HPLC法测定人红细胞中的S-腺苷同型半胱氨酸和S-腺苷甲硫氨酸

目的建立HPLC法测定人红细胞中S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)和S-腺苷甲硫氨酸(SAM)浓度的方法。方法人红细胞经同体积醋酸盐缓冲液稀释后,经10%高氯酸蛋白沉淀后直接进样。采用Athena C18 WP柱(150 mm×4.6 mm,3μm),柱温35℃,流动相为含5 mmol·L-1庚烷磺酸钠的50 mmol·L-1 Na H2PO4缓冲液(pH 4.0)-甲醇(80:20,v/v),流速:1.0 m L·min-1,检测波长254 nm。采用外标法定量。结果SAH和SAM分别在0.025~10 mg·L-1和0.05~20 mg·L-1内线性关系良好,SAH和SAM的日内、日间RSD均<12%,加样回收率在95.5%~106.3%,样品提取后在24 h内稳定性良好。结论该法快速、简便、准确,适用于SAH和SAM的体内分析检测。     

腹腔灌注化疗药物和载体制剂的研究进展

腹腔灌注化疗(IPC)是一种用于治疗原发性或转移性腹腔肿瘤的有效治疗方式。尽管IPC方式在临床使用多年,但在方案设计、滞留时间、药物和灌注液等选择方面缺乏标准流程。目前有多种研究在探讨优化IPC的药物载体,以期达到滞留时间长、不良反应少的治疗方式。本文将主要阐述IPC中化疗药物的选择以及药物新载体在IPC中的应用。     

认识失眠，选对药

失眠,几乎所有人都遇到过。有的人因为工作压力,生活烦心而一时睡不着觉。有的人长期处于失眠状态,夜不能寐。苦不堪言当我们遇到失眠时该如何应对呢？FM899《名医坐堂》节目请到华东医院药剂科宋钟娟主任药师与您畅聊失眠那些事儿。     

119例口服卡培他滨片不良反应分析

目的：进一步研究卡培他滨片的腹泻、手足综合征（Hand-foot syndrome，HFS）、恶心、呕吐、口腔炎等不良反应的发生率和严重程度，同时探寻卡培他滨片致不同程度不良反应的影响因素，以期全面评估卡培他滨片的安全性．方法：通过问卷调查形式收集10家医院共119例患者口服卡培他滨片出现的不良反应情况，按治疗方案归为化疗组（85例）和放化疗组（34倒，并口服VitB6片，60mg，tid）．采用X^2检验分析不同治疗方案对患者产生不良反应程度的影响．结果：卡培他滨的主要不良反应有手足综合征、恶心、呕吐、腹泻、口腔炎，程度主要为l级；手足综合征的发生率化疗组为18．82％，放化疗组为0，2组差异有统计学意义（P=0．0154）；恶心的发生率化疗组为31．76％，放化疗组为61．76％，2组差异有统计学意义（P=0．005）；呕吐的发生率化疗组为0．放化疗组为14.71％，2组差异有统计学意义（P=0.0019）；腹泻的发生率化疗组为9.41％，放化疗组为20．59％，2组差异无统计学意义（P〉0.05）；口腔炎的发生率化疗组为5．88ck，放化疗组为2．94％，2组差异无统计学意义（P〉0．05）．结论：患者口服卡培他滨片发生不良反应的程度总体较轻；联合应用大剂量维生素眈片能够预防口服卡培他滨片导致的手足综合征；口服卡培他滨片联合放疗的患者更需要考虑预防恶心与呕吐反应．     

Toonaciliatin A在体内外抑制胃癌MKN45细胞增殖并诱导细胞凋亡

目的:探讨中药单体Toonaciliatin A体内外对人胃癌MKN45细胞增殖和凋亡的影响。方法:体外培养MKN45细胞,采用不同质量浓度的Toonaciliatin A(15、30、60μg/mL)分别处理48h,MTT法检测细胞增殖活性;Annexin V-FITC/PI法染色后流式细胞仪检测细胞凋亡率。建立人胃癌MKN45细胞的BALB/c裸鼠移植瘤模型,采用不同剂量的Toonaciliatin A(10、20、40mg/kg)给药21d,检测移植瘤质量及裸鼠体质量;免疫组织化学法检测各组移植瘤组织中caspase-3蛋白的表达水平。结果:Toonaciliatin A体外可有效抑制MKN45细胞增殖,并诱导MKN45细胞凋亡,药物处理组与对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,Toonaciliatin A给药组移植瘤质量明显降低(P0.05)。Toonaciliatin A体内可诱导移植瘤组织中caspase-3蛋白表达增加(P0.05)。结论:Toonaciliatin A体内外能有效抑制胃癌MKN45细胞增殖并诱导细胞凋亡。     

复方地塞米松涂膜中醋酸地塞米松和盐酸达克罗宁的HPLC法测定

建立了高效液相色谱法测定复方地塞米松涂膜中的醋酸地塞米松和盐酸达克罗宁.以盐酸丁卡因为内标,采用Diamonsil C18ODS色谱柱,以甲醇-水-三乙胺(70∶30∶0.36,用冰乙酸调至pH 6.2)为流动相,检测波长为240 nm (醋酸地塞米松)和300 nm(盐酸达克罗宁、盐酸丁卡因).醋酸地塞米松和盐酸达克罗宁分别在7～13 μg/ml和280～520 μg/ml浓度范围内线性关系良好.平均回收率为98.6％和101.3％,RSD为0.90％和0.99％.     

高效液相 (HPLC) 荧光法同时测定人血浆中4种硫醇物的浓度

 目的  建立同时测定人血浆中半胱氨酸(cysteine,Cys)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、半胱氨酰甘氨酸(cysteinylglycine,CysGly)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)等4种硫醇物的高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)。方法  血浆经磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)稀释后,用三(2-羧乙基)膦盐酸盐［tris-(2-carboxyethyl)-phosphine hydrochloride,TCEP］还原,用三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)溶液进行蛋白沉淀,再用7-氟苯呋咱-4-硫酸铵盐(7-fluorobenzofurazan-4-sulfonic acid ammonium salt,SBD-F)进行衍生化反应,荧光检测器检测。色谱条件:色谱柱为Kromasil C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm),柱温29 ℃;流动相为甲醇:0.1 mol/L醋酸盐缓冲液(pH=4.5,3.5∶96.5,V/V),流速为0.8 mL/min,等度洗脱。激发波长385 nm,发射波长515 nm。采用外标法定量。结果  Cys、Hcy、CysGly和GSH的线性范围分别为50~800 μmol/L、4~64 μmol/L、10~160 μmol/L和2.5~40 μmol/L。Cys、Hcy、CysGly和GSH的最低检测浓度分别为2.5 μmol/L、1.0 μmol/L、1.0 μmol/L和1.0 μmol/L。各组分日内、日间精密度RSD均<12 %。平均回收率为95.01 %~116.17 %。结论  该方法具有检测时间短、灵敏性高、精密度和准确度好的特点,适用于临床人血浆中硫醇物浓度的常规检测。     

骨化三醇对MPTP诱导慢性帕金森病小鼠模型脑内神经递质的影响

目的探讨骨化三醇对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）诱导慢性帕金森病小鼠模型脑内氨基酸类和单胺类神经递质的影响。方法C57BL／6小鼠随机分为对照组、模型组、骨化三醇高剂量给药组和低剂量给药组,构建MPTP慢性模型,应用高效液相色谱法测定中脑及纹状体内氨基酸类神经递质,包括天冬氨酸（Asp）、谷氨酸（Glu）、甘氨酸（Gly）、牛磺酸（Tau）、1,-氨基丁酸（GABA）和单胺类神经递质,包括多巴胺（DA）及其代谢产物3,4-双羟苯乙酸（DOPAC）的含量。结果与对照组相比,模型组小鼠氨基酸类神经递质除中脑内GABA外含量增加,纹状体内DA和DOPAC含量降低,代谢率增加俨〈O．01或P〈0．05）。骨化三醇给药组与模型组相比,高剂量可使中脑GIu,Gly,Tau及纹状体内五种氨基酸含量降低,DA和DOPAC含量增加,代谢率降低俨〈O．01或P〈0．05）;低剂量则仅可减缓中脑Tau和纹状体除Tau以外其他4种氨基酸含量增长状况。结论骨化三醇能改善MPTP所致慢性PD小鼠模型脑内神经递质含量异常,直接或间接保护DA能神经元,对其机制的深入研究有助于新型神经保护药物的开发。     

人血浆中茶碱和多索茶碱的HPLC法测定

建立了HPLC法测定人血浆中的茶碱和多索茶碱.采用C_(18)色谱柱,以咖啡因为内标,甲醇-水(23:77)为流动相,检测波长273 nm.血浆经甲醇沉淀蛋白后直接进样.茶碱和多索茶碱在2.5～40μg/ml浓度范围内线性关系良好,日内、日间RSD均小于5.2%.