灯盏花新品系选育及农艺与品质性状比较

目的:探索灯盏花育种方法,选育灯盏花新品种。方法:从驯化栽培的灯盏花天然异交群体中选择单株,建立株系,进行株系筛选和连续的品系比较。结果:通过系统选育的方法,选育的2003-6和2003-15 2个灯盏花新品系灯盏乙素分别达到3.21%,3.01%,较对照(QS-1)提高15.77%,23.46%,单产较对照提高20.37%,17.59%,每公顷含灯盏乙素量提高39.31%,44.82%,为优质高产新品系。结论:灯盏花可以通过系统育种的方法进行品种选育。     

Toll样受体5对间充质干细胞生物学特性的影响

目的 探讨Toll样受体5(TLR5)对间充质干细胞(MSC)生物学特性的影响,以期探究TLR5在MSC与肿瘤关系中的作用.方法 构建过表达TLR5的慢病毒载体并用相关病毒感染MSC,通过荧光表达量、RT-qPCR和Western印迹验证TLR5在MSC中的过表达情况,通过MSC-TLR5增殖、表面抗原和细胞分化来验证TLR5过表达对MSC生物学性状影响,通过检测CBLB502激活TLR5后白细胞介素6(IL-6)和IL-8的表达水平验证TLR5生物学功能.结果 TLR5慢病毒感染MSC后,mRNA水平和蛋白水平检测TLR5表达量均显著升高,MSC-TLR5增殖、免疫表型和分化能力未发生改变,同时,CBLB502激活TLR5后,IL-6和IL-8表达量显著升高(P<0.001).结论 携带TLR5的慢病毒感染MSC后不影响MSC生物学功能,TLR5具有功能活性且可激活下游信号通路发挥免疫调节作用.     

铁皮石斛人工繁殖和栽培研究进展

石斛是兰科石斛属药用植物的总称,为我国名贵的传统中药材[1].石斛最早收载在<神农本草经>,有"石斛,一名林兰.味甘,平,无毒.主伤中,除痹,下气,补五藏虚劳赢瘦,强阴.久服厚肠胃,轻身延年."[2].     

实时荧光定量RT-PCR法建立版纳微型猪近交系中厚皮创面转化生长因子表达体系*◆

背景：版纳微型猪近交系能较好的模拟人取皮区创面,构建动物模型,检测与创面愈合及瘢痕形成密切相关的转化生长因子的表达。 目的：观察创面愈合过程中转化生长因子β1基因的表达情况。 方法：利用版纳微型猪近交系4~6月龄猪构建了皮肤创面愈合动物模型,通过提取皮肤创面总RNA,设计特异引物,对与创面愈合相关密切的转化生长因子β1基因进行了RT-PCR扩增。纯化目的片段并与pMD18-T载体连接,转化宿主菌DH5α,提取重组质粒DNA,并经酶切、PCR和测序鉴定,计算重组质粒原液拷贝数浓度并制备梯度浓度标准品,进行实时荧光定量PCR。 结果与结论：建立的转化生长因子β1基因mRNA表达实时荧光定量PCR检测方法特异性较好,检测灵敏度可达103 拷贝/µL,线性范围达103~109拷贝/µL,阈值循环数与PCR体系中起始模板量的对数值之间存在良好的线性关系(R2=0.988),扩增效率高(E=107.433%)。利用该检测体系检测了45份样品,效果良好,该方法可为研究TGF-β1基因在创面愈合过程中的作用机理奠定分子生物学基础。     

尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列抗原位点分析及免疫保护效果观察

目的采用生物信息学方法分析尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列的关键抗原位点,并观察根据这些位点设计合成的新型免疫原的免疫保护效果。方法扩增尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列,采用Jameson-Wolf方法和ClustalX软件结合的生物信息学方法分析其抗原位点,人工合成筛选的抗原位点序列,并连接到pIRESneo表达载体,3次(0、2、4周)对BALB/c小鼠进行核酸免疫,ELISA法测定免疫后机体抗体水平,出血中和实验和攻毒实验初步观察其免疫保护效果。结果生物信息学方法分析得到6个关键抗原位点(MPA-1～MPA-6);ELISA法检测抗血清结果表明,抗原位点序列诱导小鼠产生的抗血清相对未免疫的小鼠血清稀释100倍后仍能表现出阳性结果;出血中和实验和攻毒实验表明,将抗原位点序列免疫小鼠可以诱导机体产生免疫反应,使体内产生抗体,能有效中和蛇毒,从而对尖吻蝮蛇蛇毒引起的出血有防护作用。结论用生物信息学方法成功获得尖吻蝮蛇蛇毒金属蛋白酶cDNA序列的6个关键抗原位点,针对这些位点设计合成的新型免疫原展示出初步免疫保护效果。     

云南境外禽流感H5N1亚型病毒神经氨酸酶基因进化及分子结构特征分析

目的:禽流感病毒神经氨酸酶(NA)是病毒粒子重要表面抗原之一,其抗原性差异决定病毒神经氨酸酶亚型(N1-N9)的划分。NA介导病毒对敏感细胞的侵染及协助子代病毒粒子的成熟和释放,与病毒的宿主嗜性及毒力有关。方法:对2003~2009年期间采集自云南境外家禽的H5N1亚型阳性样品中病毒NA基因进行测序,并与国内外已知代表毒株进行序列比对及系统发育分析。认识云南境外禽流感H5N1亚型病毒神经氨酸酶(NA)基因分子结构特征。结果:21份代表性病毒样品NA基因核苷酸和氨基酸序列同源性介于94.3%~99.3%、93.1%~99.3%。系统发育分析表明可划分为6个不同进化(亚)分支(1、7、9、2.4、2.3.2、2.3.4),其中进化亚分支2.3.4毒株已成为当前云南境外流行的优势毒株;所有云南境外毒株NA蛋白的49-68位氨基酸均存在缺失。结论:糖基化位点存在特有变异;云南境外毒株对Oseltam ivir(达菲)类抗病毒药物可能无耐药性。     

胞内感染菌抗性侯选基因SLC11A1研究进展

20世纪初,研究者发现近交系小鼠中,一种遗传因素可以影响宿主对包括鼠伤寒沙门菌（Salmonella typhimurium）,杜氏利什曼原虫（Leishmania donovani）,卡介苗分支杆菌（BCG）等胞内病原体的早期反应。抵抗这些病原体相关的基因分别称为Ity、Lsh、Bcg基因。此后人们发现不同鼠系对结核分支杆菌感染耐受性不同。     

军犬侵袭性大肠埃希菌分离鉴定及药敏试验

目的 探讨引起某军犬死亡的病因及合理的治疗药物.方法 采集死亡犬肠内容物划线培养,对分离的病原菌进行纯化、革兰染色、镜检、生化试验、血清学试验、药敏试验.结果 犬肠内容物分离的单菌落用革兰染色法染色为阴性,生化试验鉴定为大肠埃希菌,血清凝集试验侵袭性大肠杆菌(EIEC)诊断为阳性;药敏试验结果表明头孢唑啉、头孢曲松、头孢他啶、头孢西丁、头孢噻肟、头孢哌酮、诺氟沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、环丙沙星对该株侵袭性大肠埃希菌高敏.结论 死亡军犬感染了侵袭性大肠埃希菌,此侵袭性大肠埃希菌株有部分耐药性.