人类巨细胞病毒感染对人胚肺细胞HOXB1,HOXB5,HOXB6及HOXB9基因表达的影响

目的 :研究人胚肺 (HEL)细胞HOXB1,HOXB5 ,HOXB6及HOXB9基因的表达状态及人类巨细胞病毒(HCMV)感染对上述基因表达的影响。方法 :采用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)技术。结果 :①HEL细胞表达HOXB5和HOXB6 ,但不表达HOXB1和HOXB9;②HCMV感染后 ,HEL细胞HOXB6基因的表达上调 ,且被HCMV诱导表达HOXB9T ,而HOXB5基因的表达无明显改变 ,HOXB1基因仍旧不表达 ;③全反式维甲酸 (ATRA)能上调HCMV感染后HOXB9基因的表达 ,但对HCMV感染晚期HOXB6基因的表达有抑制作用。结论 :HCMV能诱导HOXB6和HOXB9基因表达异常 ,这可能在先天性HCMV感染导致胚胎发育畸形中起重要作用     

脑溢安对血红蛋白损伤神经元神经生长因子和白细胞介素1β表达的影响

目的：观察脑溢安对体外培养神经元血红蛋白损伤后的保护作用及神经生长因子与白细胞介素-1表达的影响。方法：以50umol/L^-1血红蛋白造成培养海马神经元损伤,运用活细胞计数、Northern杂交、酶联免疫检测神经元存活数量、神经生长因子与白细胞介素-1mRNA及其蛋白表达水平。结果：体外培养大鼠海马神经元在含2%牛血清的培养液中可存活5个月以上。加入50umol.L^-1血红蛋白培养24h神经元死亡率为38.5%。同时加入脑溢安药液能显著降低神经元死亡率。血红蛋白可引起培养神经元白细胞介素-1mRNA与蛋白表达水平显著升高及神经生长因子的短暂升高,脑溢安能降低白细胞介素-1表达,维持神经生长因子持续表达。结论：脑溢安对血红蛋白损伤神经元具有保护作用,其机理与调节神经元白细胞素-1表达,维持神经生长因子持续表达。结论：脑溢安对血红蛋白损伤神经元具有保护作用。其机理与调节神经元白细胞素-1、神经生长因子表达有关。     

乳腺癌组织中—p—MAPK活化对c—fos和c—jun的激活作用

OBJECTIVE: This paper was to investigate the relationship between expression of p-MAPK and oncogenesis of breast cancer. METHODS: Immunohistochemical technique was used to detect the expression of p-MAPK and c-fos and c-jun proteins in 68 cases of breast cancers, 42 cases of pericarcinomatous tissues and 7 cases of normal breast tissues. RESULTS: Positive stainings of p-MAPK, c-fos, and c-jun were localized in cancer cell nuclei. The positive rates of p-MAPK, c-fos, and c-jun were 86.8% (59/68), 82.4% (56/68), and 77.9% (53/68), respectively, which were much higher than that in pericarcinomatous tissues (P < 0.01). Of some cases, p-MAPK positive staining was also found in the nuclei of the fibroblastic and angioendothelial cells of cancer stroma. CONCLUSION: Activated or overexpressive MAPK activates the immediately-early oncogenes(c-fos, c-jun), which might play an important role in carcinogenesis of breast cancer and be an early event of oncogenesis of breast cancer.     

小鼠补体受体Ⅱ型基因改造后感染EB病毒

通过对小鼠补体受体Ⅱ型基因（CR2）进行定点突变,然后将野生型和突变型小鼠CR2/1（MCR2/1）及人CR2（hCR2)用电穿孔方法导入小鼠SP2/0进行表达,采用免疫组织化学等方法鉴定阳性细胞系。用EB病毒对转染阳性细胞进行感染,EBER-1杂交结果显示,仅转染hCR2和突变型MCR2（mtMCR2)的SP2/0细胞感染了EB病毒,前者感染EB病毒的阳性率较后者高很多。这为进一步研究EB病毒进入细胞的机制及建立EB病毒相关的鼻咽癌动物模型奠定了良好的基础。     

小鼠Connexin 31基因组克隆的筛选及荧光原位杂交定位

Connexin 31(Cx31)是人类遗传性疾病基因,利用小鼠Cx31基因的cDNA序列探针从小鼠的基因组文库筛选出Cx31的gDNA克隆,并用荧光原位杂交技术将其定位于小鼠4号染色体扣部,为小鼠Cx31的基因结构和功能的研究以及转基因小鼠和基因剔除小鼠的研究打下了良好的基础。     

肝细胞癌发生中丙型肝炎病毒NS3蛋白对诱导型一氧化氮合酶表达的影响

OBJECTIVE: To investigate hepatocarcinogenesis by detecting the effect of HCV NS3 protein on expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) mRNA in hepatocellular carcinoma (HCC) and pericarcinomatous liver tissues(PCLT). METHODS: The expression of HCV NS3 protein and iNOSmRNA was detected by immunohistochemical technique (SP method) and in situ hybridization in specimens of HCC and PCLT from 52 patients with HBV(-). The relationship between the positive rate and the signal strength was tested statistically. RESULTS: The positive rate of HCV NS3 protein in HCC was lower (46.2% vs. 67.3%), and signal strength was weaker than those in PCLT. The signal strength of HCV NS3 protein was correlated with the degree of carcinomatous cells differentiation in HCC (P < 0.01). The positive rates (80.8% and 90.4%) of iNOSmRNA in HCC and PCLT had no statistical difference. Signal intensity of iNOSmRNA in HCC was weaker than that in PCLT. The higher HCVNS3 protein expression level was, the stronger iNOSmRNA signals in PCLT (P < 0.01). In particular, the localization and patterns of HCV NS3 protein were much similar to those of iNOSmRNA in the PCLT of some patients. CONCLUSIONS: HCV NS3 protein may exert its hepatocarcinogenic effect in the early stage on host cells by increasing product of nitric oxide, which may bring about transformation of hepatocytes.     

子宫内膜癌PCNA表达和雌孕激素受体的研究

目的：探讨子宫内膜癌（endometrial carcinoma,EMC)增殖活性以及雌、孕激素受体的表达与临床病理特性、预后的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测74例子宫内膜癌增殖细胞核抗原（proliferating cell nucleus antigen,PCNA)、雌激素受体（estrogen receptor ,ER)、孕激素受体（progesterone receptor,PR)含量。结果：PCNA在对照组和EMC中的阳性率分别为30.0%和82.4%,差异有显著性（P＜0.01);在不同分化程度的EMC中PCNA阳性表达率差异无显著性,但PCNA阳性指数（PI）评分,WD明显低于MD,LD,差异有显著性（P＜0.001),且与EMC分化程度呈负相关（r=-0.52,P＜0.01);PCNA PI评分与EMC临床期别之间呈正相关（r=0.55,P＜0.01)。EMC中ER,PR阳性例数分别为49例（66.2%)和56例（75.7%),PCNA表达与ER,PR受体之间呈负相关,r值分别为-0.42(P＜0.05)和-0.51(P＜0.05)。结论：ER和PR阳性、PCNA PI评分较低的子宫内膜癌,肿瘤细胞异型性小;反之,表现为侵犯邻近组织、扩散、转移等恶性生物学行为。ER,PR和PCNA表达之间有明显互补性。PCNA表达结合ER,PR检测具有方法简单、组织无需特殊处理等特点,适于对常规病理切片作回顾性研究,对鉴别肿瘤性质、预测预后均一定实用价值。     

结核分枝杆菌异烟肝耐药基因突变的研究

目的：了解我国结核分枝杆菌耐异烟肼（INH）分离株katG基因突变情况,探讨快速检测结核分枝杆菌耐药基因型的分子药敏检测方法。方法：用PCR单链构象多态性（PCR－SSCP）和PCR直接测序法（PCR－DS）检测30株结核分枝杆菌临床分离株的katG基因。结果：以结核分枝杆菌H37Rv标准株对照观察所有INH敏感株的PCR－SSCP和PCR－DS图谱,均未发现异常;而在12株INH耐药株中,有4株无PCR－SSCP和PCR－DS图谱异常,占INH耐药株的33．4％;有5株在94位发生核苷酸错义突变,占INH耐药株41．7％,有3株在96位发生核苷酸同义突变,占INH耐药株的25％。结论：多数结核分枝杆菌对INH是由于其katC基因突变所致,可先用PCR－SSCP筛选突变株,再用PCR－DS方法测定其突变位点,达到快速检测结核分枝杆菌INH耐药基因型的目的。     

骨髓内皮细胞无血清条件培养液对CFU-E和BFU-E生成的影响

利用本室建立的小鼠骨髓内皮细胞株作传代培养 ,收集其无血清条件培养液 ,离心超滤 ,观察分子量(MW) >1 0 0 0 0组分及分子量 <1 0 0 0 0组分对红系生成的影响。结果表明 :分子量 >1 0 0 0 0组分对CFU E和BFU E有明显刺激作用 ,且在 2 %～ 6% (V/V ,下同 )范围内集落产率随浓度增加而增加 ;而分子量 <1 0 0 0 0组分对CFU E ,BFU E有明显抑制作用 ,且在 1 0 %～ 40 %范围内集落产率随浓度增加而降低     

长沙地区疱疹病毒性脑炎的病原研究

目的 :探讨长沙地区病毒性脑炎与疱疹病毒感染的关系。方法 :应用间接免疫荧光技术 (IFA)检测病毒性脑炎患者脑脊液或血清中疱疹病毒特异性IgG ,IgM。结果 :92 1例病毒性脑炎患者中有 1 33例 (1 4 4% )诊断为单纯疱疹病毒性脑炎 ,1 0岁以下年龄为发病高峰 ,9例 (0 98% )诊断为巨细胞病毒性脑炎 ,1 2例 (1 3 % )为水痘 带状疱疹病毒性脑炎。结论 :长沙地区疱疹病毒性脑炎病原以单纯疱疹病毒最常见 ;IFA法对疱疹病毒性脑炎具有诊断价值