星座药理学与中药研究

星座药理学是一种基于细胞表型的高内涵药物筛选新方法,该方法主要根据关键信号蛋白、特定表型的细胞群,将多种药物在这些细胞上的作用情况整合成具有特定药理调节功能的药物组合和细胞星座,强调这些细胞之间能进行病理、生理功能上的有机组合与整体联系。基于不同分子靶点的药物组合,进行特定的药理调控,形成药理意义上的星座效应。星座药理学的运用可提高整体疗效、减少不良反应及药物的耐受性。星座药理学适合中药等复杂成分群在细胞水平进行活性筛选与功能评价,在中药新药研究方面具有较大的灵活性与创新活力,因而对于创新中药研究与开发具有积极的推动作用。     

中药复方的化学研究体系

由国家科技部倡导的“中药现代化科技产业行动”正在深入开展,促进了我国中医药事业向更高、更新、更深入的层次发展。所谓中药现代化,即指运用现代科学技术,研制、开发现代中药,实现能用现代科学技术阐明其药效物质和作用机理（现代化）,能进行大规模工业生产（产业...     

重组结核分支杆菌16000蛋白抗原(rPA16)的免疫原性研究

目的：研究结核分枝杆菌重组16000蛋白（rPA16)诱发家兔产生抗体的能力并评价其血清学诊断的价值。方法：家兔按注射的抗原及佐剂的不同分组，皮下多点注射分别进行免疫，6次免疫后采血，双向琼脂扩散试验和酶联免疫吸附试验（ELISA）跟踪兔血清抗体效价的时间效应并检测兔血清与所试各类分支杆菌PPD有无交叉反应；同时检测rPA16与各分支杆菌PPD的免疫羊血清的反应，并用rPA16抗原检测人血标本，分析该抗原的临床检测的敏感性和特异性。结果：兔血清抗体效价结果显示：5个月后，加佐剂的抗原组的兔免疫血清仍能检测到抗体，不加佐剂组2个月后血清抗体检测即为阴性，ELISA检测兔免疫血清比双向琼脂扩散方法要更敏感，rPA16抗原加佐剂引起的兔血清抗体滴度最高可达1：6400，不加佐剂组的血清抗体滴度仅为1：400，ELISA法分析抗rPA16的兔血清的特异性表明其特异笥较好，仅与牛、人型结核分支杆菌的PPD呈阳性反应，与其他所试分支杆菌PPD反应均为阴性，同时又分析了rPA16抗原的特异性，与人型PPD相比，该抗原只与所试各类分支杆菌，BCG、牛分支杆菌免疫的血清呈阳性反应，而人型PPD则基本上与结核分支杆菌免疫的血清均呈阳性反应，ELISA检测血清标本结果：肺结核病组中rPA16和PPD检测敏感性分别为64.8%和75.2%；健康组，卡介苗接种阳转健康组，rPA16和PPD检测特异性分别为96.2%,88.5%和94.3%,66.7%。结论：rPA16具有较强的免疫原性和一定的特异性，可能成为结核病血清学诊断试剂之一。     

解决HIV感染者晚发现的策略：以综合性医院为中心开展全病程管理治疗

HIV/AIDS已由不治之症逐渐转变为内科慢性疾病,但仍有1/3左右的患者诊断较晚。晚发现感染者具有较高的住院率和传播风险、较重的经济负担和较差的远期预后,故HIV感染晚发现是我国目前防治艾滋病的重要挑战之一。非高危人群筛查范围有限、临床医护人员对HIV感染者非特异性症状的识别不足、男男性行为HIV感染者循环重组株01...     

高效液相色谱法测定病毒肺炎合剂中绿原酸的含量

目的建立病毒肺炎合剂中绿原酸含量的测定方法。方法采用反相高效液相色谱法。YWG-C18柱;流动相为A液0.4%磷酸水溶液,B液乙腈,线性梯度洗脱;流速1 m l/m in;检测波长327 nm。结果在该色谱条件下,绿原酸色谱峰得到良好的分离;在0.31~10.0μg检测范围内,绿原酸峰面积与浓度线性关系良好,回归方程A=98.64C 81.21(r=0.999 9)。结论方法简单、快速、准确,可作为质量控制方法。     

重组结核分支杆菌38000蛋白的理化特征与细胞免疫功能

目的：探讨重组38000蛋白在结核病流行病调查和亚单位疫苗研制中的应用前景。方法：等电点测定，肽图分析和圆二色光谱分析研究重组38000蛋白的理化性质；豚鼠皮试，MTT法测外周血单核细胞增殖和巨噬细胞吞噬探讨重组38000蛋白在细胞免疫中所起的作用。结果：重组38000蛋白是酸性蛋白，其等电点为4．67，肽图分析表明其碱性氨基酸的数量与理论一致；重组38000蛋白的二级结构由α－螺旋（32．6％），β-转角（31．6％）和无规则卷曲（35．8％）组成，它能诱发致敏豚鼠产生DTH反应；增强小鼠巨噬细胞吞噬功能；刺激30．8％健康者和25％所试结核病人的外周血单核细胞增殖。结论：重组38000蛋白可能在结核病流调中具有应用前景，并可作为亚单位疫苗候选者之一。     

用蛋白质组学方法分析先兆子痫孕妇血清差异蛋白表达和急性反应蛋白

目的用蛋白质组学方法寻找先兆子痫患者血清蛋白的差异表达。方法 5例重度先兆子痫患者血清和5例正常妊娠对照血清分别混合。每个混合样本血清用亲水亲脂柱(hydrophilic-lipophilic balance,HLB)和多肽配体库磁珠(peptide ligandlibrary bead,PLLB)方法去除表达丰富蛋白,使低含量蛋白表达,洗脱液用1D胶联合液相色谱质谱串联技术(liquidchromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)对蛋白表达进行定量分析;结果 HLB方法共有28种蛋白发生差异表达;PLLB方法共有51种蛋白发生差异表达,包括白介素17F(IL-17F)和铜蓝蛋白(ceruloplasimin,CP)等。结论 PLLB联合1D胶-LC-MS/MS是鉴定血清中差异表达蛋白的一种有效方法;炎性反应因子可能与先兆子痫的发病机制有关。     

冰冻切片染色法观察重组狂犬病病毒对乳鼠脑的感染和定位

目的冰冻切片染色法观察重组狂犬病病毒对乳鼠脑的感染和定位。方法将本实验室构建并拯救成功的人用狂犬病疫苗株重组病毒（CTN—GFP）脑内接种1日龄乳鼠和4周龄成年鼠,待感染乳鼠发病后至濒死期,通过心内灌流方法固定并制作脑组织冰冻切片,观察重组病毒在感染鼠的大脑海马组织中的绿色荧光蛋白的表达及分布。结果DAPI将所制作的冰冻切片中脑组织内细胞的胞核染成蓝色,在共聚焦显微镜下观察到受感染乳鼠的脑组织海马回位置有大量绿色荧光蛋白的表达。结论通过制作脑组织冰冻切片的方法可以清楚的观察到病毒的感染及其在海马回中的位置,同时为追踪病毒在体内的移行过程提供了一种新方法。     

结核分支杆菌重组38 000蛋白的免疫原性特征

目的了解结核分支杆菌重组３８０００蛋白（ｒＭＴ３８）诱发家兔产生抗体的能力及作为血清学诊断试剂的价值。方法将家兔分为６组：ＰＰＤ＋生理盐水（Ａ组）,ｒＭＴ３８＋生理盐水（Ｂ组）ｒＭＴ３８＋佐剂（Ｃ组）,１／２ｒＭＴ３８＋１ｒＭＴ１６＋生理盐水（Ｄ组）,１／２ｒＭＴ３８＋１／２ｒＭＴ１６＋佐剂（Ｅ组）,ｒＭＴ１６＋佐剂（Ｆ组））。用ＥＬＩＳＡ法测Ｃ、Ｅ两组血清是否与分支杆菌ＰＰＤ有效叉反应。双向扩散     

将异体阔筋膜细胞外基质用于肾修补的实验研究

目的:探讨异体阔筋膜细胞外基质(extracellular matrix,ECM)作为肾修补材料的效果.方法:12只犬随机分为术后第1,2周及术后第1,2,4,8个月6组,每组2只.术前及术后不同时段行血、尿常规,血肌酐、尿素氮及电解质检查,并做血清肾素测定.处死动物前分别测定左、右肾的肌酐清除率,处死动物后切取两侧肾分别称重并于修补局部取材行光镜及电镜检查.结果:补片覆盖缝合后创面均迅速止血,实验犬在术后均存活,无近远期并发症.术后各时段ECM补片与周围组织均无明显粘连,且补片大小形状无明显改变,无皱缩现象.术前及术后不同时段血、尿常规,肾功能、电解质及血清肾素均无明显变化.补片置入后各时期均无明显的炎性细胞浸润,随着时间的推移和宿主细胞的长入,补片逐渐变薄形成了接近正常的肾包膜结构.补片下方的肾皮质在术后各时期均无明显炎性细胞浸润.结论:异体阔筋膜细胞外基质为理想的肾修补材料.