Neprilysin基因在大鼠体外培养骨髓基质细胞中的表达

目的探讨人Neprilysin基因在小鼠MSCs中的表达情况。方法分离培养小鼠MSCs，采用分子克隆技术构建Neprilysin—pEGFP重组质粒，将此Neprilysin—pEGFP重组质粒用脂质体转染进MSCs中，在荧光倒置显微镜下观察该基因在MSCs中的表达效率。结果经酶切鉴定得到系列正确的重组Neprilysin—pEGFP。Neprilysin可在MSCs中表达且通过脂质体传染的效率是20％。结论获得了表达Neprilysin基因的骨髓基质细胞，为进一步探讨将该细胞用于阿尔茨海默病基因治疗的可能性研究提供了技术基础。     

磁共振成像在肝移植术后并发症诊断中的应用

目的探讨磁共振成像在肝移植并发症诊断中的价值。方法回顾分析11例肝移植术后发生并发症者的磁共振检查影像资料。结果11例患者术后出现皮肤和巩膜黄染、发热以及尿黄等症状，丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转移酶和胆红素升高．经B型超声波检查不能明确原因，采用磁共振（MRI、MRA和MRCP）检查，明确肝动脉吻合口狭窄1例；肝动脉闭塞2例；下腔静脉吻合口狭窄及血栓形成各1例；胆管吻合口狭窄4例，其中1例伴胆汁瘤形成；肝门水平非吻合口狭窄6例；肝坏死2例；肝包膜下血肿及右肾上腺出血各1例；均显示不等量的右侧胸腔积液、腹腔积液及肝门部水肿。结论磁共振一次检查可显示肝内外的多种结构，能为肝移植术后并发症的诊断提供丰富的肝脏、血管、胆道以及肝外结构的图像信息。     

机械压力对人脐静脉内皮细胞ET-1、NO合成的影响和意义

目的探讨压力增高对血管内皮细胞分泌血管活性物质功能的影响及其在门静脉高压症发病机制中的作用。方法用RT-PCR方法半定量研究人脐静脉内皮细胞ET-1、eNOS、i-NOS mRNA的表达;用硝酸还原酶法检测各组细胞培养液中NO代谢产物NO2-/NO3-的含量,免疫荧光标记激光扫描共聚焦显微镜检测培养细胞的ET-1蛋白表达。结果ET-1和eNOS mR-NA在正常培养的内皮细胞中即有表达,iNOS mRNA则几乎无表达。生理水平压力刺激下各组各待测基因mRNA表达与对照组无显著性差异。超生理范围压力刺激后,ET-1 mRNA有显著性升高。eNOS mRNA在40 mm Hg 24 h后才有显著性差异。iNOS mRNA在不同条件下均无显著变化。在细胞培养液中分别加入细胞外钙螯合剂EGTA、PKC抑制剂后,则见ET-1、eNOS mRNA表达下降。结论压力增高可刺激血管内皮细胞合成ET-1、NO,其作用在转录水平,其作用机制分别与PKC信号通路和细胞外钙浓度有关。门静脉压力增高与血管内皮细胞合成ET-1、NO增多之间存在相互作用。     

降钙素防治骨质疏松模型兔的人工假体无菌性松动的实验研究

[目的]探讨降钙素对已行人工假体植入骨质疏松模型免的假体无菌性松动防治作用的实验研究。[方法]将30只假体植入模型的骨质疏松症兔随机分成实验组和对照组，各15只。实验组给予鲑鱼降钙素治疗（6U／kg，肌注，隔日1次），而对照组给予等量的生理盐水肌注，持续治疗半年。两组均分别于术前、术后4、8、12和24周检测假体周围感应区（ROI）骨密度（BMD）；于术前及术后4、12、24周行血清骨代谢指标检测：骨特异性碱性磷酸酶（BALP）、骨钙素（BGP）、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b（TRAP-5b）；所有动物于术后24周处死，分别行假体拔出实验与扭转实验测定和假体周围骨组织形态计量学分析。[结果]术后24周，实验组假体周围局部感兴趣区BMD增加近5％，而对照组假体周围局部感兴趣区BMD下降了6％，两组比较有显著性差异（P〈0．01）；骨代谢指标中，术后24周实验组的BALP、BGP稍有下降，但组内无显著性差异（P〉0．05），而TRAP-5b有明显下降（P〈0．05），这些指标与对照组比较差异显著（P〈0．05或P〈0．01）；生物力学检测显示，实验组的假体拔出实验较对照组提高了约50％，扭转实验提高近1倍，且两组比较差异显著（P〈0．01）；骨组织形态计量学显示，实验组中反映骨吸收的Oc．No／Tb．Pm、ES／BS明显减少；反映骨量和微结构的％Tb．Ar、Tb．N明显增多，而Tb．Sp明显变窄：反映骨形成与骨矿化的OS／BS、MAR、BFR／TV及％L．Pm也均明显增多；这些指标与对照组比较差异显著（P〈0．01或P〈0．05）。[结论]鲑鱼降钙素能明显减少人工假体周围骨量的丢失和抑制骨溶解；并加快假体周围的骨形成，提高骨密度，促进生理性骨矿化；还能改善骨质量，促进骨微结构改变，提高骨的生物力学特性并增加假体四周的支撑力。其对骨质疏松症兔的假体松动有明显的预防和治疗作用。这对临床预防和治疗人工关节的无菌性松动有很好的指导意义。     

动脉瘤性蛛网膜下腔出血后慢性脑积水

目的探讨动脉瘤性蛛网膜下腔出血后(aSAH)慢性脑积水的发生率及其易患因素。方法回顾性研究2003年1月至2005年9月我科aSAH病例221例,采用单因素及多因素统计方法分析与慢性脑积水发生的相关影响因素。结果慢性脑积水的发生率为12.7%(28/221)。经单因素分析显示,患者年龄、Hunt-Hess级别、Fisher级别、前交通动脉瘤、aSAH次数以及脑室内出血具有统计学意义;多因素logistic回归分析显示,Fisher级别、脑室内出血、aSAH次数、前交通动脉瘤具有统计学意义。结论慢性脑积水为aSAH后一较常见并发症,影响其发生的高危因素包括Fisher级别、脑室内出血、aSAH次数、前交通动脉瘤。对具上述危险因素的aSAH患者应注意跟踪随访,及时诊治。     

缺氧诱导因子与肿瘤

缺氧是癌症的共同特征，除了潜在地降低放、化疗的疗效外，还有助于肿瘤在局部和全身的进展。缺氧诱导因子-1α（hypoxia—inducible factor，HIF-1α）在癌症生理的许多方面发挥作用，包括细胞生存、葡萄糖代谢、癌细胞浸润和血管生成的70多个基因的转录为靶目标。在对缺氧、生长因子刺激、癌基因和原癌基因活化进行应答时HIF-1α被过度表达和（或）活化，并以促进血管形成、适应低氧和维持细胞存活的基因为靶目标。已报道的各种调节因素包括生长网子、基因突变、应激刺激因子和某些癌基因能调节HIF-1α，此过程涉及的信号通路取决于刺激因素和细胞类型。HIF-1α的活化及信号通路和调节因子的活化与肿瘤进展和预后有关。     

精子冷冻环无保护剂玻璃化冷冻方法的初步研究

目的探讨精子冷冻环无保护剂玻璃化冷冻方法的可行性。方法正常精液标本上游处理后,进行常规冷冻和冷冻环无保护剂的玻璃化冷冻,复苏后分别从活力参数及电镜下超微结构等指标比较两种冷冻方法的效果。结果两种方法冷冻后精子存活率、活动率之间差异无显著性(48%∶48%;44.5%∶43.5%,P>0.05),但均较未冷冻的89%和88.5%明显下降(P<0.001)。超微结构亦较未冷冻时发生了一定的改变,但核结构基本保持完整。结论精子冷冻环无保护剂的玻璃化冷冻是一种简单、方便而行之有效的冷冻方法。     

大鼠脑损伤局部谷氨酸的异常释放对乳酸含量变化的影响

目的探讨谷氨酸(Glu)在大鼠脑损伤局部的异常释放以及其对乳酸(Lac)含量变化的影响。方法采用大鼠局部脑损伤动物模型,分为对照组、损伤组、干预组。伤前15min干预组注射Riluzole(一种Glu突触前释放抑制剂),损伤组注射等容量的生理盐水,对照组仅开骨窗不损伤脑。应用微透析技术检测各组伤后不同时间透析液中Glu含量([Glu]d)及Lac含量([Lac]d)变化。结果[Glu]d及[Lac]d在伤后15min、30min和45min干预组明显低于损伤组(P<0.05),而明显高于对照组(P<0.05);在伤后60min,损伤组仍明显高于对照组(P<0.05)。伤后不同时间[Glu]d和[Lac]d变化呈显著正相关(P<0.01)。结论脑损伤后受损脑组织细胞液中Glu水平的升高是Glu神经元末梢大量释放Glu所致,并继而引起了Lac的含量升高。     

Ⅱa型多发性内分泌瘤一例

患者,女,35岁。1991年因阵发性头痛、高血压,于当地医院检查发现甲状腺左叶肿块,行手术切除,病理结果为甲状腺髓样癌。术后症状不改善,CT发现右肾上腺占位,在我院行开放性右肾上腺肿物切除术,病理提示嗜铬细胞瘤,术后上述症状明显减轻。次年又发现右侧甲状腺肿块,如枣大小,未作处理。因阵发性头痛、高血压等症状复发半年,且出现声音嘶哑,于2002年8月再入我院,体检示颈前偏左可及约3 cm大小结节,质中,表面光滑,活动较差,右侧可及数个约1 cm大小肿大淋巴结,活动可。CT提示两侧肾上腺区域可见大小不一的分叶状肿块。经腹腔路径行腹腔镜左侧肾…     

刺五加水提物对人精子体外运动活力的影响

目的研究刺五加水提物对正常男性精子体外运动活力的影响，探讨其可能的作用机制。方法将20例正常男性的精子通过上游优化法处理后，一组精子加入10 mg·mL^-1的刺五加水提物，另一组加入等量的Ham’s F10培养液作对照。应用计算机辅助的精子分析系统，分别测定孵育0.5，1，2，3，4，5 h后人精子各运动参数。结果随着时间的延长，加入Ham’s F10培养液的精子活动能力有不同程度的下降；加入10 mg·mL^-1的刺五加水提物后，不同时段精子的运动能力均较对照组明显提高，精子存活率、前向运动精子百分率、曲线运动速度、直线运动速度和平均路径速度与对照组比较，均明显改善(均P＜0.05)。 结论刺五加水提物能明显提高正常男性精子的体外存活率和运动能力。