三氧化二砷诱导K562／ADM细胞凋亡过程中对bcl-2、survivin、ROS表达的影响

[目的]探讨As2O3诱导白血病K562／ADM耐药细胞凋亡的分子机制。[方法]采用MTT比色法检测K562／ADM增殖活性：细胞形态学和Annexin Ⅴ／PI双染色检测细胞凋亡：RT—PCR检测bcl-2、survivin和caspase-3基因mRNA的表达水平；流式细胞法（FCM）测定bcl-2、caspase-3蛋白表达。激光共聚焦显微镜（LCSM）观察细胞内活性氧（ROS）产生情况。[结果]As2O3显著抑制K562／ADM细胞的增殖；经As2O3处理后细胞形态上出现典型的凋亡改变，AnnexinⅤ／PI双染显示凋亡细胞明显增加：凋亡抑制基因bcl-2、survivin mRNA及bcl-2蛋白表达下调，caspase-3 mRNA表达和caspase-3活性显著增强，ROS活性下降。[结论]As2O3诱导K562／ADM耐药细胞凋亡，与bcl-2和survivin表达下调，caspase-3活化有关，而与活性氧的氧化损伤无关。     

甘肃省农村居民预防传染病常识的干预研究

目的 通过对农村居民进行预防传染病知识的健康教育干预,评价农村居民卫生科普知识认知及改善情况,并寻找有效途径,为今后政府相关部门制定卫生法规提供参考依据.方法 以甘肃省榆中县农村居民为调查对象,通过预防传染病知识的卫生科普讲座、发放宣传资料等措施进行健康教育干预,通过与基线调查的比较,对干预效果进行分析、评价.结果 本次健康教育干预使农村居民对艾滋病、甲肝、乙肝及茵痢传播途径的正确认知率有了明显提高.结论 通过讲座、发放宣传材料等方式对农村居民进行预防传染病健康教育,是一种简单、有效的干预措施.     

血管紧张素Ⅱ对成人脂肪间充质干细胞向心肌细胞分化的影响

目的:观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对成人脂肪间充质干细胞(ADMSCs)向心肌细胞方向分化的诱导作用,并与5-氮杂胞苷(5-aza)作比较.方法:自成人脂肪组织中分离培养ADMSCs,分别用Ang Ⅱ(Ⅰ组)和5-aza(Ⅱ组)诱导ADM-SCs,同时设立对照组(Ⅲ组),光镜下观察细胞的生长情况及形态学变化,电镜下观察细胞的超微结构,免疫细胞化学方法检测心肌特异性肌钙蛋白-Ⅰ(cTn-Ⅰ),MTT法检测细胞活性,流式细胞术分析细胞周期及凋亡.结果:Ⅰ,Ⅱ组ADM-SCs诱导后呈现类似心肌细胞的形态学特征,第28日Ⅰ,Ⅱ组均表达cTn-Ⅰ,两组间诱导转化率无差别,其中Ⅰ组ADM-SCs增殖迅速,较少凋亡细胞.结论:AngⅡ在促进ADMSCs增殖的同时诱导其向心肌细胞分化,优于传统的化学诱导剂5-aza.     

人源肝癌HepG2细胞胰岛素抵抗和逆转模型中FoxO1 mRNA和蛋白表达水平及其意义

目的：探讨人源肝癌HepG2细胞胰岛素抵抗（IR）模型（HepG2/IR）和逆转模型（HepG2/IR-PH）中叉头状转录因子O1（FoxO1）的mRNA和蛋白表达水平,阐明该基因参与IR的作用机制。方法：选择人源肝癌HepG2细胞,采用终浓度1×10^-10、1×10^-9、1×10^-8、1×10^-7、1×10^-6和1×10^-5mol·L^-1胰岛素诱导24、48和72 h,对照组细胞不加胰岛素,用葡萄糖氧化酶法检测上清液中葡萄糖水平,计算各组细胞的葡萄糖消耗量,以确定IR模型建立的最佳诱导条件;采用终浓度为0.156、0.313、0.625、1.250、2.500、5.000、10.000、20.000mmol·L^-1盐酸吡咯列酮（PH）诱导HepG2建立逆转抵抗模型,同时设立对照组,MTT法检测细胞增殖活性,确定PH的最佳逆转浓度;利用Real-time PCR法和Western blotting法检测各组细胞FoxO1 mRNA和蛋白表达水平。结果：1×10^-7 mol·L^-1胰岛素作用36 h,葡萄糖消耗量减少45.84%,发生明显的IR,与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组比较,1.25 mmol·L^-1PH逆转抵抗24 h,细胞增殖活性无明显变化（P>0.05）。人源肝癌HepG2细胞发生IR时,与对照组比较,FoxO1 mRNA和蛋白的表达水平均明显升高（P<0.01）;IR模型逆转后,与对照组比较,FoxO1mRNA和蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论：人源肝癌HepG2细胞IR与FoxO1mRNA的表达有关联性,FoxO1 mRNA表达水平检测有可能作为胰岛素增敏剂的药效评估指标,降低FoxO1 mRNA表达水平可作为2型糖尿病治疗的新靶点。     

硒酸酯多糖诱导白血病多药耐药细胞凋亡的作用机制

目的:观察硒酸酯多糖(Kappaselenocarrageenan,KSC)对K562ADM耐药细胞的诱导凋亡效应,并探讨其作用机制。方法:应用噻唑蓝(MTT)比色法、WrightGiemsa染色、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术(Flowcytometry,FCM)观察K562ADM细胞凋亡;FCM测定K562ADM细胞Fas、P53和Bcl2蛋白表达水平;RTPCR检测Caspase3mRNA的表达。结果:50～500mg·L-1KSC抑制K562ADM细胞增殖,并诱导K562ADM细胞凋亡,细胞出现呈典型凋亡形态改变,DNA电泳可见DNA梯状条带(DNAladder);FCM分析出现亚G1期细胞群,S期细胞比例增高。Fas蛋白表达上调,Bcl2蛋白表达下调,Caspase3mRNA表达显著增强,但P53蛋白表达无明显改变。结论:KSC通过Fas依赖性Caspase3激活途径诱导K562ADM细胞凋亡。     

多重耐药革兰阴性杆菌耐药谱及其抗消毒剂基因检测

目的了解临床感染标本分离的多重耐药革兰阴性杆菌对临床常用抗菌药物耐药谱及其抗消毒剂基因携带状况。方法采用K-B试验法和聚合酶链反应检测法,对临床分离的多重耐药革兰阴性杆菌进行了药敏试验和qacE△1-sul1基因检测。结果临床分离的252株革兰阴性杆菌对常用抗生素耐药率普遍较高,且耐药谱广。在252株革兰阴性杆菌中,有197株qacE△1-sul1基因检测阳性,总阳性率为78.71%。结论临床感染标本分离的多重耐药革兰阴性杆菌qacE△1-sul1基因携带率比较高,对临床常用抗生素普遍耐药,应加强防范。     

扶正解毒汤对硫酸镍诱导16HBE细胞微核形成的抑制作用

背景与目的:研究中药扶正解毒汤(FJD)对硫酸镍(NiSO4)诱导人支气管上皮细胞(16HBE)微核形成的抑制作用.材料与方法:分别以NiSO4暴露、不同浓度FJD含药血清与NiSO4共同处理体外培养的16HBE细胞,观察其微核率的变化,并采用激光扫描共聚焦显微镜检测不同处理组细胞内Ni2+、Mg2+、Zn2+浓度及自由基含量的变化.结果:与阴性对照组相比,NiSO4(400 μmol/L)暴露组细胞微核率、细胞内Ni2+浓度及自由基含量均明显增高(P＜0.01),而细胞内Mg2+、Zn2+浓度则明显降低(P＜0.01).与NiSO4暴露组相比,低、中、高剂量FJD血清与NiSO4共处理组细胞微核率分别为(62.4±11.5)‰、(35.2±7.1)‰及(27.6±5.6)‰,显著低于NiSO4暴露组(P＜0.05,P＜0.01),细胞内Ni2+浓度及自由基含量下降,Mg2+、Zn2+浓度升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:FJD对镍诱导16HBE细胞微核形成有明显的抑制作用,其机制可能与调节染镍细胞内某些金属元素含量变化及清除自由基有关.     

白藜芦醇通过Fas-线粒体双途径诱导U-87脑胶质瘤细胞凋亡

目的研究白藜芦醇（Res）对人脑胶质瘤细胞系U-87细胞增殖抑制和诱导凋亡作用,并探讨其分子机制。方法以人脑胶质瘤细胞系U-87细胞为靶细胞,应用四氮唑蓝（MTT）比色法测定细胞增殖活性;AnnexinV/碘化丙啶（PI）双标记和细胞形态学法检测U-87细胞凋亡;流式细胞仪（FCM）检测细胞Fas蛋白表达水平、线粒体跨膜电位（Δψm）、细胞色素C（Cytc）释放和Caspase-3活性变化。结果Res明显抑制U-87细胞的增殖,呈浓度及时间依赖性（P〈0.01）;20μmol/L和40μmol/LRes处理U-87细胞,AnnexinV/PI染色显示凋亡细胞明显增多,细胞凋亡率分别为42.57%和62%,同时细胞出现典型的凋亡形态改变;FCM检测显示Fas蛋白表达增高1.6～2.2倍,线粒体Δψm降低15%～63%,胞浆Cytc含量增加2.5～7.3倍,Caspase-3被激活,活性增高25%～112%。结论Res体外明显抑制U-87细胞的增殖,通过Fas-线粒体双途径诱导U-87细胞凋亡。     

步长稳心颗粒与肌氨肽苷注射液治疗充血性心力衰竭合并心律失常疗效观察

1 临床资料 我院2004-01／2008-01收治充血性心力衰竭合并室性心律失常患者164（男102,女62）例,年龄46—89（63．5±9．8）岁,其中冠心病88例（陈旧性心肌梗死20例）,高血压心脏病46例,扩张性心肌病10例,风湿性心瓣膜病20例．心功能Ⅲ～Ⅳ级,左室射血分数〈0．40．频发室性早搏（VPC）100例（成对室性早搏49例）,阵发性室性心动过速（PVT）28例,合并Ⅰ度房室传导阻滞36例．剔除Ⅱ度及Ⅱ度以上房室传导阻滞、病态窦房结综合征．     

LMO3基因在人脑胶质瘤组织中的表达及意义

目的 观察LMO3基闪在人脑胶质瘤组织中的表达与临床病理特征的关系.方法 用半定量方法检测44例人脑胶质瘤组织与12例正常脑组织中经逆转录-聚合酶链式反应扩增后的LMO3基因表达.结果 LMO3基因在胶质瘤、正常脑组织中均有表达,在低分化胶质瘤中(Ⅲ～Ⅳ级16例)的表达高于高分化胶质瘤(Ⅰ～Ⅱ级28例,P<0.05);在高分化胶质瘤组和低分化胶质瘤组的表达均高于正常脑组织组(12例,P<0.05).结论 LMO3基因的表达水平与胶质瘤的分化程度相关.