CCDC34在非小细胞肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖能力的影响

目的 探讨CCDC34在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况及其对肺癌细胞增殖能力的影响.方法 利用GEPIA数据库分析CCDC34在NSCLC中的差异表达;利用Kaplan-Meier Plotter数据库分析CCDC34与NSCLC患者预后的相关性;构建稳定干扰CCDC34的A549和H1299肺癌细胞系,通过MTT方法和克隆形成实验明确CCDC34对肺癌细胞增殖和克隆形成能力的影响.结果 CCDC34在肺腺癌和肺鳞状细胞癌中的表达均显著高于正常肺组织(P＜0.01);CCDC34的高表达与NSCLC患者的不良预后显著相关(P=0.00013);MTT检测显示干扰CCDC34能够显著抑制A549和H1299的增殖能力(P＜0.05);克隆形成实验检测显示干扰CCDC34能够显著抑制A549和H1299的克隆形成能力(P＜0.05).结论 CCDC34在NSCLC中高表达,增强肺癌细胞的增殖能力,进而促进NSCLC的恶性进展.     

长链非编码RNA-LINC00485在肺癌中的表达及对细胞增殖和迁移的影响

目的观察长链非编码RNA-LINC00485(LINC00485)在肺癌细胞株及组织中的表达,探讨其对肺癌细胞增殖和迁移的影响及其作用机制。方法采用qRT-PCR检测LINC00485在4种肺癌细胞株(H1975、A549、HCC827、H1299)、正常肺泡上皮细胞HPAEPIC和12例肺癌组织及癌旁组织中的差异性表达。通过生物信息学方法预测LINC00485可能结合的微小RNA(miRNA)及靶基因,将靶向沉默LINC00485的小干扰RNA(siRNA)通过脂质体转染至HCC827细胞。应用qRT-PCR检测LINC00485、miR-361-5p、p21活化蛋白激酶2(PAK2) mRNA的表达水平。采用Western blot法检测PAK2蛋白的表达水平。应用MTS法检测细胞增殖能力、细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果与正常肺泡上皮相比,LINC00485在肺癌细胞株中均呈高表达(P 0. 05),其中在HCC827细胞中表达水平最高。LINC00485在肺癌组织中的表达水平高于其癌旁组织(P 0. 01)。下调HCC827细胞LINC00485的表达后,miR-361-5p的表达上调(P 0. 01),PAK2 mRNA和蛋白的表达下调(P 0. 01),HCC827细胞增殖能力降低(P 0. 05),细胞迁移能力下降(P 0. 01)。结论 LINC00485在肺癌细胞株和组织中表达升高,下调LINC00485可通过调控miR-361-5p和PAK2基因的表达,抑制肺癌HCC827细胞的增殖和迁移能力。     

WWC3下调Snail和N-cadherin,上调E-cadherin抑制非小细胞肺癌侵袭和转移

目的研究WWCs(WW and C2 Domain containing protein family)及其各亚型(WWC1,WWC2,WWC3)在人类肺癌中的表达是否存在差异、与临床病理因素的关系及其发挥生物学作用的相关机制。方法应用免疫组化方法检测了159例非小细胞肺癌组织标本中WWCs蛋白表达和亚细胞定位,并对比分析与上皮间质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin表达的关系。利用集落形成实验和transwell实验,检测WWC3对肺癌细胞增殖及侵袭能力的影响。转染或干扰WWC3的表达后,通过Western blot检测双向调控WWC3对E-cadherin、N-cadherin及Snail表达水平的影响。结果 WWC3在正常支气管上皮细胞浆中高表达(31/40,77.5%),而在非小细胞肺癌中低表达(70/159,44%),明显低于正常支气管上皮的阳性表达率(P0.001),且其低表达与非小细胞肺癌的低分化(P=0.010)、高TNM分期(P=0.016)、淋巴结转移(P=0.002)相关。WWC3的低表达与上皮间质转化相关蛋白E-cadherin的高表达(P=0.032)、N-cadherin的低表达(P=0.007)相关。在H1299细胞中转染WWC3表达质粒,抑制肺癌细胞的增殖与侵袭能力,下调Snail和N-cadherin,上调E-cadherin的表达。在A549细胞中转染WWC3-si RNA能够明显促进肺癌细胞的增殖和侵袭能力,上调Snail和N-cadherin的表达,而下调E-cadherin的表达。结论 WWC3抑制肺癌细胞侵袭和转移可能与下调Snail和N-cadherin,上调E-cadherin的表达相关。     

siRNA沉默TEM8基因对非小细胞肺癌A549细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探讨RNA干扰靶向抑制TEM8基因的表达对人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549细胞增殖和侵袭能力的的影响。方法采用RT-PCR检测TEM8在5对NSCLC与癌旁正常组织中的表达;采用化学合成针对TEM8基因的小干扰RNA(TEM8 siRNA)下调A549细胞中该基因的表达,应用RT-PCR和Western blot法检测转染后细胞内TEM8的表达,通过Transwell侵袭实验检测TEM8对A549细胞侵袭能力的影响;CCK8实验及平板克隆形成实验检测TEM8对A549细胞增殖能力的影响。结果与癌旁正常肺组织相比,TEM8在NSCLC组织中显著高表达(P0.05),转染TEM8特异性siRNA后,A549细胞的增殖和侵袭能力均受显著抑制。结论 TEM8在NSCLC中呈过表达,干扰TEM8表达可明显抑制NSCLC的增殖与侵袭能力,推测TEM8可能成为治疗NSCLC的新靶点。     

非小细胞肺癌中SCC-S2的表达及其在肺癌增殖侵袭的作用

目的 探讨SCC-S2在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达,以及SCC-S2对肺癌细胞增殖侵袭能力的影响.方法 采用免疫组化SP法检测146例NSCLC组织中SCC-S2蛋白表达.通过siRNA干扰SCC-S2基因表达,观察SCC-S2对细胞增殖和侵袭的影响.结果 146例NSCLC中SCC-S2阳性率为74.65%(109/146),其阳性与NSCLC的组织学类型、p-TNM分期和淋巴结转移相关.在NSCLC细胞中用siRNA干扰SCC-S2后,肺癌细胞的增殖能力与侵袭能力受到明显抑制.结论 SCC-S2在肺癌中高表达且与肺癌临床分期和淋巴结转移明显相关,SCC-S2有望成为肺癌诊断治疗的新靶点.     

CD163 分子在非小细胞肺癌患者组织中表达及其对肺癌细胞侵袭和增殖的影响

目的:探讨非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)患者血浆和肺癌组织中CD163分子表达水平以及对肺癌细胞侵袭和增殖的影响。方法:选取我院35例NSCLC患者为研究组,35例同期体检的健康人群为对照组,采用Real-time RCR检测肺癌患者肿瘤组织和血浆中CD163表达水平;采用小分子干扰RNA(siRNA)抑制MH-2中CD163分子的表达,再与A549共培养,transwell法观察CD163分子对A549侵袭的影响,CCK-8法检测A549增殖的变化。结果:CD163分子在NSCLC患者血浆中的表达水平显著高于正常健康人群,差异具有统计学意义(P0.05),在肿瘤组织中的表达显著高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P0.05);转染后,A549的侵袭和增殖能力显著下降,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:CD163在NSCLC患者血浆和肺癌组织中高表达,并可增强肺癌细胞的侵袭和增殖能力。     

BCL6共抑制因子样蛋白1(BCORL1)在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的观察BCL6共抑制因子样蛋白1(BCORL1)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,并通过下调肺癌A549细胞中BCORL1的水平观察对A549细胞侵袭和迁移能力的影响。方法收集68例NSCLC组织及对应的癌旁组织,应用免疫组织化学染色分析BCORL1和E钙黏素(E-cadherin)在NSCLC及对应癌旁组织中的表达;采用小干涉RNA(siRNA)下调肺癌A549细胞中BCORL1的水平,TranswellTM小室法检测A549肺癌细胞迁移和侵袭能力。结果 BCORL1蛋白在NSCLC组织中表达水平显著高于对应癌旁组织,而E-cadherin蛋白在NSCLC组织中表达水平则显著低于对应癌旁组织;相关性分析证实BCORL1蛋白与E-cadherin蛋白在NSCLC组织中的表达呈显著负相关;临床相关分析发现BCORL1蛋白表达与淋巴结转移和TNM分期具有显著的相关性;特异性siRNA下调BCORL1水平后,E-cadherin蛋白上调;敲低BCORL1后,明显抑制A549肺癌细胞侵袭和迁移。结论 BCORL1在NSCLC组织中高表达且与E-cadherin表达呈显著负相关,其高表达与NSCLC恶性临床病理特征相关。敲低BCORL1,上调E-cadherin表达并抑制肺癌细胞侵袭和迁移能力。     

microRNA-Let-7a 在肺癌患者中的表达及其抑癌机制的探讨

目的:探讨非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)患者血清和肺癌组织中microRNA-Let-7a表达水平以及对肺癌细胞侵袭和增殖影响。方法:选取我院50例NSCLC患者为研究组,50例同期体检健康者为对照组,采用Real-time RCR检测肺癌患者肿瘤组织和血清中microRNA-Let-7a表达水平;对肺癌细胞株A549转染microRNA let-7a mimics后,transwell法观察microRNA-Let-7a对肺癌细胞侵袭的影响,CCK-8法检测肺癌细胞增殖的变化;Real-time RCR及Western blot检测了A549中k-Ras mRNA及蛋白水平。结果:microRNA-Let-7a在肺癌患者血清中的表达水平显著低于正常健康人群,差异具有统计学意义(P0.05),在肿瘤组织中的表达显著低于癌旁组织,差异具有统计学意义(P0.05);转染microRNA let-7a mimics后,A549的侵袭和增殖能力显著下降,差异具有统计学意义(P0.05),A549中k-Ras mRNA及蛋白表达水平显著降低,差异具有统计学意义(P0.05);结论:microRNA let-7a在肺癌患者肿瘤组织和血清中低表达,并可减弱肺癌细胞的侵袭和增殖能力,且可能通过Ras信号途径发挥作用。     

肺癌组织及细胞中MED27的表达及意义

目的探讨中介因子复合体(mediator 27,MED27)在肺癌组织样本和肺癌细胞中的表达并进一步观察MED27在肺癌细胞中的生物学功能。方法采用免疫组化法和Western blot法检测MED27在70例肺癌组织以及5种不同肺癌细胞中的表达,分析MED27蛋白表达与肺癌临床病理特征的相关性;设计沉默MED27基因的siRNA,利用Western blot法检测MED27siRNA在肺癌细胞中的沉默效率;CCK-8法检测细胞增殖能力的变化,划痕和Transwell实验评估细胞的迁移和侵袭能力的变化;Western blot法检测迁移侵袭相关蛋白的变化。结果免疫组化和Western blot检测结果表明,MED27在肺癌组织以及肺癌细胞系中的表达水平明显上调(P0.05)。MED27表达与淋巴结转移呈正相关(χ2=9.438,P=0.002,P0.05),与患者性别、年龄、肿瘤T分期、远处转移等均无相关性(P0.05);利用小干扰RNA沉默MED27的表达,可以抑制H460细胞的增殖、迁移和侵袭(P0.05)。同时,迁移相关蛋白MMP-2和MMP-9表达明显下调,侵袭相关蛋白E-cadherin表达也明显下调,而E-cadherin的负性调控蛋白Snail表达升高。结论 MED27在肺癌组织和细胞系中高表达,且MED27阳性肺癌患者预后更差。沉默MED27的表达可以抑制肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,以上结果提示MED27可以作为临床肺癌基因治疗的潜在靶标。     

非小细胞肺癌中C6orf106的表达及意义

目的检测C6orf106在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织及细胞系中的表达情况,探讨其与临床病理学特点及预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测129例NSCLC及其癌旁肺组织中C6orf106的表达,Western blot检测人类正常支气管上皮HBE及肺癌细胞A549、H1299和SPC中C6orf106的表达。结果 C6orf106在肺癌组织和癌旁肺组织中的阳性率分别为75.19%(97/129)和8.53%(11/129),两组差异具有统计学意义(χ~2=117.788,P0.001);C6orf106在肺癌细胞A549,H1299和SPC中的表达均显著高于HBE细胞(P0.01);C6orf106与肺癌患者的TNM分期(P=0.004)、淋巴结转移(P=0.04)和预后有关(P=0.002);Cox单因素及多因素分析结果显示C6orf106的阳性表达是影响NSCLC预后的独立危险因素(P=0.007和P=0.019)。结论 C6orf106在肺癌组织及细胞系中高表达,且与肺癌的TNM分期、淋巴结转移和不良预后相关,C6orf106是影响NSCLC预后的独立危险因素。