人羊膜间充质干细胞来源外泌体的提取与鉴定

目的探索人羊膜间充质干细胞来源外泌体(hAMSC-Exos)的分离、纯化与鉴定方法,为外泌体的生物学功能研究奠定基础。方法由废弃的羊膜提取间充质干细胞;采取改良超速离心法分离、纯化培养液上清中的hAMSC-Exos;透射电镜观察、纳米粒子跟踪分析技术(NTA)、Western blot和流式细胞术用于hAMSC-Exos的鉴定外泌体。结果成功用改良超速离心法分离出hAMSC-Exos,透射电镜(TEM)下观察呈中间凹陷的茶杯样结构;NTA结果显示样品直径符合外泌体直径大小;Western blot和流式细胞术证实外泌体表面特异性蛋白CD9、CD63、CD81表达阳性。结论建立了hAMSC-Exos的提取纯化及鉴定方法,为它后续的研究提供依据。     

形成性评价在医学免疫学教学中的应用

在《医学免疫学》教学评价体系中引入形成性评价指标,建立了形成性等级评分与期末终结性考核评价相结合的教学评价系统,对形成性评价体系在医学免疫学教学中的应用进行了探讨。同时,将评价体系在实施过程中遇到的问题及困惑进行了自我分析,并结合个人在教学中的实践内容开展了讨论。     

基于学校卫生专业人员论文发表情况的在职培训教学模块优化研究

分析学校卫生专业人员论文发表情况与在职培训项目中教学模块的设置,为提高培训项目的质量提供参考.方法 采用目的抽样原则,于2015年7月选取参加“2015沈阳市学生体质与健康监测人员培训项目”中在沈阳市市内5个行政区域的学员为调查对象.收集统计调查对象发表的学校卫生相关领域论文,确认文献主题及可能的文献需求情况.结果 在调查的73名学员中,共有13名学员发表过33篇学术论文,有10人以第一作者身份发表过论文.有13篇论文为与高校或疾病预防控制中心合作完成.学术论文按照研究对象可划分为研究儿童少年卫生保健情况、针对家长的健康教育以及学校卫生管理层面3类,分别为29,1,3篇.结论 从在职培训学员实际工作情况出发,筛选符合实际需要的授课内容和授课资源,有助于在职培训项目与学校卫生工作实际需求间的精准对接.     

基于TCGA数据库筛选乳腺癌不良预后相关miRNAs及风险评估

目的基于公用数据库,寻找可作为乳腺癌生物标记物的miRNAs。方法利用人类肿瘤基因组(TCGA)数据库下载乳腺癌相关数据集,分析肿瘤组织与正常组织之间miRNAs的差异表达。Cox单因素回归分析与不良预后相关的miRNAs;对差异表达中上调的有意义的miRNAs进行Cox多因素回归分析,建立风险评估模型。结果与正常组织比较,乳腺癌组织中有370个差异表达miRNAs,其中108个miRNAs表达下调,262个miRNAs表达上调。20个miRNAs的高表达与预后不良相关。进一步建立Cox回归模型筛选出10个miRNAs组合(包括hsa-mir-148b、hsa-mir-449c、hsa-mir-106a、hsa-mir-181d、hsa-mir-9-3、hsa-mir-549a、hsa-mir-556、hsa-mir-618、hsa-mir-466、hsa-mir-135a-1)预测乳腺癌不良预后。结论筛选的10个miRNAs组合(ten-miRNAs)的高评分可成为预测乳腺癌不良预后的生物标记物。     

姜黄素对哮喘大鼠肺组织MMP-9与TIMP-1的表达以及气道重构的影响

目的探讨姜黄素对卵清白蛋白致敏哮喘模型大鼠肺组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其组织抑制物-1(TIMP-1)的表达与气道重构的影响。方法 36只清洁级SD雄性大鼠随机分为对照组、哮喘组和姜黄素组,用卵蛋白作为致敏原制备哮喘大鼠模型,对支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数及嗜酸性粒细胞计数,采用动物呼吸机检测各组大鼠气道呼气阻力,HE染色观察各组大鼠肺组织的病理学变化,采用图像分析软件测定肺组织切片中的支气管壁内周长(Pi)、支气管管壁面积(WAt)、支气管平滑肌面积(WAm),Western blot方法检测各组大鼠肺组织MMP-9与TIMP-1的表达。结果姜黄素干预可显著降低哮喘大鼠BALF中细胞总数及嗜酸粒细胞计数、降低哮喘大鼠肺组织的炎性细胞浸润,降低气道炎症,降低WAt/Pi、WAm/Pi的比值(P0.01);肺功能分析结果显示,姜黄素干预可显著降低哮喘大鼠的呼气阻力(P0.01);Western blot结果显示,姜黄素干预可显著降低哮喘大鼠肺组织MMP-9的表达,上调TIMP-1的表达(P0.01)。结论姜黄素降低哮喘大鼠气道炎症及气道阻力,减轻哮喘气道重构,可能与降低MMP-9的表达,上调TIMP-1的表达相关。     

芹菜素对喉癌Hep-2细胞增殖、迁移与侵袭的影响

目的探讨芹菜素对喉癌Hep-2细胞增殖、迁移与侵袭的影响及可能机制。方法 MTT法检测不同浓度的芹菜素(0、20、40、80μmol/L)对喉癌Hep-2细胞增殖的影响。40μmol/L芹菜素处理Hep-2细胞48h后,Transwell实验检测Hep-2细胞体外迁移和侵袭能力变化;实时PCR和Western blot检测Hep-2细胞Wnt1、β-catenin、环氧合酶2(COX2)与基质金属蛋白酶2(MMP-2)的蛋白与mRNA的表达水平。结果芹菜素抑制喉癌Hep-2细胞增殖,并呈时间浓度依赖性;40μmol/L芹菜素处理Hep-2细胞48h能够有效抑制Hep-2细胞的迁移和侵袭能力,降低Wnt1、β-catenin、COX2与MMP-2 mRNA相对表达量和蛋白表达水平。结论芹菜素抑制喉癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力与抑制喉癌Hep-2细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关。     

肺癌细胞中PAK1的表达下调抑制肺癌细胞的增殖和侵袭能力

目的探讨P21激活激酶1(PAK1)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其对NSCLC细胞增殖和侵袭能力的影响。方法采用免疫组化和Western blot(WB)方法检测正常肺组织及NSCLC组织中PAK1的蛋白表达水平。利用PAK1-siRNA下调肺癌细胞系A549和LK-2中PAK1的表达后,通过MTT和Transwell等实验方法,明确PAK1对NSCLC细胞增殖和侵袭能力的影响。结果与正常肺组织相比,PAK1在肺癌组织中呈现明显的胞浆强表达,并且其异常表达与肺癌组织的TNM分期(P=0.020)、组织类型(P=0.007)和淋巴结转移相关(P=0.040)。肺癌细胞系中,PAK1的表达下调能够明显抑制肺癌细胞的侵袭和增殖能力(P0.05)。结论 PAK1促进肺癌细胞的增殖及侵袭能力,发挥着重要的促癌基因功能。     

慢性肾病维持性血液透析患者抑郁状态现状及影响因素研究

目的调查慢性肾脏病(CKD)维持性血液透析患者抑郁状态的现状,分析其抑郁发生的影响因素。方法选择2016年2-10月中国医科大学本溪市中心医院门诊血液透析室的108例患者与同期门诊体检的120名健康人为研究对象,采用《PHQ-9抑郁症筛查量表》对其进行抑郁状态的评估。再将108例血液透析患者分为抑郁组(n=56)和非抑郁组(n=52),比较两组患者的临床观察指标及实验室检查指标。结果血液透析组患者中抑郁发生概率为51.9%(56/108),健康对照组为4.2%(5/108),组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。血液透析患者中,抑郁组与非抑郁组的性别比例、文化程度、婚姻状况、对疾病预后的了解情况、血红蛋白、血浆白蛋白比较,差异均有统计学意义(P<0.05),体质量、透析时间、血肌酐、尿素氮、血钙、血磷、甲状旁腺素比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论慢性肾脏病维持性血液透析的患者,其抑郁症的发生概率远高于健康对照组,而且,患者的年龄越大、血红蛋白越低、单身、越是对疾病预后基本了解,抑郁程度越高。     

急性砷暴露对小鼠脾脏核转录因子NF-E2相关因子2信号通路的影响

目的探讨急性砷暴露小鼠脾脏核转录因子NF-E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)及其下游血红素单加氧酶-1(HO-1)和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)蛋白的表达。方法将48只健康8周龄清洁级昆明雌性小鼠按体重随机分为4组,分别为对照(生理盐水)组和5、10、20 mg/kg亚砷酸钠染毒组,每组12只。给予小鼠一次性灌胃亚砷酸钠24 h后,测定脾组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力以及Nrf2、HO-1和GST蛋白的表达水平。结果与对照组相比,各剂量亚砷酸钠染毒组小鼠脾组织中MDA含量均增加,差异有统计学意义(P0.05);20 mg/kg亚砷酸钠染毒组小鼠脾组织中SOD活力和10、20 mg/kg亚砷酸钠染毒组小鼠脾组织中GSH-Px活力均减少,差异有统计学意义(P0.05)。且随着亚砷酸钠染毒剂量的升高,小鼠脾组织中SOD和GSH-Px活力均呈下降趋势,而MDA含量呈上升趋势。与对照组相比,各剂量亚砷酸钠染毒组小鼠脾组织中HO-1和GSTO1/2蛋白的表达水平及10、20 mg/kg亚砷酸钠染毒组小鼠脾组织中Nrf2蛋白的表达水平均增加,差异有统计学意义(P0.05);且随着亚砷酸钠染毒剂量的升高,小鼠脾组织中Nrf2、HO-1和GSTO1/2蛋白的表达水平均呈上升趋势。结论急性砷暴露在导致小鼠脾脏发生氧化损伤的同时,能够活化Nrf2信号通路,诱导下游抗氧化相关酶类蛋白表达,这可能是砷暴露刺激机体产生的一种防御应答反应。     

4-苯基丁酸抑制PERK/eIF2α信号通路缓解大鼠脊髓损伤内质网氧化应激反应

目的 探讨4-苯基丁酸对脊髓损伤大鼠的作用和可能机制.方法 采用Allen's法操作方法建立脊髓损伤模型,将SD大鼠分为假手术组(Sham组)、模型组(SCI组)和4-苯基丁酸钠治疗组(4-PBA组);对三组大鼠进行脊髓运动功能(BBB)的评分;应用HE染色检测各组大鼠脊髓的损伤情况;采用ELISA检测各组大鼠血清中M...