壳聚糖对豚鼠单一心室肌细胞延迟外向钾电流的作用

研究壳聚糖对豚鼠单一心室肌细胞延迟外向钾电流（Ｉｋ）的作用，从离子通道角度初步春作用机理。应用膜片钳全细胞记录方式，设保持电位为－４０ｍＶ，指令电位为－６０￣＋７０ｍＶ，步阶脉冲１０ｍＶ，刺激频率１Ｈｚ，波宽３００ｍｓ，刺激间隔６ｓ的方波钳制方案。结果表明壳聚糖能抑制Ｉｋ，并具有浓度依赖关系，能抑制豚鼠单一心室肌细胞延迟外向Ｋ＾＋电流。     

miR-487a增加MCF-7/MX荷瘤鼠对米托蒽醌敏感性机制探讨

目的:研究miR-487a调控米托蒽醌(MX)耐药的乳腺癌耐药细胞MCF-7/MX荷瘤鼠对MX敏感性的作用与机制。方法:通过裸鼠腋窝皮下接种MCF-7/MX细胞构建荷瘤鼠模型;real-time RT-PCR、Western blot方法检测荷瘤鼠瘤体内注射miR-487aagmir后对移植瘤内miR-487a及BCRP表达的影响;并通过对荷瘤鼠尾静脉注射MX后移植瘤体积和瘤重的检测,研究miR-487a对MCF-7/MX荷瘤鼠药物敏感性的影响。结果:在MCF-7/MX细胞荷瘤鼠瘤体内注射miR-487aagmir诱导miR-487a表达增高约7倍;降低了移植瘤内的BCRP的mRNA和蛋白表达约30%;且显著降低了MX处理的MCF-7/MX细胞荷瘤鼠移植瘤的重量,即增加了对MX的敏感性。结论:miR-487a抑制了MCF-7/MX细胞荷瘤鼠的BCRP表达,增加其对米托蒽醌的敏感性。     

长柱金丝桃的化学成分

目的:研究长柱金丝桃Hypericum ascyron L.的化学成分。方法:多种色谱方法进行分离纯化,波谱解析结合理化鉴定确定化合物结构。结果:分离得到了10个化合物:槲皮素(1),山柰酚(2),金丝桃苷(3),槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯呋喃糖苷(4),19α-羟基乌苏酸(5),6β,19α-二羟基乌苏酸(6),3β,19α-二羟基乌苏烷-24,28-二酸(7),正二十九烷醇(8),β-谷甾醇(9),豆甾醇(10)。结论:化合物4~10均为首次从该植物中得到。     

早期糖尿病大鼠背根神经节以及主动脉中COX-2 mRNA和血中PGE_2的变化

目的研究早期糖尿病大鼠背根神经节(DRG)以及主动脉中COX-2mRNA及血中PGE2的变化,探讨COX-2mRNA和血中PGE2之间的关系。方法单次注射链佐霉素60mg·kg-1制作大鼠糖尿病模型,随机分成5组:分别为糖尿病模型组1W,3W,4W,8W和对照组。用RT-PCR技术半定量测定DRG中COX-2mRNA,用放射免疫法检测血浆PGE2的浓度。结果DRG中COX-2mRNA与血浆PGE2的变化趋势相同:1W开始增加,3W达峰值,患病后4W内降至基础水平。对照组血浆PGE2未检出,模型组1W增加至453.3±172.8pg·mL-1,3W达到峰值2500±592.14pg.mL-1,到4W时降至380±112.3pg·mL-1,8W后又增至740±173.2pg·mL-1。DRG中COX-2mRNA1W开始上升,3W达到峰值,4W内降至基础水平。主动脉中COX-2mRNA:对照组最高,1W开始下降,8W恢复至正常水平。结论糖尿病大鼠早期血浆PGE2浓度可能部分受DRG中COX-2mRNA水平的调节。     

(-)表没食子儿茶素没食子酸酯在D-半乳糖所致痴呆小鼠体内的抗氧化作用

目的研究(-)表没食子儿茶素没食子酸酯在D-半乳糖所致痴呆小鼠体内的抗氧化作用。方法通过给小鼠皮下注射D-半乳糖(150mg·kg-1)的方法,每天一次,连续注射六周,以制备痴呆小鼠模型。两周后,用(-)表没食子儿茶素没食子酸酯(2mg·kg-1或6mg·kg-1)对模型小鼠灌胃四周治疗。通过进行水迷宫与避暗实验观察(-)表没食子儿茶素没食子酸酯对D-半乳糖所致痴呆小鼠的学习与记忆力的影响。通过对生化指标检测观察(-)表没食子儿茶素没食子酸酯对D-半乳糖所致痴呆小鼠海马的超氧化物歧化酶与谷胱甘肽过氧化物酶活性及丙二醛的含量的影响。结果皮下注射D-半乳糖削弱了小鼠的记忆及学习能力,使D-半乳糖所致痴呆小鼠海马中超氧化物歧化酶与谷胱甘肽过氧化物酶活性下降和丙二醛含量增加。灌胃给予(-)表没食子儿茶素没食子酸酯(2mg·kg-1或6mg·kg-1)明显的改善了小鼠的认知能力,提高了D-半乳糖所致痴呆小鼠海马中超氧化物歧化酶与谷胱甘肽过氧化物酶活性,减少了丙二醛的含量。结论(-)表没食子儿茶素没食子酸酯对D-半乳糖所致痴呆小鼠发挥了一定的抗氧化作用。     

慢性铝暴露对成年大鼠海马LTP及谷氨酸含量的影响

目的采用慢性铝暴露大鼠模型来研究铝暴露对谷氨酸介导的神经传递的影响,进而从递质释放角度阐明在此阶段中铝影响LTP的机制。方法成年Wistar大鼠按体重随机分为3组,分别自由饮用:蒸馏水(对照组),0.2%AlCl3水溶液,0.4%AlCl3水溶液,染毒3个月后测定各项指标。结果随铝暴露剂量增大,大鼠海马齿状回群体峰电位幅值增强率逐渐减小,并呈剂量依赖性。免疫组化结果显示与对照组相比,铝暴露组的谷氨酸活性受到明显抑制,并且随着暴露剂量增大,谷氨酸活性降低,呈剂量依赖性。结论慢性铝暴露可损害成年大鼠海马LTP的诱导与维持,这可能与大鼠海马中谷氨酸的活性降低有关,对正常的学习记忆过程产生不利影响。     

不同散发性乳腺癌群体的BRCA1和CEP17基因拷贝数

目的检测BRCA1和CEP17在BRCA1启动子甲基化和非甲基化的散发性乳腺癌中的基因拷贝数。方法按照BRCA1启动子甲基化状态将46例散发性乳腺癌分成甲基化组和非甲基化组。在由冰冻病理组织制作的组织印片上,应用双色荧光原位杂交(FISH)技术检测BRCA1和CEP17的基因拷贝数。本实验室自行PCR扩增BRCA1探针并标记生物素(Biotin ULS Labeling Kit,Fermentas Company);PCR扩增CEP17探针并标记CyTM3(Label IT Cy3TMLabelingKit,Mirus Bio Corporation)。探针的杂交效率通过对正常白细胞进行BRCA1/CEP17FISH来检测。结果在BRCA1启动子甲基化的乳腺癌组织中BRCA1和CEP17的平均基因拷贝数分别为1.70和1.77,而在非甲基化的组织中分别为2.25和2.33。两组间的BRCA1(P<0.001)和CEP17(P<0.005)基因平均拷贝数存在明显差异。但总体的BRCA1/CEP17比率没有显著不同(甲基化组平均为0.96,非甲基化组为0.97,P=0.32)。结论我们在中国乳腺癌群体中建立了FISH检测方法,并发现BRCA1基因拷贝数与启动子甲基化相关。     

糖尿病大鼠心肌钠钙交换蛋白与肌浆网钙泵mRNA表达水平的研究

目的探讨糖尿病大鼠心肌病变是否与钠钙交换蛋白Ⅰ亚型(NCX1)及肌浆网钙泵2a亚型(SERCA2a)表达水平变化有关。方法大鼠腹腔注射链佐霉素制备实验性糖尿病大鼠模型。将大鼠成模后分别于4w、6w和8w时取心肌组织,进行病理学检查及计算心脏相对重量观察心肌病变程度;应用RT-PCR方法扩增NCX1和SERCA2a两种产物,计算NCX1与SERCA2amRNA相对数量的变化,并与相应周数的正常对照组进行比较。结果糖尿病各组心脏湿重与体重的比值均明显高于对照组,病理检查显示心肌细胞呈不同程度变性坏死;4w,6w糖尿病组NCX1和SERCA2amRNA的量有所降低,但无统计学差别,而8w时,糖尿病组NCX1和SERCA2amRNA相对含量比对照组明显减少(P<0.05)。结论在糖尿病合并心肌病变时,大鼠心肌的NCX1与SERCA2a的mRNA水平降低,提示其心脏功能的减退与NCX1和SER-CA2a的mRNA水平降低有一定关系。