增龄性肌肉减少症小鼠肌肉组织抗氧化能力的特点

目的 基于核因子E2相关因子2（Nrf2）依赖的抗氧化途径探讨增龄后肌肉组织抗氧化应激特点,阐明活性氧（ROS）生成和抗氧化间的动态平衡在增龄性肌肉减少症（肌少症）中的作用。 方法 24只C57BL/6J（C57）雄性小鼠随机分为3月龄组（3 M组）、12月龄组（12 M组）和22月龄组（22 M组）,取小鼠比目鱼肌组织,计算骨骼肌质量指数（SMI）,HE染色观察各组小鼠肌肉组织病理形态表现,2',7'-二氯荧光素二乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针法检测各组小鼠肌肉组织中ROS水平,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组小鼠肌肉组织中过氧化物酶体增殖子活化受体γ共激活因子1α（PGC-1α）、Nrf2和抗氧化应激基因mRNA表达水平,Western blotting法检测各组小鼠肌肉组织中Nrf2蛋白表达水平。 结果 与3 M组比较,12 M组小鼠比目鱼肌肌纤维横截面积增大,部分肌纤维细胞核数量增多,部分肌纤维可见变性改变,SMI值降低,但差异均无统计学意义（P>0.05）,肌肉组织中ROS水平升高（P<0.05）,Nrf2 mRNA表达水平差异无统计学意义（P>0.05）,PGC-1α mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,Nqol、Cat、Gclc、Sod1和Sod2 mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,Nrf2蛋白表达水平明显降低（P<0.01）;与12 M组比较,22 M组小鼠比目鱼肌白色肌纤维增多,形态不规则,肌纤维细胞核数量增多并出现核内移现象,肌细胞间隙增大,细胞数量减少,SMI值降低,但差异无统计学意义（P>0.05）,肌肉组织中ROS水平明显升高（P<0.01）,Nrf2 mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,Nqol、Cat、Sod1和Sod2 mRNA表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）,而Gclc mRNA表达水平降低（P<0.05）,Nrf2蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。 结论 增龄性小鼠比目鱼肌表现为肌少症表型,以氧化代谢为主的比目鱼肌具有一定的抗氧化应激能力,与Nrf2依赖的抗氧化途径增强有密切关联。     

健康体检者血尿酸和γ-谷氨酰转肽酶水平与代谢综合征的关联性分析

目的 分析血尿酸（SUA）和γ-谷氨酰转肽酶（γ-GGT）水平与代谢综合征（MS）患病的关联性,探讨SUA与γ-GGT在MS中的交互作用,为MS的风险预测和早期干预提供依据。 方法 采用整群抽样方法共抽取延边朝鲜族自治州安图县医院体检中心20~79岁健康体检者7 560名,按照MS诊断标准分为MS及其相关代谢指标异常组和MS及其相关代谢指标正常组,收集各组研究对象的性别、年龄、身高、体质量、收缩压（SBP）和舒张压（DBP）以及血清空腹血糖（FBG）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）、SUA和γ-GGT等指标,Logistic回归分析法分析不同代谢异常患者患病风险,并分析各组患者各种代谢指标异常患病的交互作用。 结果 MS及其相关代谢指标异常组研究对象的高尿酸血症（HUA）和γ-GGT水平升高患病风险均高于MS及其相关代谢指标正常组,随着SUA和γ-GGT水平升高,MS及其相关代谢异常患病风险逐渐升高。MS及其相关代谢指标异常组研究对象的HUA和γ-GGT水平升高患病风险是MS及其相关代谢指标正常组的4.660倍（95%CI：3.571~6.085）和5.260倍（95%CI：4.009~6.897）,随着代谢异常程度增加,HUA和γ-GGT水平升高患病风险逐渐升高。SUA和γ-GGT水平均升高组研究对象的肥胖、高血压、血脂异常、高血糖和MS患病风险分别是SUA和γ-GGT水平均正常组的1.930倍（95%CI：1.617~2.304）、1.618倍（95%CI：1.352~1.935）、4.011倍（95%CI：3.245~4.958）、1.890倍（95%CI：1.654~2.393）和2.695倍（95%CI：2.248~3.230）。SUA和γ-GGT水平升高对血脂异常患病存在相加交互作用,其交互效应指数（S）和归因交互效应百分比分别为1.17和10.9%。 结论 SUA和γ-GGT水平与MS及其相关各种代谢指标异常患病风险有密切关联,SUA和γ-GGT水平升高与代谢异常程度有关联。HUA并发γ-GGT水平升高明显增加高血压、血脂异常和MS的患病风险,且SUA和γ-GGT水平升高对血脂异常患病具有相加交互作用。     

PCR-核酸试纸条快速鉴定皮氏罗尔斯顿菌

目的 基于PCR-核酸试纸条技术,建立快速检测制药用水中皮氏罗尔斯顿菌的方法。方法 利用煮沸法提取皮氏罗尔斯顿菌基因组DNA,以皮氏罗尔斯顿菌16S rDNA为靶基因使用NCBI primer-BLAST 5.0设计一对特异性引物,经克隆转入大肠杆菌感受态细胞DH5α,鉴定PCR产物;分别在引物的5’端标记FITC与Biotin;组装核酸试纸条,建立PCR-核酸试纸条的方法;优化反应体系中胶体金标记的链霉亲和素与抗体浓度的最佳工作量;并对试纸条进行反应原理验证及灵敏度、特异性、稳定性评价;对某生物科技有限公司制药用水检测出的7株皮氏罗尔斯顿菌进行实验并利用MEGA构建进化树,对污染溯源进行分析。结果 煮沸法提取基因组浓度较好,纯度1.8~2.0;PCR产物经克隆转化、测序比对,与GenBank已登记的皮氏罗尔斯顿菌16S rDNA相似度为100%;利用胶体金放大原理,每100 μL胶体金溶液中,加入3.5 μL链霉亲和素进行标记,硝酸纤维素膜上检测线为2.0 mg/mL抗FITC抗体,质控线为1.2 mg/mL生物素化BSA,与阳性扩增产物结合产生红色条带;按照优化条件进行试纸条组装,每100 μL样品展开液中加入8 μL PCR产物,反应5 min后观察结果;核酸试纸条特异性结果与琼脂糖凝胶电泳结果一致,仅有皮氏罗尔斯顿菌为阳性结果,不动杆菌、气单胞菌、假单胞菌、非脱羧勒克氏菌均为阴性结果;核酸试纸条灵敏度评价,将DNA浓度降至10-5 ng/μL时,试纸条检测线仍有条带,较琼脂糖凝胶电泳结果灵敏度高1000倍;核酸试纸条稳定性评价,将试纸条在3、6、9、12月进行检测,稳定性较好。结论 建立PCR-核酸试纸条技术检测制药用水中皮氏罗尔斯顿菌,具有简单快速、特异性强、灵敏度高、成本较低等优点,适用于制药企业对制药用水的日常检测。     

甲状腺肿与甲状腺癌DNA倍体差异性研究

目的研究甲状腺肿与甲状腺癌DNA倍体差异的临床意义。方法采用流式细胞术对34例甲状腺肿(结节性甲状腺肿22例,弥漫性甲状腺肿12例)及29例甲状腺癌(分化型甲状腺癌20例、未分化型甲状腺癌9例)进行DNA倍体分析及细胞周期检测。结果甲状腺癌组(分化型、未分化型)DNA异倍体率明显高于甲状腺肿组(结节性、弥漫性)(P<0.05),甲状腺癌组(分化型、未分化型)DNA整倍体细胞S期百分率也明显高于甲状腺肿组(结节性、弥漫性)(P<0.05),未分化型与分化型甲状腺癌的DNA异倍体率之间无差异(P>0.05),未分化型与分化型甲状腺癌的DNA整倍体细胞S期百分率有差异(P<0.05)。结论DNA倍体分析及细胞周期检测有助于甲状腺癌的早期诊断。     

Ag3PO4 nanocrystals and g-C3N4 quantum dots decorated Ag2WO4 nanorods: ternary nanoheterostructures for photocatalytic degradation of organic contaminants in water

Visible-light-driven Ag₃PO₄/graphite-like carbon nitride/Ag₂WO₄ photocatalysts with different weight fractions of Ag₃PO₄ were synthesized. Ag₂WO₄ nanorods with a scale of 500 nm to 3 μm were prepared by using a hydrothermal reaction. Via a facile deposition–precipitation technique, graphite-like carbon nitride (g-C₃N₄) quantum dots and Ag₃PO₄ nanocrystals were then deposited onto the surface of Ag₂WO₄ nanorods sequentially. Under visible-light irradiation (λ > 420 nm), the Ag₃PO₄/g-C₃N₄/Ag₂WO₄ nanorods degraded Rh B efficiently and displayed much higher photocatalytic activity than that of pure Ag₂WO₄ and the g-C₃N₄/Ag₂WO₄ composite, and the Ag₃PO₄/g-C₃N₄/Ag₂WO₄ hybrid photocatalyst with 30 wt% of Ag₃PO₄ exhibited the highest photocatalytic activity. The quenching effects of different scavengers demonstrated that reactive h⁺ and ·O²⁻ played the major roles in Rh B degradation. It was elucidated that the excellent photocatalytic activity of Ag₃PO₄/g-C₃N₄/Ag₂WO₄ for the degradation of Rh B under visible light (λ > 420 nm) can be ascribed to the efficient separation of photogenerated electrons and holes through the Ag₃PO₄/g-C₃N₄/Ag₂WO₄ heterostructure.

The ternary heterostructured Ag₃PO₄/g-C₃N₄/Ag₂WO₄ photocatalysts were successfully synthesized. The ternary composites exhibited enhanced photocatalytic activity.     

Impact of E6-associated protein on the proliferation and invasion of prostate cancer cells in bone metastasis

Purpose: To understand E6 associated protein (E6-AP)’s influence on prostate cancer cell proliferation and infiltration, thus providing the theoretical basis for developing therapeutic drugs for prostate cancer metastasis to the bone. Methods: Electroporation was performed to introduce linear regulatory plasmid PrevTet-off-in and conjugative plasmid PrevTRE2-flag-E6AP into prostate cancer cell line to establish wild-type E6-AP over-expressing transgenic LNCaP cell line; Western blot assay was adopted to examine expression levels of E6-AP, mammalian target of rapamycin (mTOR), protein kinase B (Akt), and phosphoinositide 3-kinase (PI3K); PI3K inhibitor {"type":"entrez-nucleotide","attrs":{"text":"LY294002","term_id":"1257998346","term_text":"LY294002"}}LY294002 was applied to all the cells and MTT assay was used to measure cell proliferation; Matrigel invasion chamber assay was adopted to detect cancer cell migration and invasion. Results: Stably transfected LNCaP cells that over expressed E6-AP had higher expression levels of PI3K, Akt, and mTOR than control LNCaP cells; MTT assay showed that E6-AP-LNCaP cells were more responsive to the inhibitory effect of {"type":"entrez-nucleotide","attrs":{"text":"LY294002","term_id":"1257998346","term_text":"LY294002"}}LY294002; Matrigel invasion chamber assay revealed increased cell crawling and adhesiveness of E6-AP-LNCaP cells. Conclusion: Stable over-expression of E6-AP increases the proliferation and invasion of LNCaP cells.     

IL-8促进A549细胞迁移过程中对线粒体融合与分裂基因表达的影响

目的:探讨IL-8作用下人肺腺癌A549细胞的迁移率变化以及线粒体融合与分裂基因的变化。方法:实验分为对照组和IL-8作用组。采用细胞划痕实验方法观察IL-8作用下细胞迁移能力的变化;Transwell小室检测细胞的迁移率;ELISA实验检测不同迁移率的细胞内源性IL-8的分泌量;Western blot法检测线粒体外膜蛋白Tom20及线粒体膜间腔蛋白细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)的表达。RT-PCR检测线粒体融合基因Mfn1、Mfn2、OPA1及分裂基因Fis1、Drp1、MTP18的表达;Mito Tracker Red CMXRos染色激光共聚焦显微镜观察细胞中线粒体的形态。结果:肺腺癌A549细胞的迁移率高于SPC-A-1细胞,且内源性IL-8的分泌也高于SPC-A-1细胞。IL-8作用下A549细胞的迁移率增加,并存在时间依赖性。与对照组比较,IL-8作用组的A549细胞线粒体膜间腔蛋白Cyt C蛋白表达降低(P0.05),外膜蛋白Tom20表达增加(P0.05),线粒体外膜融合基因Mfn1及Mfn2表达增加(P0.05),内膜融合基因OPA1表达降低(P0.05),分裂基因Fis1无明显变化(P0.05),Drp1及MTP18增加(P0.05);激光共聚焦显微镜显示IL-8作用下线粒体形态发生变化,出现点状聚集。结论:A549细胞在IL-8作用下迁移率增加,可能与A549细胞线粒体融合与分裂基因变化有关。     

肝细胞癌诊治中的若干问题

随着肝细胞癌（HCC）肿瘤标志物和CT／MRI诊断的应用、手术切除及局部消融等治疗方法的进步,使HCC的5年生存率达到了63．4％。但是由于我国HCC早期诊断水平的不均衡,可进行手术切除的病例仅仅有20％～30％。对于高危人群定期开展血清肿瘤标志物和肝脏超声检查;提高三期动态增强CT和Gd—DTPA增强MRI等影像学诊断水平,同时积极开展多学科会诊,制定个性化治疗方案和减少术后肝功能衰竭发生等若干问题,是提高我国HCC早期诊断水平,提高治疗效果,延长生存期的有效手段。     

氯化三乙基锡对体内大鼠C6胶质瘤增殖抑制作用及病理学改变

目的： 探讨氯化三乙基锡（TETC）对体内大鼠C6胶质瘤的增殖抑制作用及病理学改变。方法：16只Wistar大鼠皮下同种移植C6胶质瘤细胞后,随机分为实验组和对照组,实验组按1 mg·kg^-1 ·d^-1给予腹腔注射TETC,连续给药4　d;对照组腹腔注射等量生理盐水。处理14　d后测量胶质瘤重量,计算增殖率。HE染色及电镜观察TETC作用下大鼠体内C6胶质瘤病理学变化。结果：与对照组比较,TETC实验组大鼠皮下C6胶质瘤重量减轻（P<0.01）,增殖率下降（P<0.01）。HE染色及电镜观察到实验组胶质瘤细胞排列松散、细胞数目减少,可见到核染色质边集的早期凋亡改变。结论：TETC可抑制体内同种移植大鼠皮下C6胶质瘤增殖,细胞凋亡可能参与其中。     

正交试验优选白头翁汤提取工艺

目的:优选白头翁汤提取工艺。方法:以乙醇浓度、乙醇用量、提取次数和提取时间为考察因素,以浸膏得率和白头翁皂苷B_4、秦皮甲素、秦皮乙素、小檗碱的含量为指标,采用L_9(3~1)正交设计优选最佳提取工艺。结果:最佳提取工艺为8倍量60%乙醇,提取3次,每次1.5 h结论:优选的提取工艺稳定、可行。