慢性脑低灌注对大鼠皮层核因子E2相关因子2表达的影响

目的 研究慢性脑低灌注大鼠皮层核因子E2相关因子2(Nrf2)的表达.方法 用随机数字表法将大鼠分为双血管结扎术(2VO)-3周组、2VO-8周组和假手术组,2VO术式制备慢性脑低灌注大鼠模型并在相应时间点取材,采用免疫组化染色、实时定量PCR方法检测大鼠皮层Nrf2的表达,用硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量.结果 免疫组化染色结果显示,与假手术组(38.01%±4.51%)相比,2VO-3周组(50.18%±14.22%)、2VO-8周组(23.15%±7.42%)大鼠皮层Nrf2阳性细胞比例差异均无统计学意义(P＞0.05);与2VO-3周组相比,2VO-8周组大鼠皮层Nrf2阳性细胞比例明显降低,比较差异有统计学意义(P＜0.05).实时定量PCR结果提示,2VO-8周组大鼠皮层Nrf2 mRNA的表达(相对扩增倍数)较2VO-3周组降低,但差异无统计学意义(P＞0.05).生化检测发现,与假手术组[(3.894±0.512)nmol/mg]相比,2VO-8周组大鼠皮层MDA含量[(6.855±1.351)nmol/mg]明显升高,比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 慢性脑低灌注大鼠皮层MDA含量随时间延长而不断增加,除3周时蛋白表达上调外,Nrf2蛋白与mRNA水平均有不同程度减低,提示慢性脑低灌注状态时氧化性损伤持续加重,这可能与内源性抗氧化系统受到抑制有关.

Abstract：

Objective To examine the effect of chronic cerebral hypoperfusion (CCH) on the expression of nuclear factor E2-related factor 2 (Nrf2) in rat cortex. Methods Rats were randomly divided into 2 operated groups and a sham-operated group; rat models of chronic cerebral hypoperfusion in the 2 operated groups were established by occlusion of bilateral common carotid arteries (2VO) for 3 and 8 weeks, respectively. The RNA and protein contents of Nrf2 in the cortex were detected by immunohistochemistry and real-time quantitative PCR, respectively, and the content of malonaldehyde (MDA) was measured by thiobarbituric acid-reactive substance assay. Results A significantly lower percentage of Nrf2-positive cells in the cortex of 2VO-8w group (23.15%±7.42%) was noted as compared with that in the 2VO-3w group (50.18%±14.22%) (P＜0.05); no significant differences on the percentage of Nrf2-positive cells were noted between the sham-operated group (38.01%±4.51%) and the 2 operated groups (P＞0.05). Though the RNA content of Nrf2 in the cortex of 2VO-8w group (0.993 ±0.492)decreased as compared with that in the 2VO-3w group (1.536±0.493)(P＞0.05), no statistical difference was noted between the sham-operated group (1.690± 1.195) and both the 2VO-3w group and the 2VO-8w group (P＞0.05). And the content of MDA in the 2VO-8w group ([6.855±1.351] nmol/mg) was significantly increased as compared with that in the sham-operated group ([3.894±0.512] nmol/mg) (P＜0.05). Conclusion The content of MDA keeps increasing. Additionally, except the protein expression up-regulates 3 weeks after occlusion, the RNA and protein expressions of Nrf2 in rat cortex are down-regulated with the process of CCH, suggesting that oxidative damage become much severe with theprocess of CCH, which may be partly attributed to the dysfunction of endogenous antioxidative mechanisms.     

基于慢性脑低灌注性脑损伤机制的血管性认知功能损害的防治新策略

随着生活水平提高与生活方式的改变,以及老龄人口的增多,痴呆与认知功能损害的发病率有增高的趋势,给患者、家庭及社会造成严重的影响与负担.阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)与血管性痴呆(vascular dementia,VaD)是老年期认知功能损害的两个主要临床类型.目前在临床上针对AD与VaD的有效防治手段十分有限,需要对认知功能损害的发病机制进行更加深入细致的研究,以期找到更有效的措施.近年来大量研究发现,不论是AD还是VaD患者,其影像学都表现出脑组织低灌注[1-3].实验研究也证实慢性脑低灌注(chronic cerebral hypoperfusion)可以导致认知功能损害[3-4].     

中国痴呆与认知障碍诊治指南(六):痴呆患者护理

护理是痴呆诊疗策略中的一个重要内容,尤其是对日常生活能力明显减退的中-重度痴呆患者更为重要.个性化护理可让痴呆患者不同程度的受益.制定完备的痴呆护理的方案,需在痴呆护理原则指导下对患者进行充分地护理评估.写作组根据现有循证研究结果,制定痴呆护理指南,以供临床参考.文献证据级别和推荐强度标准参见本杂志刊载系列中的<中国痴呆与认知障碍指南(一):痴呆诊断流程>一文(见本刊2011年91卷第9期577-581页).     

星瑙灵治疗偏头痛的疗效研究

目的通过观察星瑙灵对偏头痛的头痛程度和压痛、及其伴发症状的改善程度和起效时间,了解星瑙灵治疗偏头痛的疗效。方法偏头痛试验组126例,对照组125例。试验组给予星瑙灵10mg.d-3和银杏叶片4mg.d-3,连服8周。对照组仅予银杏叶片4mg.d-3,连服8周。观察服药前、服药4周和8周的头痛症状(使用MIDAS量表)、压痛、伴发症状的改善程度及其起效时间。结果偏头痛患者治疗组的头痛症状及其伴发症状的改善和起效时间均明显优于对照组,但压痛疗效组间无明显差异。结论星瑙灵对偏头痛有较好的疗效。     

重复经颅磁刺激治疗脑卒中后患者肢体运动功能障碍的系统评价

目的系统评价重复经颅磁刺激对脑卒中患者肢体运动功能障碍的疗效。方法计算机检索Cochrane图书馆、MEDLINE、EMbase、CBM、CNKI和WanFang Data中关于重复经颅磁刺激改善脑卒中后患者肢体运动功能障碍的随机对照试验(RCT),同时追溯纳入文献的参考文献。检索时限均为从建库至2012年1月。由两名研究者按照纳入与排除标准独立进行文献筛选、资料提取和质量评价后,采用RevMan 5.0.2软件进行Meta分析,并使用GRADE系统评价证据质量。结果共纳入11个RCT,376例患者。3个低质量RCT的Meta分析结果显示,与常规康复治疗相比,2～4周重复经颅磁刺激对脑卒中患者肢体运动功能障碍的疗效更好,其差异有统计学意义[WMD=11.02,95%CI(2.56,19.47)],其余8个研究仅作相应的描述性分析。结论重复经颅磁刺激对脑卒中患者的肢体运动功能障碍的治疗效果尚不能确定。因此,在临床上应用重复经颅磁刺激治疗脑卒中患者运动功能障碍时仍需谨慎。     

醛糖还原酶基因C-106T 多态性与原发性高血压易感性及其种族差异

目的：研究中国汉族人群中醛糖还原(AR)C-106T 基因多态性的分布情况,比较其频率分布是否存在种族差异,并探讨该多态性与原发性高血压易感性的相关性。方法：应用聚合酶链反应- 限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)的分析方法,在148位原发性高血压病人和137 位正常受试者中,对AR 基因C-106T 多态性进行基因分型。频数分布的比较采用卡方检验,基因型与高血压的关联程度采用95% 置信区间评估。结果：对照人群中AR C-106T 等位的频率为13.9%(95% CI: 11.2%~16.6%), 远低于日本人群(n=712, 18.4%, P=0.0063), 澳大利亚人群(n=240, 37.9%,P<0.0001)和巴西人群(n=62, 34.7%, P<0.0001)。高血压病例和对照人群中AR-C106T 等位基因的频率分别为15.9%(95% CI: 11.6%~20.0%)和11.7%(95% CI: 7.9%~15.5%),两组间基因型分布差异无统计学意义(P=0.147)。结论：醛糖还原酶AR 基因C-106T 多态性的频率分布具有明显的种族差异,该多态性与中国人群原发性高血压的发病风险不相关。     

促红细胞生成素对慢性脑缺血大鼠认知障碍及海马星形胶质细胞的影响

目的 观察促红细胞生成素干预后慢性脑缺血大鼠的空间学习记忆功能及海马星形胶质细胞的变化.方法 结扎大鼠双侧颈总动脉建立慢性脑缺血模型,治疗组术后给予EP01 000 U/kg腹腔内注射5d.术后第8周时3组大鼠Morris水迷宫测试后断头取脑做免疫组化检测观察CA1区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达.结果 缺血组水迷宫表现同假手术组和EPO治疗组相比有显著差异(P＜0.01).EPO干预能改善慢性脑缺血大鼠的空间学习记忆能力(P＜0.01).缺血组海马CA1区GFAP表达较假手术组相比明显增多,而EPO组海马CA1区GFAP表达同缺血组相比明显降低(P＜0.01).海马CA1区GFAP阳性细胞数与学习记忆能力呈负相关.结论 EPO能显著改善慢性脑缺血大鼠认知障碍,机制可能与减少海马星形胶质细胞增生有关.     

丹红注射液治疗穿支动脉粥样硬化病的临床疗效观察

目的 观察丹红注射液治疗穿支动脉粥样硬化病(Branch Atheromatous Disease)患者的临床疗效以及血高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平变化。方法 选取本院住院诊断为穿支动脉粥样硬化病的患者67例,用随机数字法分为丹红组(34例)与对照组(33例),2组患者均给予抗血小板聚集、抗凝等常规治疗,丹红组在上述治疗的基础上加用丹红注射液静滴,连续治疗14 d,随访3个月,比较治疗前、后美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分; 治疗前、后血hs-CRP、TNF-α水平。结果 与治疗前相比,2组患者治疗后第14 d、治疗后3个月的NIHSS评分均降低,2组患者第7 、14 d血hs-CRP、TNF-α水平均降低,丹红组较对照组变化更加显著,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 在抗血小板聚集、抗凝治疗的基础上加用丹红注射液治疗穿支动脉粥样硬化病患者的临床疗效更好,远期生活质量更高,其机理可能与降低机体血hs-CRP、TNF-α水平,抑制炎症反应有关。     

严重脑白质疏松症相关因素的病例对照研究

目的探讨严重脑白质疏松症的相关因素。方法按照筛选标准连续收集2015年4月-2016年2月武汉大学中南医院神经内科住院患者,通过头部核磁共振评估脑白质疏松症Fazekas评分并收集相关临床资料,并应用非条件Logistic回归来分析严重脑白质疏松症的相关因素。结果共纳入608例患者,包括Fazekas评分为0的对照组415例和Fazekas评分为3~6的病例组193例。多因素Logistic回归结果提示:高龄(G3 vs G1:OR10.81,95%CI 2.76~42.38,P=0.001;G4 vs G1:OR 28.40,95%CI 7.02~114.95,P0.05;G5 vs G1:OR 68.79,95%CI 14.22~332.92,P0.05)、脑动脉粥样硬化(OR 1.98,95%CI 1.07~3.65,P=0.029)和高血压病(OR=4.84,95%CI=2.65~8.85,P0.05)与严重脑白质疏松症之间呈显著正相关。结论高龄、脑动脉粥样硬化和高血压病可能是严重脑白质疏松症的独立危险因素。     

不同鼠龄在慢性间断性缺氧相关认知损害中的作用及机制探讨

目的 阐明不同鼠龄在慢性间断性缺氧相关认知损害中的作用及可能机制。方法 采用改良的IH鼠箱建立慢性IH小鼠模型,利用Morris水迷宫检测青年和老年IH小鼠的认知功能; 通过氧疗的干预对比青年与老年小鼠认知损害及突触可塑性的改善程度,TUNEL法检测小鼠海马CA1区神经元凋亡情况,Western Blotting检测神经突触素、胰岛素信号通路蛋白[蛋白激酶B(Akt)、糖原合成激酶3β(GSK-3β)]的磷酸化表达水平变化。结果 老年小鼠IH组的逃避潜伏期最长,其海马CA1区见明显增多的TUNEL染色阳性细胞,脑细胞凋亡率最高(P<0.01),p-Akt、p-GSK3β表达水平显著降低(P<0.01),目标象限LD滞留时间与p-Akt、p-GSK3β均存在正相关。结论 老年使慢性间断性缺氧C57BL/6小鼠认知损害的易感性增加,可能的机制之一是调节胰岛素信号通路相关蛋白的表达异常。