ATP结合盒A1在胆固醇流出和动脉粥样硬化中的作用

ABCA 1是ATP结合盒 (ABC)转运子超家族成员。ABCA 1基因的表达受到多种代谢物的严格调控。ABCA 1基因的突变引起Tangier病 (TD)。胆固醇逆向转运清除组织过量的胆固醇 ,防止动脉粥样硬化(AS)的产生。而细胞内胆固醇的流出是胆固醇逆向转运的限速步骤 ,ABCA 1促进胆固醇的流出而参与胆固醇的逆向转运过程。TD杂合子和转ABCA 1基因的研究证实 ,ABCA 1具有防止早期AS的作用。ABCA 1激活剂已成为临床上预防和治疗AS的新靶点。     

异鼠李素对HeLa细胞端粒酶活性的抑制作用

目的　观察异鼠李素对 He L a细胞生长的抑制和诱导凋亡的作用 ,并探讨端粒酶在此过程中的作用。方法　培养细胞加入异鼠李素 ,通过细胞增殖动力学、流式细胞术及 TRAP- EL IAS法检测异鼠李素对 He L a细胞凋亡及端粒酶活性的影响。结果　异鼠李素处理组细胞生长受到抑制 ,抑制作用均与浓度呈梯度关系 ,其 IC50 为(4 0± 0 .0 8) μg/ m l,端粒酶活性较对照组细胞降低 (P<0 .0 5 )。结论　异鼠李素可通过抑制 He L a细胞端粒酶活性而抑制肿瘤细胞的生长     

人原发性肝癌胰岛素样生长因子2基因的印迹状态

目的研究人原发性肝癌中胰岛素样生长因子2(insulin like growth factor Ⅱ,IGF2)基因印迹状态,为进一步研究肝癌发生机理提供线索。方法用限制性片段长度多态性检测IGF2基因杂合状态,用逆转录-酶联聚合反应半定量检测IGF2基因在肝癌及癌旁组织中的表达,分析IGF2印迹状态、表达量与人原发性肝癌的关系。结果55．6％(10／18)的肝癌组织存在IGF2基因印迹的重新获得,与之相对的远癌组织有60％(6／10)也发生了IGF2基因印迹的重新获得。50％(9／18)的癌组织IGF2基因过度表达,但表达量与基因印迹的改变没有显著相关性。结论IGF2基因印迹的重新获得可能参与了肝癌的发生。     

绒毛膜促性腺激素对人胃腺癌细胞增殖的影响

目的 探讨人绒毛膜促性腺激素(hCG)对人胃腺癌SGC-7901细胞增殖生长的影响。方法用MTT法检测细胞生长率及存活率。结果 hCG在10^11～10^-8mol／L范围内，对胃腺癌细胞的生长具有促进作用，但无明显的时间依较关系。结论 hCG对胃腺癌细胞的生长具有一定的促进作用，提示hCG在胃腺癌的发生与发展中起了一定的作用。     

Vigilin在多种细胞系以及人原发性肝细胞肝癌中的表达研究

目的 探讨Vigilin基因在肿瘤细胞系、正常细胞系以及人原发性肝细胞肝癌组织中的表达及其与肝癌发生的关系.方法 提取肝癌细胞系、宫颈癌细胞系和正常细胞系总蛋白,采用免疫印迹方法 对Vigilin的表达进行半定量检测.收集59例人原发性肝细胞肝癌标本,进行Vigilin的免疫组织化学染色.结果 Vigilin在所检测的...     

RNA干扰A549细胞核干细胞因子基因表达

目的探讨A549细胞株NS基因的表达干扰后,A549细胞株的mRNA表达水平及细胞增殖变化。方法构建NSshRNA真核表达载体,转染A549细胞,G418筛选稳定表达细胞克隆,RT-PCR检测NS基因沉默,MTT检测细胞增殖情况。结果构建的NSshRNA真核表达载体经菌落PCR和测序证实重组表达载体中插入序列与设计一致。RT-PCR检测显示构建的shRNA表达载体转染A549细胞后可显著降低NSmRNA的表达;M1vr结果显示干扰后细胞增殖速率明显减低。结论成功构建了一组针对NS基因的shRNA真核表达载体,转染A549细胞后NS基因表达被特异性沉默,且细胞增殖受到明显抑制,通过RNAi技术实现NS基因沉默可能是一种较有前景的肿瘤治疗方法。     

脂多糖受体CD14基因启动子-159位点C/T基因多态性对高糖低脂膳食诱导的健康青年血脂比值变化的影响

目的探讨CD14启动子-159位点C/T多态性对健康青年血脂比值的影响及在高糖低脂(highcarbohydrate/low fat,HC/LF)膳食诱导的血脂比值变化中的作用。方法纳入56名(22.89±1.80岁)健康青年志愿者,先后给予7d平衡膳食和6dHC/LF膳食,于第1d、第8d及第14d清晨抽取12h空腹静脉血,测定血脂水平,计算甘油三酯/高密度脂蛋白胆固醇(triglyceride/high density lipoprotein-cholesterol,TG/HDL-c)、log(TG/HDL-c)、总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇(total cholesterol/high density lipoprotein-cholesterol,TC/HDL-c)和低密度脂蛋白胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol/high density lipoprotein-cholesterol,LDL-c/HDL-c)。提取基因组DNA,聚合酶链反应-限制性酶切法分析CD14启动子-159位点多态性。结果女性TT纯合子受试者TG/HDL-c(P<0.05),log(TG/HDL-c)(P<0.05)和LDL-c/HDL-c(P<0.05)基础值高于C等位基因携带者,男性C等位基因携带者TG/HDL-c(P<0.05)、log(TG/HDL-c)(P<0.001)和TC/HDL-c(P<0.01)高于女性。HC/LF膳食前,女性TT纯合子受试者TG/HDL-c(P<0.01)、log(TG/HDL-c)(P<0.001)和TC/HDL-c(P<0.05)均高于C等位基因携带者,男性C等位基因携带者4种血脂比值均高于女性(P<0.05)。HC/LF膳食后,女性TT纯合子受试者TG/HDL-c(P<0.05)、log(TG/HDL-c)(P<0.05)和LDL-c/HDL-c(P<0.05)均高于C等位基因携带者,男性C等位基因携带者TG/HDL-c(P<0.05)、log(TG/HDL-c)(P<0.01)高于女性。与HC/LF膳食前相比,HC/LF膳食后男性C等位基因携带者TC/HDL-c(P<0.001)、LDL-c/HDL-c(P<0.01)降低,TT纯合子受试者TC/HDL-c(P<0.001)降低。HC/LF膳食后女性C等位基因携带者TG/HDL-c(P<0.05)、log(TG/HDL-c)(P<0.05)升高,TC/HDL-c(P<0.001)、LDL-c/HDL-c(P<0.01)降低,TT纯合子受试者只有TC/HDL-c(P<0.01)降低。结论相较于T等位基因携带者,C等位基因携带者中,膳食改变对血脂表型的作用是微效,可能被CD14-159位点C等位基因掩盖。HC/LF膳食与CD14-159位点C等位基因的相互作用能够降低青年男女LDL-c/HDL-c,升高女性TG/HDL-c和log(TG/HDL-c)。     

基因重组免疫毒素白细胞介素18-PE38融合基因治疗类风湿性关节炎的初步研究

目的构建白细胞介素18(interleukin18,IL-18)-PE38融合基因的真核表达载体,并研究其在小鼠软骨细胞及3T3细胞中的表达,探讨类风湿性关节炎的基因治疗方法. 方法经限制性内切酶双酶切从质粒PRKL459K-IL18-PE38中获取IL-18-PE38融合基因, 将其与真核表达载体PsecTag2B连接,转化感受态菌,挑取单克隆培养并提取质粒,EcoRⅠ单酶切鉴定.脂质体转染法将构建的真核表达载体转染入3T3细胞及小鼠软骨细胞中,分别设置空载体对照,通过荧光免疫细胞化学法鉴定转染后瞬时表达情况. 结果 EcoRⅠ单酶切后电泳鉴定显示,所构建的真核表达载体PsecTag2B-IL-18-PE38片段长度约为6 000 bp.荧光免疫细胞化学法、荧光显微镜摄片均显示转染融合基因组荧光表达强,空载体对照组荧光表达微弱. 结论 IL-18-PE38融合基因真核表达载体构建成功,并在小鼠软骨细胞及3T3细胞中表达,为类风湿性关节炎的基因治疗研究奠定基础.     

异鼠李素对Eca-109细胞DNA的合成和c-myc基因表达近日节律的影响

为了探讨人食道癌E ca-109细胞DNA合成与c-m yc基因表达的近日节律以及异鼠李素对二者的影响作用,达到有效治疗肿瘤的目的。我们用3H-T dR掺入实验和流式细胞仪检测在24 h内不同时间点异鼠李素对E ca-109细胞DNA合成和c-m yc表达的近日节律的影响,其结果用方差分析和Cos inor法进行统计学分析。实验数据显示人食道癌E ca-109细胞株DNA合成和c-m yc基因的表达随近日节律变化,且异鼠李素对DNA合成和c-m yc基因的表达具有抑制作用,并影响其近日节律特征。人食道癌E ca-109细胞的生长与c-m yc基因表达在20:00至0:00达到高峰,且异鼠李素在此时间段作用较强,这为制定肿瘤时辰化疗方案提供了有价值的参考。     

酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶2基因734位点T等位基因与高糖低脂膳食诱导的健康青年女性TG/HDLC、log(TG/HDLC)及LDLC/HDLC改变相关联

目的探讨酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶2(ACAT-2)基因734位点C/T多态性对健康青年血脂比值的影响及在高糖低脂膳食诱导的血脂比值变化中的作用。方法给予56名健康青年志愿者7天平衡膳食和6天高糖低脂膳食,于第1天、第8天以及第14天清晨抽取12 h空腹静脉血,测定血脂,计算甘油三酯/高密度脂蛋白胆固醇(TG/HDLC)、log(TG/HDLC)、总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇(TC/HDLC)和低密度脂蛋白胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇(LDLC/HDLC)比值。提取基因组DNA,聚合酶链反应限制性酶切法分析ACAT-2基因734位点多态性。结果女性T等位基因携带者log(TG/HDLC)显著低于CC纯合子受试者,男性CC纯合子受试者TC/HDLC显著高于女性CC纯合子受试者,男性T等位基因携带者log(TG/HDLC)显著高于女性。高糖低脂膳食前,男性T等位基因携带者TG/HDLC、log(TG/HDLC)显著高于女性。与高糖低脂膳食前相比,高糖低脂膳食后男性TC/HDLC、LDLC/HDLC显著降低,不受基因型影响。女性CC纯合子受试者高糖低脂膳食后TG/HDLC、log(TG/HDLC)显著升高,TC/HDLC、LDLC/HDLC显著降低,女性T等位基因携带者TC/HDLC显著降低。结论 ACAT-2 734位点T等位基因与高糖低脂膳食诱导的健康青年女性TG/HDLC、log(TG/HDLC)及LDLC/HDLC改变相关联。