内皮素-1对高血压病患者肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾通道活性的影响

目的　探讨内皮素 1(ET1)对高血压病患者血管平滑肌细胞KCa通道活性的影响。方法　选择高血压病患者 18例 ,血压正常者 17例 ,两组患者均于腹部手术时取肠系膜动脉小分支用酶消化法获得单个血管平滑肌细胞。以膜片钳技术检测KCa通道的活性 ,记录不同钳制电压下单通道电流的平均开放时间 (To)、平均关闭时间 (Tc)、平均开放概率 (Po)、电流幅值 (Am) ,并绘制成电流 电压关系曲线。再分别加入Ca2 + (10 -8、10 -7、10 -6mol/L)、ET1(2× 10 9mol/L、4×10 9mol/L、6× 10 9mol/L、8× 10 9mol/L)后检测To、Tc、Po、Am等参数变化。结果　①高血压病患者KCa通道活性变化 :于细胞内面向外膜片下 ,在对称性高钾液中 ,高血压病组KCa通道平均开放概率增加 ,关闭时间延长、开放时间缩短。在浴液中分别加入Ca2 + 后 ,两组KCa通道均被明显激活 ,但血压正常组Po的增加显著高于高血压病组 (P <0 .0 0 1)。②ET1对高血压病患者KCa通道活性的影响 :血压正常者在内面向外式膜片下 ,Po、Tc均先增加后降低 ,显示低浓度时兴奋、高浓度时抑制 ,然而高血压病患者肠系膜血管平滑肌KCa通道对ET1则缺乏反应。结论　高血压病患者肠系膜动脉平滑肌细胞KCa通道活性明显高于血压正常者 ,但对Ca2 + 的敏感性降低。ET1对高血压病人KC     

胰岛素及其受体在肾缺血再灌注损伤中的作用

目的　探讨肾缺血再灌注 (IR)过程中胰岛素及其受体的作用。方法　采用钳夹肾动脉的方法建造急性缺血再灌注肾损伤模型。将大耳白兔分为对照组、单纯缺血再灌注组 (IR组 )、胰岛素处理组 (Ins+IR组 ) 3组 ,Ins+IR组再灌注的同时给予胰岛素溶液 (Ins3U/ kg.wt) ,而对照组和 IR组则给予等量生理盐水。测定各组动物的血糖、血清胰岛素水平及肾组织胰岛素受体高、低亲和力常数 (Kd1 ,Kd2 )和高、低亲和力受体最大结合容量(Bmax1 ,Bmax2 )。结果　缺血再灌注 2 h后 ,3组动物血糖值、血清胰岛素水平均较术前显著升高 (P<0 .0 5 ) ,IR组尤为显著 ,IR组 Kd1 、Kd2 、Bmax1 、Bmax2 均较对照组显著降低 (P<0 .0 5 ) ,Ins+IR组仅 Bmax2 较对照组显著降低 (P<0 .0 5 ) ;4 8h后 ,3组动物血糖值恢复至正常水平 ,对照组胰岛素水平恢复至正常水平 ,IR组也较 2 h时明显下降(P<0 .0 5 ) ,但仍明显高于对照组 (P<0 .0 5 ) ,3组动物 Kd1 、Bmax1 值无差异 ,Ins+IR组 Bmax2 仍维持较低水平 (P<0 .0 5 ) ,Ins组 Kd2 明显高于对照组 (P<0 .0 5 )。结论　在肾 IR过程中 ,内源性胰岛素的作用减弱 ,外源性胰岛素对肾组织高亲和力受体位点无下降调节作用 ,但胰岛素可引起低亲和力受体数目的下调。胰岛素减轻 IR肾损伤的作用主要是     

HBV前C/C基因与绿色荧光蛋白基因融合表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达

目的 :构建含HBV前C C基因与绿色荧光蛋白基因的融合表达载体 ,并在真核细胞中表达。方法 :用PCR法扩增含 1.3倍HBVayw型全基因组真核表达载体pHBV1.3的前C C基因片断 ,应用含绿色荧光蛋白基因的真核表达质粒构建融合表达载体 ,采用脂质体介导方法将其转染到HEK2 93细胞 ,并用荧光显微镜及ELISA法检测融合蛋白的表达。结果 :经PCR及酶切鉴定 ,证实成功构建了含HBV前C C基因的真核表达重组体pEGFP -HB VC ,显微镜下观察及ELISA法证实在HEK2 93细胞中表达了相应融合蛋白。结论 :构建的重组表达载体能在真核细胞中表达目的蛋白与GFP的双功能融合蛋白 ,适合于针对HBV前C C区的相关研究。     

THE INFLUENCE OF MULTIPLE FACTORS ON GALL BLADDER PRESSURE AFTER AURICULAR POINT STIMULATION

The study has explored 11 correlative variables which might affect the gallblad-der pressure GBP of patients with gall stone after auricular electrical stimulation by means of multiplestepwise regression. It was found that the size of gallbladder stone (X9), cholecystolithiasis (X4),sex (X1), and the baseline of GBP (X10) could affect the GBP change range (Y1) depressingly orreinforcingly. Also the baseline of GBP (Y1) could be affected by the variables X1 (sex), X2 (age),and X6 (long diameter of the gallbladder, LDGB), etc.. The result shows that the change in GBPafter auricular electrical stimulation is comprehensively influenced by multiple factors. And it providessome useful information for predicting the curative effect of auricular therapy on gallbladder stone inclinic.     

胆道穿孔的诊治体会

目的探讨胆道穿孔的病因、诊断及处理措施。方法对1985-2003年收治的41例胆道穿孔病例进行回顾性分析。结果41例均行手术治疗，2例死亡，其余均治愈。结论胆道在感染和梗阻情况下容易发生胆道穿孔，胆囊疾病合并胆管疾病并发感染时易发生胆囊穿孔，治疗胆道穿孔应根据病变和其并发症采用不同的手术治疗措施。     

直肠印戒细胞癌和粘液腺癌临床病理分析

目的：比较研究直肠印戒细胞癌和粘液腺癌临床和病理学特点的差异。方法：回顾性地对比分折20例直肠印戒细胞癌和同期79例直肠粘液腺癌的临床和病理学特点。结果：直肠印戒细胞癌组的一年生存率65．0％，三年生存率30．0％，五年生存率5．0％。黏液腺癌组一年生存率84．8％，三年生存率58．2％，五年生存率38．0％。两在显微镜下黏液分布不同，肉眼所见大体标本相差甚远。结论：直肠印戒细胞癌较直肠粘液腺癌的诊断困难，恶性度高，预后差，临床上应对二区别对待，术中冰冻切片有助于提高病理诊断准确率，从而指导手术。     

高血压病肠系膜动脉平滑肌细胞端粒酶活性表达的研究

目的 :探讨高血压病动脉平滑肌组织端粒酶活性与高血压的发病关系。方法 :采用PCR -ELISA法检测 30例高血压病患者和 2 0例血压正常者肠系膜动脉平滑肌细胞 (SMC)端粒酶活性。结果 :高血压患者端粒酶阳性表达 2 8例 (93.3% )。血压正常者端粒酶阳性表达 3例 (15 % )。差异非常显著 (P <0 .0 5 )。结论 :高血压病动脉平滑肌细胞端粒酶活性的表达升高 ,可能与高血压发病有关。     

hTERT-siRNA表达载体的构建及对MCF-7细胞生长、端粒酶活性的抑制作用

目的 构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,并研究该载体对乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性及细胞增殖的影响,为针对端粒酶的乳腺癌基因治疗提供新的途径.方法 设计针对人端粒酶逆转录酶催化亚基(hTERT)的干扰靶序列TGTTCAGCGTGCTCAACTA,构建重组siRNA表达质粒pGenesil-hTERT,同时构建不针对任何基因的阴性对照重组pGenesiL-HK.两种重组质粒经酶切、电泳分析和测序鉴定后,用脂质体转染法分别转染乳腺癌MCF-7细胞,应用端粒酶重复序列扩增聚合酶链反应(TRAP-PCR)及聚丙烯酰胺凝胶电泳检测端粒酶活性,流式细胞仪测定细胞凋亡率.结果 酶切电泳测序分析表明插入序列正确,重组质粒构建成功.转染pGenesil-hTERT的MCF-7细胞,凝胶电泳见端粒酶特征性条带明显减少,端粒酶活性受到明显抑制pGenesil-hTERT转染细胞后凋亡率较对照组明显升高(P＜0.01),且转染48h凋亡率最高,达54.7%±2.41%.结论 hTERT-siRNA可有效抑制乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性、促进细胞凋亡,此法有望应用于肿瘤基因治疗.     

儿童髓母细胞瘤中C—Jun和C—Fos表达与预后的关系

目的探讨C-Jun和C—Fos在儿童髓母细胞瘤中的表达及临床意义。方法回顾性分析84例经手术病理证实并获随访的儿童髓母细胞瘤临床病理资料，男46例，女38例，年龄6～12岁，按术后生存期3、5、10年，分为A、B、C三组，每组病例数各为42例、27例和15例。采用免疫组化S-P法检测患儿肿瘤组织中C-Jun和C-Fos的表达。使用spe踟m相关分析和COX回归模型作统计学处理。结果84例儿童髓母细胞瘤中，C-Jun和C—Fos阳性表达各71例（84．52％）和65例（77．38％），A、B、C三组中Cqun和C—Fos阳性表达率各为100％和97．6％,40．74％和77．78％、13．33％和20％，三者两两比较，差异均有统计学意义（P〈O．01）；Spearman相关分析显示，C-Jun和C—Fos的表达与患者的生存时间呈显著负相关，且二者表达具有协同性。COX回归模型分析显示，C-Jun和C—Fos是患儿预后的不良因素。结论儿童髓母细胞瘤中存在C-Jun和C-Fos的阳性表达，并与患儿预后呈负相关。     

瘦素、胆囊收缩素、血脂与胆石类型关系探讨

目的探讨瘦素（leptin）、缩胆囊肽（CCK）、血脂、胆固醇与Gs和HS两类胆石病关系。方法比较检测339例胆囊结石（Gs），67例肝胆管结石（HS）病员，20例正常对照者血清leptin、CCK、胰岛素、肝功能、血脂、脂蛋白等，评价各检测指标间关系。结果GS组leptin、CCK、BMI、胆固醇、甘油三酯、白蛋白、GGT、APO-a显著高于HS组（P〈0．05）；GS组内leptin与CCK、BMI、胰岛素、转氨酶、胆红素、胆固醇呈正相关（P〈0．05）；HS组内leptin与CCK、BMI、胰岛素、转氨酶、胆红素呈正相关（P〈0．01），与白蛋白、APO-a呈负相关（P〈0．05）。结论Leptin参与调控脂质代谢，两类胆石Leptin、血脂等存在明显差别，从调控脂质代谢角度探讨Leptin在两类胆石中的作用可能对阐明胆石成因具有价值。