Omega-6型多不饱和脂肪酸增加急性心肌缺血损伤“易感性”的机制研究

脂质代谢紊乱是冠心病的常见病理特征。虽然增加不饱和脂肪酸(PUFA)的摄入一直以来被认为可以有效预防冠心病,但是越来越多的临床试验却否定了该观点。PUFA在冠心病中的具体作用机制尚不明确。本实验通过建立omega-6型PUFA负荷急性心肌缺血的动物模型,来探讨PUFA对心肌缺血损伤的影响及其潜在机制。实验方案及程序均符合动物使用和护理的伦理原则,并已获暨南大学动物实验伦理委员会批准。实验采用亚油酸(LA)连续灌胃14天后,大剂量腹腔注射异丙肾上腺素(ISO)诱导急性心肌缺血以建立动物模型。24 h后,采用小动物超声影像系统检测心脏功能。随后,采集血清及心肌组织样本进行心肌酶、磷脂组学分析、试剂盒含量测定和Western blot检测。心脏功能结果表明,与单纯LA组比较, LA负荷ISO小鼠的左心室射血分数(EF%)和左心室缩短分数(FS%)显著降低,天门冬氨酸转移酶(AST)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)显著增加。磷脂组学分析表明,与ISO组比较, LA负荷ISO小鼠心肌组织中的PUFA显著增加,且氧化型磷脂酰乙醇胺(ox-PE)的含量变化最为显著。还原型辅酶Ⅱ(...     

HPCE法测定蛹虫草及其培养物中核苷类化合物的含量

目的　建立蛹虫草中核苷类化合物的高效毛细管电泳测定法 ,比较天然蛹虫草及其培养物中核苷类化合物的含量。方法　在HV - 30 1高效毛细管电泳仪上进行定量分析 ,采用石英毛细管柱 ,以pH9.0的 4 0mmol·L-1 硼砂溶液作为电极缓冲液 ;分离电压为 1 6KV ;检测波长为 2 5 4nm。结果　天然蛹虫草中核苷类化合物主要集中在子座部分。人工培养蛹虫草子座和菌丝中虫草素的含量分别是天然蛹虫草子座中的 5 .0 4倍和 1 0 .85倍 ;液体培养蛹虫草菌丝中腺嘌呤、腺苷、尿苷、鸟苷含量均高于固体培养蛹虫草子座。结论　天然蛹虫草及其培养物中核苷类化合物的种类和含量具有较大的差异。高效毛细管电泳法可以用于蛹虫草的定量分析 ,具有分离度高、简便、准确 ,样品消耗少等特点     

黄花乌头体细胞胚胎发生及其植株再生

目的 对不同植物激素及其配比对黄花乌头体细胞胚胎诱导及植株再生进行研究，为药用植物黄花乌头的资源开发提供理论依据。方法 以黄花乌头的茎、叶、胚轴、胚根和子叶为外植体考察不同植物激素对黄花乌头愈伤组织诱导、体细胞胚胎发生及植株再生的影响。结果 外植体接种于MS 2，4-D 1mg／L 6-BA 0．5mg／L的培养基上愈伤组织诱导率最高，愈伤组织在MS 2，4-D 0．2rng／L 6-．BA 0．5mg／L的培养基上连续继代几次后，分化出淡绿色具有圆锥状或原球状突起的胚性愈伤组织。胚性愈伤组织能够在MS 6-BA2 mg／L的培养基上形成不定芽，该芽能够在MS＋IBA 0．5mg／L的培养基上生根．形成完整的再生植株。结论 利用体细胞胚胎发生技术可以成功地得到再生植株，从而为濒危植物黄花乌头的资源开发和保护提供新途径。     

心肌缺血大鼠血浆8-异前列腺素F2α水平及N-乙酰半胱氨酸干预作用

目的分析实验性心肌缺血大鼠血浆与心肌8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)水平相关性,以及抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)的治疗效果,探讨血浆8-iso-PGF2α反映心肌氧自由基损伤程度和干预效果的可能性。方法45只Wistar大鼠分为三组:缺血组、缺血 NAC组和对照组。使用垂体后叶素建立大鼠急性心肌缺血模型,以心电图上ST段的抬高作为心肌缺血指标。在缺血 NAC组,预先用NAC 0.1 g/kg·d灌胃3周。应用ELISA方法测定心肌缺血及正常大鼠血浆及心肌组织8-iso-PGF2α含量。结果(1)急性心肌缺血组大鼠的血浆和心肌组织8-iso-PGF2α含量分别为(187.1±45.8)pg/ml和(259.3±47.5)pg/g,明显高于正常对照组的(60.4±13.7)pg/ml和(88.6±16.9)pg/g(P<0.01);(2)急性心肌缺血前应用NAC组的血浆和心肌组织8-iso-PGF2α含量分别为(88.2±16.4)pg/ml和(109.4±24.7)pg/g,明显低于缺血组(P<0.01);(3)血浆与心肌8-iso-PGF2α水平间存在正相关(r=0.856,P<0.01);(4)与正常组比较,缺血组的心电图ST段明显抬高[心肌缺血45 min时抬高最为明显,达(0.34±0.05)mV](P<0.05),心肌缺血前使用NAC,可使心肌缺血得以改善[心肌缺血45 min时心电图ST段仅达(0.18±0.05)mV]。结论急性心肌缺血时8-iso-PGF2α含量产生增加;血浆8-iso-PGF2α可反映心     

芪丹煎剂有效成分提取方法优选研究

目的:研究芪丹煎剂有效成分超声法提取的最适条件.方法:利用正交试验设计,对水量、提取时间和提取次数进行分析,找出最适条件.按最适条件重复3次,考察重复性.结果:水量为14倍、提取时间为30min,提取次数为3次时有效成分的总含量最大,3次平行试验有效成分总含量RSD为0.86%.结论:超声法提取的最佳条件为:水量14倍、提取时间30min,提取次数3次.本方法重复性较好.     

益骨胶囊含药血清对共育体系中破骨细胞活性和凋亡的影响

目的： 观察益骨胶囊含药血清在成骨-破骨细胞共育体系中对SD大鼠破骨细胞（OC）活性和凋亡的影响。 方法： (1)取1d龄SD大鼠颅骨分离培养成骨细胞（OB），取5d龄SD大鼠四肢股骨、胫骨分离培养OC，建立细胞上清相通但细胞间不相互混杂的平面式成骨-破骨细胞共育体系，实验分为含药血清组和对照组；（2）将10月龄SD雌性大鼠分为益骨胶囊灌胃组和生理盐水对照组，制备含药血清和对照血清；（3）重氮盐法检测抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）和光镜观察骨陷窝数；（4）光镜和荧光显微镜下观察共育体系中OC凋亡情况。 结果： 含药血清组在48 h、72 h、96 h对成骨-破骨细胞共育体系中OC分泌TRACP的活性均明显降低于对照组，OC的存活数明显低于对照组，OC的凋亡率明显高于对照组且呈明显的时效关系；所形成骨吸收陷窝的数目明显低于对照组(P<0.01)。 结论： 益骨胶囊含药血清在共育体系中能够抑制OC活性，诱导破骨细胞的凋亡。     

链脲佐菌素诱导的糖尿病早期小鼠胸主动脉钾通道变化

目的:探讨链脲佐菌素诱导的糖尿病早期小鼠胸主动脉钾通道的变化。方法:实验采用离体血管的方法测定糖尿病鼠和正常鼠胸主动脉环对血管收缩剂:60mmol/LKCl和苯肾上腺素(PE)、内皮非依赖性舒张剂:硝普钠(SNP)以及电压依赖性钾通道(K_V通道),钙激活型钾通道(K_Ca通道),ATP敏感钾通道(K_ATP通道)阻断剂的反应。结果:糖尿病鼠胸主动脉环对60mmol/LKCl、PE和SNP的效应都显著大于对照组;K_Ca通道阻断剂四乙铵(TEA)显著降低糖尿病小鼠胸主动脉环在PE的激动下SNP的舒张效应,而且其-logIC₅₀的差值较对照组显著增大;K_V通道阻断剂4-氨基吡啶(4-AP)显著降低糖尿病和正常小鼠胸主动脉环对SNP的舒张效应,但是-logIC₅₀差值无显著差异;K_ATP通道阻断剂格列苯脲(Glibenclamide)显著降低糖尿病小鼠胸主动脉环对SNP的舒张效应,而对照组无显著阻断作用,-logIC₅₀的差值也无显著差异。结论:糖尿病早期小鼠胸主动脉平滑肌细胞K_Ca通道的开放或表达显著增强,也证实了K_ATP通道开放增强。     

基于脂质组学研究瓜拉纳对肥胖大鼠脂代谢的影响北大核心CSCD

研究瓜拉纳对肥胖大鼠血浆脂类代谢物的影响,分析瓜拉纳改善肥胖脂代谢紊乱的作用机制。高脂饮食喂养建立肥胖大鼠模型,通过测量体质量、白色脂肪、肝脏质量、血脂含量,观察肝脏组织形态,评价瓜拉纳对肥胖大鼠的治疗效果;利用UHPLC-Q-TOF-MS脂质组学方法检测各组大鼠血浆样本脂类代谢物变化;Western blot法检测大鼠肝脏脂肪酸合酶、乙酰辅酶A羧化酶1、甘油三酯合成酶、肉碱棕榈酰转移酶Ⅰ、乙酰辅酶A酰基转移酶2蛋白表达。结果表明,瓜拉纳治疗显著减轻了高脂饮食诱导大鼠的体质量、白色脂肪和肝脏质量,缓解了血脂紊乱和肝脏脂肪变性;脂质组学结果显示,高脂模型组大鼠部分甘油三酯、磷脂显著升高,瓜拉纳治疗后部分甘油三酯和磷脂回调;Western blot结果显示,瓜拉纳抑制了肝脏脂肪酸与甘油三酯合成相关蛋白的表达,增加了脂肪酸β氧化相关蛋白的表达。甘油三酯和磷脂代谢异常是高脂饮食诱导大鼠的主要血浆脂代谢特征,瓜拉纳可能通过抑制肝脏脂肪酸与甘油三酯合成,增加脂肪酸β氧化调控部分甘油三酯和磷脂代谢,改善大鼠肥胖和脂代谢紊乱。     

骨髓间充质干细胞衰老与骨质疏松症的研究进展

<正>骨质疏松症(osteoporosis, OP)是临床上常见的老年病,以骨量减少、骨微结构退化为特征,导致骨脆性及骨折风险增加。2018年国家卫生健康委发布的最新流行病学调查报告显示,我国40～49岁人群中OP的患病率为3.2%,50岁以上人群为19.2%,65岁以上则高达32.0%^[1],随着年龄的增长OP患病率逐级递增,提示衰老与OP的发生密切相关。     

铁蛋白-普鲁士蓝纳米复合材料的制备及在肿瘤光热治疗中的应用研究

目的建立铁蛋白-普鲁士蓝纳米材料(ferritin-PB NPs)的制备方法,并探究其光热转换性能和对肿瘤细胞的光热杀伤效果。方法首先通过沉淀法制备普鲁士蓝纳米材料(PB NPs),随后负载于铁蛋白空腔结构中,构建得到ferritin-PB NPs。采用红外光谱和紫外可见分光光谱测试ferritin-PB NPs中的成分组成,采用动态光散射仪和透射电子显微镜测试ferritin-PB NPs的尺寸及形貌,通过热成像仪测试ferritin-PB NPs的光热升温效果及光热稳定性效果,通过激光共聚焦显微镜观察ferritin-PB NPs在HeLa细胞和HepG2细胞中的摄取效果,并通过MTT实验测试ferritin-PB NPs对HeLa细胞的光热杀伤效果。结果ferritin-PB NPs的形貌为铁蛋白内部包覆PB NPs的复合结构,可响应730 nm激光辐照迅速将光能转化为热能,导致测试溶液温度明显升高。ferritin-PB NPs能迅速被HeLa细胞和HepG2细胞摄取,并且在730 nm光照条件下抑制HeLa细胞的增殖。结论通过简便的方法制备了ferritin-PB NPs,具有良好的生物相容性和光热细胞毒性效果,后期有望用于体内肿瘤治疗。