聚合酶链式反应实验教学的组织与效果分析

聚合酶链式反应是常规分子生物学实验的重要内容之一。作者在多年从事分子生物学实验教学的基础上,根据聚合酶链式反应实验特点,在实验操作的间隔时段引入相关问题的探讨。整个教学过程由学生查阅资料进行问题和实验准备、教师对实验原理与操作注意事项的简单介绍、实验操作、问题讨论、实验结果观察与分析等组成。实施效果表明,作者采用的教学组织方案能够更加有效地利用实验过程中的间歇时间,通过对预先设定的问题和学生自主提问进行探讨,实现良好的师生互动,加深了学生对聚合酶链式反应实验原理及相关理论的理解与掌握,增强学生利用所学理论知识分析实际问题的能力。对于激发学生的学习积极性具有较好的促进作用。     

人乳头瘤病毒基因分型液态芯片的构建

目的:通过构建人乳头瘤病毒基因分型的液态芯片,建立高通量、灵敏和特异的HPV型别检测系统.方法:在LuminexTM平台上,采用国际公认的标准HPV质粒建立13种基因分型HPV芯片,选择引物及探针,将探针有效的偶联到微球上.结果:用LuminexTM平台建立了13型HPV芯片,对单一或两种标准质粒混合的样品均可准确分型.对分型检测的阳性标本进行基因测序,经美国NCBI数据库BLAST比对符合其检测型别.结论:利用LuminexTM平台构建了13种HPV 型别液相芯片的诊断体系,具有高通量、快速准确等特点,适用于大规模临床样本的HPV基因分型的诊断.     

基于网络药理学技术探究冠心七味片治疗冠心病的作用机制

目的 阐明冠心七味片的药效物质,探索其药效成分的潜在靶点.方法 采用融合了口服可利用度预测、类药性评估、主成分分析、分子对接模拟,以及药效分子-靶点-疾病网络分析等方法为一体的网络药理学模型,研究冠心七味片所含中药组分和靶点间的相互作用.结果 冠心七味片的18个主要药效分子与治疗冠心病的41个靶点其有高网络度,且与分子对接计算得出的18个潜在靶点具有较强的结合能.筛选出的7个冠心七味片关键靶点与冠心病的治疗密切相关.结论 筛选出冠心七味片中18个可能的药效分子和7个关键作用靶点,初步阐明了冠心七味片多成分、多靶点、协同作用的分子机制.     

基于药物靶点从传统中药库中高通量虚拟筛选HIV-1整合酶抑制剂

目的:运用虚拟筛选技术从传统中药数据库(traditional Chinese medicine database platform,TCMSP)中寻找HIV-1整合酶的中药小分子抑制剂。方法:以整合酶与细胞因子LEDGF/P75相互作用位点为靶点,运用分子对接技术进行首轮筛选,然后运用ADME/T预测进行第二轮筛选,最后基于靶点与药物相互作用位点进行第三轮筛选。结果:以原配体(4-[(5-bromo-4-{[2,4-dioxo-3-(2-oxo-2-phenylethyl)-1,3-thiazolidin-5-ylidene]methyl}-2-ethoxyphenoxy)-methyl]-benzoic acid,D77)为阳性对照,筛选出2个类药性良好的天然小分子化合物,二者与HIV-1整合酶亲和力及相互作用基团均优于D77(新型的HIV-1整合酶抑制剂),并且确定了它们的中草药来源。结论:成功建立一整套高通量虚拟筛选HIV-1整合酶抑制剂的策略,该研究结果可促进从传统中药库中提取、设计以及实验合成新的抗艾滋病药物。     

中药单体川芎嗪在疾病治疗中的应用与机制研究进展

川芎嗪又称四甲基吡嗪,是提取自伞形科藁本属植物川芎根茎的一种中药单体成分,属于酰胺类生物碱.川芎嗪除了具有传统的活血祛瘀、抑制血小板聚集、扩张血管、改善血液循环、缓解疼痛等作用外,随着研究的不断深入,发现川芎嗪还具有心脑血管疾病预防与治疗、多器官如心脏、脑组织和肾脏等的缺血再灌注损伤修复、血管内皮保护、肿瘤抑制、哮喘病...     

墨旱莲的生物学和化学成分研究进展

墨旱莲是我国传统的常用药材之一,近年来国内外针对墨旱莲开展了多方面的研究.现就其资源分布、营养器官和生殖器官的形态解剖、组织培养等生物学特性及其主要药用成分黄酮类、三萜皂苷、挥发油、香豆草醚类、噻吩类的研究进展进行综述,以期为墨旱莲今后的研究及应用提供参考.     

HPLC分析桃儿七中鬼臼毒素的含量

目的:建立桃儿七鬼臼毒素含量的HPLC测定方法,并比较研究桃儿七不同生长地、不同营养器官中鬼臼毒素的含量。方法:筛选适当提取方法,采用DiamonsilC18色谱柱,0.04%甲酸水-乙腈梯度洗脱,流速0.5mL/min,检测波长290nm,柱温30℃条件下,记录液相色图谱。结果:鬼臼毒素的线性范围在0.2～1.4μg,r2=0.9994,平均回收率为99.32%,RSD小于1.97%,表明该法适用于不同生长地桃儿七中鬼臼毒素含量测定。结果显示宁夏六盘山的桃儿七样品根中鬼臼毒素含量最高,云南纳帕海的含量最低;而茎中的含量以云南纳帕海的样品为最高。结论:该方法准确、快速、简便。     

石蒜中加兰他敏的提取工艺研究

目的:筛选石蒜中加兰他敏的最佳提取工艺条件。方法:采用正交实验设计,考察热回流提取法中的提取温度、溶剂浓度、提取时间和料液比对加兰他敏含量的影响。结果:加兰他敏的最佳工艺条件为用5倍量95%乙醇,85℃热回流提取3次,每次2h。结论:正交试验确定的加兰他敏提取工艺条件合理可靠,重现性良好。     

款冬花总黄酮提取工艺及数学模拟研究

目的:研究以款冬花为原料、乙醇为溶剂,超声提取黄酮类化合物工艺过程的最优条件.方法:以总黄酮得率为评价指标,在单因素试验基础上通过响应面试验优化乙醇体积分数、超声时间和温度等为考察因素.结果:款冬花总黄酮的最佳超声提取工艺:乙醇体积分数为65%,提取温度为73 ℃,液料比为10 mL/g,提取时间为47 min,提取率...