很可能是决定吸烟者是否发展成气道阻塞的重要因素,大量研究资料证实有些抗氧化酶的遗传多态性与COPD易感性有一定的相关,但不同种族,不同地域存在差异。     

直视下尿道内切开术治疗尿道狭窄或闭锁(附32例报告)

自１９９５年６月以来,我们应用Ｓｔｏｒｚ尿道镜开展直视下尿道内切开术治疗各种类型的尿道狭窄３２例,效果满意,报告如下。资料和方法　本组３２例。均为男性。年龄１５～６８岁,平均３５岁。病程３周～１０年。病因：骨盆骨折致后尿道损伤２５例,尿道会师术后３例,尿道吻合术后２例,炎性前尿道狭窄２例。狭窄或闭锁长度０－５～２．０ｃｍ。术前均行尿道逆行造影＋膀胱尿道排泄造影,如尿道闭锁,常不能满意显示后尿道,可经膀胱造瘘口将金属尿道探子插入后尿道至闭锁处,配合尿道逆行造影或采用尿道会师法,经前后尿道分别插入尿…     

跖跗关节骨折脱位内固定方法的生物力学实验研究

通过用９只新鲜人体脚制作成分歧型脱位标本模型。解剖复位后分别采用钢丝环扎、二根克氏针、四根交叉克氏针和松质骨螺钉共四种方法做内固定并进行生物力学测验,发现各种内固定方法必须使第一、二、三跖遗传关节组成一个整体,使中足成为坚固的弓形钶防止足塌畸形氏针或松质内固定时,必须在第一跖跗关节稳定的基础上,经第一、二跖骨基底和第三楔骨交叉一克氏针或螺钉,使第二跖骨基底得两点固定。第一、二、三、四跖骨基底的横向     

暴发性紫癜一例

患儿女,１５岁。１日前无诱因出现高热,达３９℃,当地医院给予肌注柴胡、安痛定及氟美松注射液各２次,热退。次晨３时发现面部、四肢及背部等处片状紫红色斑,剧痛,于１９９７年５月１４日上午入院。体检:体温３８２℃,脉搏１２０次,呼吸３０次,体重１２ｋｇ。发育营养正常,神志清,精神不佳,烦躁。各系统检查未见明显异常。皮肤科情况:于全身皮肤可见点片状紫褐色瘀斑,微高出皮面,互不融合,以双下肢为重,双足踝部浮肿,皮损明显触痛。实验室检查:红细胞３７０×１０１２／Ｌ,血红蛋白１０２ｇ／Ｌ,白细胞１６３×１０９／Ｌ,中性粒细胞０７９…     

张国伦教授从痰瘀论治缺血性中风经验

张国伦教授是全国第三批国家级名老中医药专家,尤擅心脑血管疾病治疗,本文对张老师从痰瘀论治缺血性中风的经验作一简要介绍,以见其学术之一斑。     

老年慢性心力衰竭雄激素低下患者细胞因子的变化及药物干预作用

目的探讨老年慢性心衰(ECHF)患者雄激素水平减低对细胞因子的影响及药物干预作用。方法将60例ECHF患者随机分为治疗组和对照组,每组各30例。于治疗前及治疗2个月后分别检测血液总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)、血浆sFas、肾上腺髓质素(ADM)和脂联素水平,对照组采用常规治疗,治疗组采用薯蓣皂甙80mgtid 卡维地洛5mgbidpo。结果ECHF时FT明显减低,血清脂联素降低,血浆sFas和ADM明显增加。脂联素与FT呈正相关(r=0.5,P<0.01),与血浆sFas及ADM呈现负相关(r=-0.45,r=-43,P<0.05)。治疗组治疗后与对照组比较血清脂联素明显增加,左室收缩功能改善,血浆sFas及ADM水平明显降低(P<0.01)。结论FT水平减低可影响心肌细胞凋亡,ADM明显升高可能与ADM抵抗相关。血浆sFas及脂联素水平与内皮细胞功能之间存在一定的相关性。