白树花多糖硫酸酯的抗凝血活性研究

目的研究白树花多糖硫酸酯的抗凝血效果及抗凝血机理,为制备合成高效、安全的多糖硫酸酯抗凝剂提供实验依据。方法将可食用的白树花真菌进行发酵,提取水溶性多糖,采用氯磺酸-吡啶法进行硫酸酯化修饰,获得水溶性的白树花多糖硫酸酯。通过测定APTT、TT、凝血因子活性对白树花硫酸酯的抗凝血效果及抗凝血机理进行评估和探讨。结果对正常人血浆进行的抗凝血实验表明,白树花多糖硫酸酯具有明显的抗凝血活性,在5 mg/L的浓度下即可发挥效果,在10 mg/L浓度时,相当于150 U肝素的抗凝血效果;抗凝血机理研究结果表明,白树花多糖硫酸酯作用于内源凝血系统,主要通过抗凝血酶Ⅲ抑制凝血因子Ⅱa和Xa的活性发挥抗凝血作用,抗凝血机理与肝素完全相同。结论通过上述研究结果,我们认为白树花多糖硫酸酯具备肝素的抗凝血特性。同时由于是可食用真菌多糖的制备产物,在防生物污染方面具备一定优势。因此,白树花多糖硫酸酯可作为理想的肝素替代品进行开发及临床应用。     

传染性非典型肺炎限制性内切酶检测方法的研究

目的建立一种对传染性非典型肺炎，又称严重急性呼吸综合征（SARS）准确诊断的新方法。方法利用GCG软件将已公布的SARS病毒变异品系与人类基因组、人类易感病原体进行比对分析。结果筛选出了用于检测的S-cDNA核苷酸片段，并在该片段中确定特异性的酶切位点，使检测方法的准确性得以保证。结论与传统检测方法比较，限制性内切酶分析法完全克服了检测中非特异性结果的产生，使检测结果准确可靠。     

60Coγ射线诱导GFP转染的B16细胞区域性基因组不稳定性改变的研究

目的 应用绿色荧光蛋白(GFP)标记的基因组不稳定性报告系统,检测⁶⁰Coγ射线诱导B16细胞区域性基因组不稳定性改变。方法 实验分为3组:未转染组、转染组及转染对照组。应用脂质体转染法,将GFP标记目的质粒及对照质粒分别转入B16细胞,经G418筛选,有限稀释法培养形成单克隆生长。给予0、2和4 Gy ⁶⁰Coγ 射线照射,共聚焦荧光显微镜记录GFP表达细胞数,计算GFP表达率。结果 建立了含有GFP标记的区域性基因组不稳定性报告系统的GFP-B16细胞株。⁶⁰Coγ射线照射后,2和4 Gy组均可见GFP-B16细胞表达GFP,并与照射剂量、照射后时间密切相关。GFP表达率随照射剂量(F=36.55、36.76,P<0.05)和照射后时间的增加而增高(t=-3.27、-3.16、-4.26、-6.11、-7.17, P<0.05)。照射后第3天,GFP表达率增高幅度最明显(2.46±0.24),第5天达到高峰(3.82±0.35),增高幅度趋于稳定。0 Gy组在照射后2周,自发绿色荧光蛋白表达率为1/60万。结论 GFP标记的基因组不稳定性报告系统可检测到⁶⁰Coγ射线诱导的B16细胞区域性基因组不稳定性改变。     

黄芪皂甙对小鼠T淋巴细胞钙依赖性钾通道的影响

本实验以膜片钳技术记录了Ｔ淋巴细胞钙依赖性钾通道电流，发现黄芪皂甙（１００μｌ／ｍｌ）可使ＣｏｎＡ激活的Ｔ淋巴细胞钙依赖性钾通道开放概率增加、开放时间延长、关闭时间缩短，单独不能激活通道，说明黄芪皂甙可使活化的Ｔ淋巴细胞内游离钙增加，并使钙离子内流的驱动力增强。这对于理解黄芪皂甙提高免疫力的机理具有重要意义。     

羧甲基壳聚糖银对牙龈卟啉单胞菌的抑菌作用

目的：研究羧甲基壳聚糖银 (CMCT-Ag⁺) 对牙龈卟啉单胞菌 (Pg) 的抑制作用,为研制高效无毒的抗牙周病药物提供实验依据。方法：将壳聚糖经碱化、氯乙酸修饰和离子交换制成 CMCT-Ag⁺。采用琼脂扩散和固体平板二倍稀释法观察抑菌环直径和菌 斑数,测定 CMCT-Ag⁺ 对 Pg的抑制作用。结果：获得了粉红色的 CMCT-Ag⁺ 粉末,收率为 89.4%,取代度为 0.98,银离子含量为10.21%。在抑菌环实验中,当CMCT-Ag⁺的浓度大于 0.3125 g•L^-1 时,其抑菌环直径随浓度的增加而增大,其中 40 g•L^-1CMCT-Ag⁺ 抑菌环直径可达 9.5 mm,与 0.005 g•L^-1 替硝唑相当;当 CMCT-Ag⁺ 浓度大于 40 g•L-1 时,抑菌环直径明显下降,表明 CMCT-Ag⁺ 的抑菌范围为大于 0.3125 g•L^-1。在菌斑实验中,当 CMCT-Ag⁺ 浓度大于 0.3125 g•L^-1 时,培养基表面 Pg 的生长明显受到抑制;而当浓度大于 1.25 g•L^-1 时,培养基表面无 Pg 生长,表明 CMCT-Ag⁺ 最低抑菌浓度为1.25 g•L^-1。结论：CMCT-Ag⁺ 对 Pg 的生长有明显抑制作用,可用于进一步研制治疗牙周炎药物。     

乳腺癌患者血清p53抗体检测在新辅助化疗研究中的应用

乳腺癌是女性中最常见的恶性肿瘤之一。近些年来在国内的一些大城市中，乳腺癌的发病几率一直呈上升趋势。新辅助化疗（neoadjuvant chemotherapy，NAC）目前被临床广泛应用于晚期乳腺癌的系统治疗。NAC能够显著降低肿瘤分期，提高保乳手术几率。蒽环类药物是一种常用的NAC治疗方案，能够通过与癌细胞内拓扑异构酶Ⅱ的相互作用而阻碍DNA的转录，进而达到抑制癌细胞增殖的目的。近些年来，对血清p53抗体的研究成为p53研究中的一个新热点。血清p53抗体是癌细胞内p53蛋白（通常是突变性p53蛋白）进入血液内，发生自身免疫而产生的抗体。目前，国内外对血清p53抗体对NAC的预测价值方面报道较少见。本实验研究了36例晚期乳腺癌患者化疗前p53抗体表达量与化疗后客观缓解（objective response，OR）率的关系，结果报告如下。     

FineFix固定液与福尔马林固定液对组织保存及固定的比较

随着石蜡切片、免疫组化、特殊染色以及分子遗传学分析在病理诊断上的普遍应用,对标本组织处理要求越来越严格.固定是标本处理过程中的重要环节,如果固定液选择不当、浓度不均、固定时间与温度不合适以及固定液过少等均会使组织固定不良而影响制片质量、免疫标记及分子生物学检测结果,从而影响病理诊断.福尔马林是一种有毒、致敏及致癌物,废液处理成本较高,经其固定的组织抗原蛋白的氨基与醛基交联形成羧甲基封闭抗原决定簇,使免疫组化着色效果减弱[1].本实验采用FineFix固定液(以下简称FF)与福尔马林液固定的组织进行对比,经FF固定的组织形态结构完整,尤其在提取DNA和RNA的质和量上具有明显的优越性[2].     

t（11;18）（q11;q23）一家系

先证者　男 ,30岁 ,表型正常。婚后 3年 ,其妻怀孕 5次 ,均在孕 2～ 3个月自然流产 ,妇科检查正常。夫妇非近亲结婚。患者外生殖器正常。精液检查精子数量正常。细胞遗传学检查 :外周血细胞染色体观察 ,常规外周血淋巴细胞培养 ,G显带分析30个细胞 ,先证者核型为 46 ,XY,t(11;18) (11pter→ 11q11∷18q2 3→ 18qter;18pter→ 18q2 3∷ 11q11→ 11qter) ,其妻染色体核型正常。先证者性细胞联会复合体 (synaptonemal complex,SC)观察 ,方法参照文献 [1]。睾丸活检微铺展的 SC电镜观察 ,分析 30个精母细胞 (从早粗线期到晚粗线期 )中 SC图…     

红花水溶性多糖的分离、纯化及初步研究

 目的从红花中提取水溶性粗多糖,进一步纯化,得到均一的多糖CTP,并研究其组成和性质。方法粗多糖经反复冻融、Sevage法脱蛋白、超滤、柱色谱等方法分离纯化得到CTP。经比旋光度测定、HPLC等方法检验其均一性,结果CTP为均一组分,GC分析其单糖组成为Gle和Cal,摩尔比为6.08:1 结论CTP为中性杂多糖,相对分子质量4000～5000。     

DNA—聚烷基紫精复合膜的形成及其电化学特性

目的在玻碳电极表面形成ＤＮＡ－聚烷基紫精复合膜,研究该膜的电化学特性及Ｃｏ（ｂｐｙ）３＋３在该膜上的电化学响应。方法聚阳离子与聚阴离子通过静电引力形成复合物。结果在复合膜电极上的Ｃｏ（ｂｐｙ）３＋３的响应电流比它在光的玻碳电极上高。但还原峰向正向移动,氧化峰向负向移动。结论复合膜中的ＤＮＡ保持它在溶液中的性质,探寻了一种研究ＤＮＡ特性的新方法。