RNA干扰靶向沉默FLIP基因对卵巢癌细胞A2780生物学特性的影响及生长抑制作用

目的探讨靶向FLIP基因的小干扰RNA（siRNA）对人卵巢癌细胞A2780生物学特性的影响及生长抑制作用。方法设计并体外化学合成FLIP序列特异性双链RNA，在脂质体（LipofectamineTM2000）介导下转染人卵巢癌细胞株A2780。采用半定量RT-PCR和Western blot法检测FLIP siRNAs转染前后A2780细胞FLIP基因mRNA和蛋白表达的变化,并筛选出抑制作用最强的FLIP-siRNA。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法、Annexin-V-PI双染法流式细胞术（FCM）分别检测FLIP-siRNA转染对A2780细胞的生长抑制作用和对凋亡的影响。结果特异性FLIP-siRNAs片段能有效降低A2780细胞中FLIP的 mRNA和蛋白水平（P＜0.01）,最大抑制率分别为77.4％和66.1％；转染FLIP-siRNA后，A2780细胞的生长活力明显下降（P＜0.05），RNA干扰组的细胞凋亡也显著增加（P＜0.05）。结论靶向FLIP基因的siRNAs可在转录和翻译水平抑制FLIP基因表达；并可抑制卵巢癌A2780细胞生长，促进其凋亡。     

卵巢肿瘤组织和血清中RASSF1A基因甲基化检测及临床意义的研究

目的：检测卵巢肿瘤组织和血清中RASSF1A基因启动子区异常甲基化，探讨卵巢肿瘤组织和血清中RASSF1A基因甲基化与卵巢癌的关系。方法：收集新鲜的卵巢肿瘤组织及其对应的血清标本65例，10名健康志愿者血清标本。采用半巢式甲基化特异性PCR技术分别检测肿瘤组织DNA和血清游离DNA中RASSF1A基因启动子异常甲基化情况。结果：卵巢癌患者血清和癌组织中，RASSF1A基因甲基化的检出率分别为20．0％和31．4％。卵巢良性肿瘤组织和血清以及健康志愿者血清中，均未发生RASSF1A基因异常甲基化。肿瘤组织中，RASSF1A基因的甲基化状况与血清中出现RASSF1A基因甲基化关系密切，P〈0．01；卵巢癌患者血清和癌组织中，RASSF1A基因的甲基化异常改变与肿瘤的临床分期、细胞分化程度以及组织学类型无明显相关性，P〉0．05；与淋巴结转移密切相关，P〈0．05。结论：分析血清DNA的RASSF1A基因异常甲基化有可能成为辅助卵巢癌诊断的有效方法之一。     

氨氯吡咪对大鼠慢性阻塞性肺疾病模型病理改变的影响

目的观察尿激酶型纤溶酶原激活物（u-PA）抑制剂氨氯吡咪对大鼠慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型病理及病理生理改变的影响，探讨u-PA系统成分在COPD发病中的作用。方法健康Wistar大鼠24只随机分为3组：正常对照组、模型组和氨氯吡咪组。7周后检测各组大鼠的肺功能，支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞计数及分类，天狼猩红染色观察支气管肺组织的胶原沉积，免疫组化染色观察u-PA、u-PA受体、纤溶酶原激活物抑制物1（PAI-1）的蛋白定位和表达。结果模型组大鼠的呼气阻力显著高于对照组和氨氯吡咪组，0．3s用力呼气容积／用力肺活量、呼气峰流速均显著低于对照组和氨氯吡咪组；模型组大鼠的BALF中自细胞总数、中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞构成比显著高于对照组和氨氯吡咪组；模型组大鼠以I型胶原为主的细胞外基质在气道壁过度沉积，胶原面积显著高于对照组和氨氯吡咪组；模型组大鼠支气管肺组织u-PA、u-PA受体和PAI-1蛋白表达的平均吸光度值[（0．166±0．010）、（0．158±0．024）和（0．171±0．012）]显著高于对照组[（0．137±0．015）、（0．122±0．009）和（0．144±0．005）]及氨氯吡咪组[（0．126±0．004）、（0．120±0．010）和（0．122±0．004）]，且u-PA受体蛋白表达与中性粒细胞构成比呈显著正相关。结论应用u-PA抑制剂氨氯吡咪可显著减轻COPD大鼠的气道炎症和病理结构改变，u-PA系统成分是COPD气道炎症和组织重塑环节中具有关联作用的重要物质。     

糖尿病对老年急性心肌梗死患者住院病死率的影响

目的探讨糖尿病是否为影响老年急性心肌梗死（AMI）患者住院病死率的独立危险因素。方法回顾分析1414例老年AMI患者，根据是否合并糖尿病分为两组，比较两组患者的临床特征、住院治疗和并发症发生率，并对可能影响老年AMI患者住院病死率的因素进行多因素回归分析。结果糖尿病组患者女性较多，多伴有高血压和高脂血症，心功能≥KiuipⅢ级者较多，急性期再灌注治疗率较低。糖尿病组患者住院病死率显著高于非糖尿病组（16．5％VS8．6％，P〈0．001）。多因素回归分析显示高血压、糖尿病、心功能Killip分级、再灌注治疗均为影响AMI患者住院病死率的独立危险因素。结论糖尿病是影响AMI患者住院病死率的独立危险因素。     

心肌缺血的能量代谢及代谢药物治疗

心肌缺血是一种代谢病，优化心肌能量代谢可减轻心肌缺血引起的损伤，改善心肌功能。因此。减少脂肪酸生成和氧化代谢并增加葡萄糖氧化代谢，将成为心肌能量代谢支持的核心目标。本文就心肌缺血时的能量代谢．代谢药物治疗的作用机制及其有关的实验和临床研究以及优化能量代谢的临床意义进行综述。     

按体重给药与小剂量rt-PA治疗国人急性心肌梗死的随机对照研究

目的探讨国人应用重组组织型纤溶酶原激活剂（rt-PA）溶栓治疗急性心肌梗死（AMI）的合适剂量.方法所有入选患者随机分入按体重给药和小剂量rt-PA两个治疗组,按体重给药组（W组）93例,AMI患者在应用阿司匹林和肝素治疗基础上,首先给予8 mg的rt-PA静脉推注,继之按1 mg/kg算出需静脉点滴维持的总量给予静脉滴注（最低不少于42 mg,最高不多于92 mg）,90 min滴注完毕.小剂量组（L组）91例AMI患者,在应用阿司匹林和肝素治疗基础上,先给予8 mg的rt-PA静脉推注,继之42 mg在90 min内滴注完毕.观察终点：包括两组梗死相关动脉开通率（根据临床标准判断）、左室射血分数、发病30天主要心血管事件发生率.结果 W组93例患者中据临床标准判定再通者74例（79.6%）,L组91例患者中据临床标准判定再通者59例（64.8%）,两组比较有统计学意义（P=0.026）,W组左室射血分数略好于L组（P=0.259）和发病30天主要心血管事件发生率低于L组（P＜0.05）.结论按体重给药应用rt-PA治疗急性心肌梗死疗效和安全性优于国内常用的小剂量rt-PA治疗.     

乙醛脱氢酶2基因多态性与血管内皮功能及动脉粥样硬化关系的研究

目的应用高分辨力超声技术对肱动脉舒张功能及血流动力学进行评价,并结合定量冠状动脉(冠脉)造影结果,探讨乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因多态性与血管内皮功能及动脉粥样硬化之间关系。方法150例经冠脉造影证实的冠心病患者,根据基因测序结果分为A组(野生型)93例(62%)和B组(突变型)57例(38%),观察两组患者冠心病易患因素及冠状动脉病变程度,同时应用高分辨力超声技术评价肱动脉舒张功能及相应状态下血流最大剪切率。结果两组患者基本临床特征比较差异无统计学意义(P>0.05)。B组患者多支病变率显著低于A组(57.9%对76.4%,P=0.017),Gensini评分亦低于A组(46.3±35.7对61.8±49.3,P=0.04)。高分辨力超声检查:肱动脉基础内径两组间差异无统计学意义(P>0.05)。内皮依赖性血管舒张功能检查:反应性充血后肱动脉内径变化两组间差异无统计学意义(P>0.05);非内皮依赖性血管舒张功能检查:含化硝酸甘油后B组血管内径的增幅较A组显著减少(P<0.05),表明B组患者对硝酸酯类药物反应能力较低。脉冲多普勒检查血流动力学,基础状态及反应性充血后肱动脉最大剪切率A组显著低于B组(P<0.01),提示野生型患者易发生动脉粥样硬化。结论ALDH2基因多态性与血管内皮功能及动脉粥样硬化之间关系密切。ALDH2基因突变虽可导致非内皮依赖性血管舒张功能障碍,但内皮依赖性血管舒张功能不受影响。ALDH2基因突变可能具有抗动脉粥样硬化的作用。     

不确定潜能的克隆性造血与心血管疾病

目前将非血液系统恶性肿瘤患者外周血可检测突变体细胞比例>2%定义为不确定潜能的克隆性造血（CHIP）。CHIP相关突变以DNMT3A、TET2、ASXL1、JAK2、TP53为多见,携带者血液系统恶性肿瘤发病率升高。此外,近期研究发现CHIP与心血管疾病风险增加独立相关,CHIP携带者冠状动脉钙化评分、急性心肌梗死发生...