脱氧核糖核酸甲基化对肝细胞核因子4α表达的影响

目的 探讨DNA甲基化对肝细胞核因子4α(HNF4α)表达的影响,及其在转化生长因子-β1 (TGF-β1)调节HNF4α表达过程中所起的作用.方法 用实时RT-PCR方法检测6种人肝癌细胞株(HepG2、Huh-7、Hep3B、SMMC-7721、BEL-7405、FOCUS)、20份人肝癌和相应癌旁组织中HNF4αP1 mRNA的表达.用亚硫酸盐测序法(BSP法)检测6种人肝癌细胞株中HNF4αP1启动子区甲基化程度.用5-脱氧杂氮胞苷(5-AZA-CdR)处理FOCUS细胞株,用BSP法检测HNF4αP1启动子区甲基化程度,用实时RT-PCR法检测HNF4αP1 mRNA的表达.用TGF-β1处理6种人肝癌细胞株,用实时RT-PCR法检测HNF4αP1 mRNA的表达.分别用5-AZA-CdR、TGF-β1、5-AZA-CdR联合TGF-β1处理FOCUS细胞株,用实时RT-PCR法检测HNF4αP1 mRNA的表达.采用f检验进行统计学分析.结果 在20份人肝癌和癌旁组织中,13份肝癌组织的HNF4αP1 mRNA相对表达量低于癌旁组织(f=2.350,P＜0.05).HepG2、Huh-7、Hep3B中的HNF4αP1 mRNA相对表达量较高,SMMC-7721、BEL-7405、FOCUS中则相对较低.HepG2、Huh-7、Hep3B中HNF4αP1启动子区甲基化程度较低,SMMC-7721、BEL-7405、FOCUS中则较高.随着5-AZA-CdR浓度上升(分别为0、0.1、1.0、2.5 μmol/L),FOCUS的HNF4αP1启动子甲基化程度逐渐降低(分别为61％、46％、32％、27％),而HNF4αP1 mRNA相对表达量则逐渐增加(分别为[(9.661±0.336)×10-7、(2.001±0.432)×10-6、(3.689±0.714)×10-6、(4.732±2.451)×10-6].经TGF-β1刺激后,启动子区甲基化程度较低的HepG2、Huh-7、Hep3B的HNF4αP1 mRNA相对表达量下调(t=12.994、8.441、9.032,P均＜0.01),启动子区甲基化程度较高的SMMC-7721、BEL-7405、FOCUS的HNF4αP1 mRNA相对表达量变化差异均无统计学意义(P均＞0.05).经5-AZA-CdR处理的FOCUS细胞株的HNF4αP1 mRNA相对表达量[(4.972±0.035)×10-6]高于空白对照组[(1.411±0.104)×10-6],差异有统计学意义(t=13.212,P＜0.01).经5-AZA-CdR联合TGF-β1处理的FOCUS细胞株的HNF4αP1 mRNA相对表达量[(1.181±0.132)×10-6]低于单用5-AZA-CdR处理组[(4.972±0.035)×10-6],差异有统计学意义(t=13.873,P＜0.01).结论 肝癌组织中HNF4αP1表达水平下调.DNA甲基化可调控HNF4αP1在人肝癌细胞株中的表达.HNF4αP1启动子区甲基化可抑制TGF-β1对HNF4αP1表达的调节作用.     

老年冠心病合并心力衰竭患者医院感染的病原学特点及危险因素分析

目的探究老年冠心病合并心力衰竭患者医院感染的病原学特点及危险因素。方法回顾性分析2017年2月至2017年7月本院心内科收治的421例老年冠心病合并心力衰竭患者的临床资料,探讨老年冠心病合并心力衰竭患者医院感染的病原学特点及危险因素。结果 421例老年冠心病合并心力衰竭患者中,44例患者发生医院感染,其中呼吸系统、泌尿系统、消化系统、皮肤软组织感染率分别为56.82%、13.64%、18.18%、11.36%。44例发生医院感染者病原体培养共发现病原体92株,以铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌为主,分别占25.00%、16.30%、16.30%。铜绿假单胞菌和大肠埃希菌对左氧氟沙星、亚胺培南的敏感性较高,前者对头孢哌酮舒巴坦、头孢曲松、庆大霉素有较强耐药性,后者对氨苄西林、阿莫西林有较高耐药性;金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁敏感性较高,对阿莫西林、环丙沙星具有较高的耐药性。年龄≥65岁、有慢性阻塞性肺疾病病史、有糖尿病病史、有吸烟史、纽约心脏协会心功能分级≥Ⅲ级、住院天数≥7 d、血浆白蛋白水平<30 g/L均为老年冠心病合并心力衰竭患者发生医院感染的独立危险因素(P_均<0.05)。结论熟悉老年冠心病合并心力衰竭患者医院感染的常见致病菌,明确危险因素,有利于临床及时采取有效的干预措施,以降低老年冠心病合并心力衰竭患者医院感染发生率。     

军医院校针灸人才培养实践与探讨

针灸作为非药物治疗的代表性方法,疗效显著,适宜范围广泛,设备要求简单,近年来在各国军队开始快速普及推广,我国军医院校如何培养自己的针灸人才值得思考。本文认为军医针灸人才培养是一个长期、系统的过程,从课堂教学、临床实习及后期继续教育角度,探讨了在军医院校如何进行针灸教学,高质量培养军医针灸人才的方法。     

COPD病人及家属视角下COPD护理团队培训需求调查

[目的]了解慢性阻塞性肺疾病(COPD)病人及其家属视角下COPD护理团队的培训现状及学习需求。[方法]采用自行设计的问卷进行调查,发出调查问卷70份,回收有效问卷64份,有效回收率为91.4%。[结果]COPD病人及家属认为COPD护理团队在基本理论知识部分掌握率均偏低,专科护理技能中吸入制剂(非常需要率62.5%,掌握率34.3%)和无创呼吸机(非常需要率57.8%,掌握率29.7%)需加强培训。71.9%的受访者认为在线理论考试作为继续教育考核方式比较方便,45.3%的受访者认为护理人员接受了操作技能考试。[结论]对COPD护理团队进行系统化专业培训很有必要。     

春季再谈小儿过敏哮喘

哮喘在儿科中最常见,春季是小儿过敏哮喘的高发季节.虽然哮喘是儿科的高发疾病,但其实它是一种可以被控制和预防的疾病.因此深入了解及研究其发病的相关因素、治疗及预防,有助于更好地治疗儿童过敏性哮喘.本文对目前儿童过敏性哮喘的研究进展做一综述.     

急诊护士工作压力源及相关因素分析

从急诊工作的特殊性、急诊护士的自身原因和护惠关系方面分析急诊护士的压力来源，探讨减轻压力的对策。     

一种新型可调下肢抬高器在静脉回流障碍患者护理中的应用效果

目的探讨一种新型可调下肢抬高器在静脉回流障碍患者护理中的应用效果。方法选取80例静脉回流障碍患者,随机分为对照组及观察组各40例,对照组按常规进行护理,观察组应用新型可调下肢抬高器进行干预,对比分析2组患者舒适度,下肢肿胀程度的改善以及护理人员的劳动时间。结果观察组患者舒适度为97.5%,对照组患者舒适度为75%,差异具统计学意义(P0.05),观察组患者下肢肿胀程度在抬高24h、48h、72h时均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);观察组护理人员劳动时间明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论对于静脉回流障碍患者应用新型可调下肢抬高器,可有效提高患者的舒适度,改善患者下肢肿胀程度,缩短护理人员的劳动时间。     

肝细胞核因子4α对肝肿瘤细胞功能基因表达的影响

目的利用AdEasy系统构建共同表达人肝细胞核因子4α（HNF4α）和绿色荧光蛋白（GFP）的复制缺陷型重组腺病毒——AdHNF4α，体外感染人肝肿瘤细胞株，观察HNF4α表达上调对肝肿瘤细胞的肝细胞功能基因表达的影响。方法通过逆转录（RT）-PCR方法获取目的基因HNF4αcDNA片段，利用腺病毒载体AdEasy系统构建腺病毒质粒pAdHNF4α，经293细胞包装后得到复制缺陷型重组腺病毒AdHNF4α；将AdHNF4α体外感染人肝肿瘤细胞株HepG2和Hep3B，通过RT—PCR、Western印迹法检测HNF4α在上述细胞中的表达；同时观察外源导人HNF4α对肝肿瘤细胞的肝细胞功能基因表达的影响。结果连接、重组后通过酶切和测序法筛选出病毒质粒pAdHNF4α；经293细胞包装，4d后观察到GFP明显表达，反复扩增最终获得约1×10^10efu／ml滴度的重组腺病毒AdHNF4α；AdHNF4α体外感染人肝肿瘤细胞72h后，有约90％以上的细胞表达GFP，HNF4αmRNA表达明显上调，蛋白表达分别增加3．4倍（HepG2）和5．2倍（Hep3B）；同时肝细胞相关功能基因包括载脂蛋白、细胞色素P450家族、谷氨酰胺合成酶、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶及葡萄糖-6-磷酸酶mRNA表达均明显上调，且肿瘤细胞凋亡率也明显增加。结论利用重组腺病毒载体可将外源HNF4α基因导入肝肿瘤细胞并维持高效表达，同时正常肝细胞重要功能基因表达亦增强，肿瘤细胞生物学特性明显改善，这将为基因修饰移植肝细胞研究提供新思路。     

国内首例达芬奇机器人单孔肾上腺肿瘤切除术的护理配合

目的：探讨国内首例行达芬奇机器人单孔肾上腺肿瘤切除术的护理配合方法。方法：总结我院1例达芬奇机器人单孔肾上腺肿瘤切除术患者的手术护理配合方法。结果：患者手术过程顺利,手术成功,于术后10天顺利出院。结论：达芬奇机器人单孔肾上腺肿瘤切除术具有创伤小、出血少、疼痛减轻、术后恢复快等优势,值得推广。