多功能腹膜检查针在结核性腹膜炎诊断中的应用研究

目的评价多功能腹膜检查针在结核性腹膜炎诊断中的应用价值。方法2001年1月至2005年9月对第二军医大学附属上海长征医院消化内科收治的27例结核性腹膜炎住院患者中19例用自制多功能腹膜检查针行腹膜活检,并与患者的临床表现、辅助检查、腹腔镜等检查结果进行比较。结果27例患者中,5例根据症状、体征、血沉、血清和腹水癌抗原(CA125)以及腺苷脱氨酶(ADA)、抗结核抗体、腹水抗酸染色、PPD试验高度考虑结核性腹膜炎,余22例临床诊断依据不足的患者中,19例行腹膜检查针活检,其中14例病理报告提示腹膜结核病,确诊率73.68%,5例病理报告提示纤维组织增生、慢性炎性细胞浸润,不排除腹膜结核病,疑诊率26.32%;另外3例行腹腔镜检查确诊。结论自制多功能腹膜检查针行腹膜活检,操作简单,创伤性小,病理确诊率高,在无腹腔镜的单位或无条件进行腹腔镜检查的疑似结核性腹膜炎患者中,进行该项检查更具实用价值。     

血清甘胆酸测定对慢性肝病的诊断价值

血清甘胆酸是胆固醇在肝细胞内经一系列氧化、还原、脱羧等步骤合成胆汁酸后,再与甘氨酸结合而成,经胆管排泌至胆囊,进餐时随同胆汁排入小肠,对脂肪的消化吸收起重要作用。当肝脏功能受损时,     

胃癌患者血清表皮生长因子的变化

目的探讨人血清表皮生长因子（ｈＥＧＦ）水平与胃癌的关系．方法胃癌患者３３例，男３０例，女３例，年龄３５岁～８１岁，平均６４９岁；慢性胃炎患者３８例，男２５例，女１３例，年龄１８岁～７５岁，平均４３２岁；正常人２０例，男１０例，女１０例．应用ＲＩＡ法检测血清中的ｈＥＧＦ．结果胃癌组血清ｈＥＧＦ（μｇ／Ｌ）为１３５±０６７，正常对照组为０９０±０３３，统计学差异非常显著（ｔ＝２８２５，Ｐ＜００１），慢性胃炎组血清ｈＥＧＦ为０８６±０３３，与正常对照组比较差异无显著性（ｔ＝０４１，Ｐ＞００５）．结论胃癌患者血清ｈＥＧＦ水平升高可能与胃癌发生密切相关．     

肝细胞核因子4α对肝肿瘤细胞功能基因表达的影响

目的利用AdEasy系统构建共同表达人肝细胞核因子4α（HNF4α）和绿色荧光蛋白（GFP）的复制缺陷型重组腺病毒——AdHNF4α，体外感染人肝肿瘤细胞株，观察HNF4α表达上调对肝肿瘤细胞的肝细胞功能基因表达的影响。方法通过逆转录（RT）-PCR方法获取目的基因HNF4αcDNA片段，利用腺病毒载体AdEasy系统构建腺病毒质粒pAdHNF4α，经293细胞包装后得到复制缺陷型重组腺病毒AdHNF4α；将AdHNF4α体外感染人肝肿瘤细胞株HepG2和Hep3B，通过RT—PCR、Western印迹法检测HNF4α在上述细胞中的表达；同时观察外源导人HNF4α对肝肿瘤细胞的肝细胞功能基因表达的影响。结果连接、重组后通过酶切和测序法筛选出病毒质粒pAdHNF4α；经293细胞包装，4d后观察到GFP明显表达，反复扩增最终获得约1×10^10efu／ml滴度的重组腺病毒AdHNF4α；AdHNF4α体外感染人肝肿瘤细胞72h后，有约90％以上的细胞表达GFP，HNF4αmRNA表达明显上调，蛋白表达分别增加3．4倍（HepG2）和5．2倍（Hep3B）；同时肝细胞相关功能基因包括载脂蛋白、细胞色素P450家族、谷氨酰胺合成酶、磷酸烯醇丙酮酸羧激酶及葡萄糖-6-磷酸酶mRNA表达均明显上调，且肿瘤细胞凋亡率也明显增加。结论利用重组腺病毒载体可将外源HNF4α基因导入肝肿瘤细胞并维持高效表达，同时正常肝细胞重要功能基因表达亦增强，肿瘤细胞生物学特性明显改善，这将为基因修饰移植肝细胞研究提供新思路。     

定量RT-PCR法检测脯氨酰4-羟化酶mRNA的表达

脯氨酰４－羟化酶（Ｐ４Ｈ）是胶原合成过程中的关键酶,在肝纤维化时肝组织中Ｐ４Ｈ的表达明显升高,抑制Ｐ４Ｈ活性对于纤维化病变具有很大的治疗价值［１,２］。若通过抑制Ｐ４Ｈ基因的表达来达到抑制Ｐ４Ｈ活性、减少胶原合成,有可能成为抗纤维化治疗的一种有效途径。为了检测靶细胞或靶组织中Ｐ４Ｈ的两种亚基的基因表达水平及观察某些药物对其表达的影响,我们建立了检测Ｐ４ＨｍＲＮＡ的定量ＲＴ－ＰＣＲ方法。１　材料和方法１．１　材料　ＡＭＶ逆转录酶（ＡＭＶ－ＲＴ）为Ｐｒｏｍｅｇａ产品;Ｔａｑ酶、ｄＮＴＰ,ＯｌｉｇｄＴ…     

氧化砷诱导结肠癌细胞凋亡及其分子机制

 目的　观察不同浓度As2O3对结肠癌Lovo、LS-174T细胞株生长的影响。方法　0.125～2μ mo1/L的As2O3与结肠癌细胞株Lovo、LS-174T共同孵育,观察不同浓度As2O3作用不同时间对结肠癌细胞的生长抑制作用、细胞形态学改变、DNA的变化。结果　1～2μ mol/L As2O3作用的结肠癌细胞呈凋亡特征性改变：细胞膜不发生破裂,细胞核出现核浓缩、核碎裂和凋亡小体形成;流式细胞仪检测在G1期前出现亚二倍体凋亡峰;细胞DNA抽提琼脂糖凝胶电泳呈凋亡特征性条带。结论　1～2μ mol/L As2O3可诱导结肠癌细胞凋亡,肿瘤细胞凋亡与Fas、Fas-L表达有关。     

反义寡脱氧核苷酸对脯氨酰4-羟化酶mRNA表达的抑制作用

目的：观察反义寡脱氧核苷酸（ＯＤＮ）对脯氨酰４－羟化酶（Ｐ４Ｈ）两种亚基ｍ ＲＮＡ 表达的影响。方法：采用定量ＲＴ－ＰＣＲ技术检测培养的人皮肤成纤维细胞中Ｐ４Ｈ ｍ ＲＮＡ的相对含量。结果：不同浓度（０．１,０．２,０．５,１．０ μｍ ｏｌ／Ｌ）反义ＯＤＮ处理组,人皮肤成纤维细胞中Ｐ４Ｈ ｍ ＲＮＡ表达水平均显著低于对照组及错配ＯＤＮ 处理组;其中０．１,０．２ μｍ ｏｌ／Ｌ反义ＯＤＮ作用２０ ｈ 时,抑制效应达到最大,５０～７０ ｈ 后,逐渐恢复到对照组水平。正义ＯＤＮ与错配ＯＤＮ对Ｐ４Ｈ ｍ ＲＮＡ表达则无明显抑制作用。结论：反义ＯＤＮ 对Ｐ４Ｈ 两种亚基的ｍ ＲＮＡ表达均有显著和特异的抑制作用。     

亚临床肝性脑病患者脑脊液一氧化氮含量检测及其意义

目前已知一氧化氮(ＮＯ)是重要的生物信使分子和效应分子,在体内广泛参与多种生理、病理过程,如调节血管张力,参与神经传递、介导炎症和免疫反应等。亚临床型肝性脑病(ＳＨＥ)作为肝硬化的一种并发症,不仅出现心理-智力和脑诱发电位的异常,并有脑水肿等不同程度的脑损害,而且往往在脑脊液中有所反映。作者检测了ＳＨＥ患者脑脊液中的ＮＯ含量,旨在探讨ＮＯ与肝性脑病病理生理机制的关系。1　材料与方法11　检测对象ＳＨＥ组:12例。男10例,女2例,年龄35-57岁。为我院消化科1998年5月至1998年12月住院病人,均有肝硬化等慢性肝病基础,但无临床…     

细胞凋亡与肿瘤

细胞凋亡（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）是细胞自然衰老、死亡的一种形式．细胞凋亡规律一旦失常,个体即不能正常发育,或发生畸变或不能存活．１９７２年Ｋｅｒｒｅｔａｌ首先提出这一概念,认为细胞的这种形式的死亡象秋天树叶凋谢一样,其是由基因调控的细胞自我消亡过程,其...