高钠摄入与骨质疏松的关系

钠是机体必需的营养元素，它参与维持水、电解质平衡、调节神经系统功能，承担着重要的生物学功能。然而高钠摄入也会引起机体的相关疾病，是高血压的诱因之一。随着研究的深入，发现高钠也是诱发骨质疏松的危险因素，但目前未受到足够重视。近期研究表明，在实验研究中，高钠会抑制成骨细胞的分化及其功能；高钠会导致大鼠骨密度和骨强度降低，使骨折发生率增加；在临床上，高钠饮食会增加骨质疏松患病风险，而且无论更年期妇女的骨密度如何，高盐饮食都会增加骨折的危险；但高钠对骨骼的作用研究文献不多，其分子机制尚不明确。本文从实验和临床两个方面，对高钠摄入与骨质疏松的关系作一综述。     

利用微生物气溶胶发生器评估较低压差状态下独立通风笼盒（IVC）内微生物污染情况

目的 利用微生物气溶胶发生器制造微生物感染环境,评估在低压差条件下独立通风笼盒（IVC）内微生物的污染情况.方法 IVC压差分别设定为3 Pa和10 Pa,放置于负压屏障环境内.分别在笼架外四角、中间的笼盒盖上以及对应的笼盒内放置培养皿,细菌培养皿为血平皿,病毒培养皿为内置直径2 cm吸附滤纸的玻璃平皿.将微生物气溶胶发生器放置于距离笼架 2 m处,间隔48 h分别雾化5 ml的1.9×108个/ml的金黄色葡萄球菌和2.4×10-4 TCID50的小鼠脑脊髓炎病毒,雾化停止后30 min、60 min,用培养法及荧光定量PCR法检测预先放置的平皿内病原.结果 大、小鼠IVC在设定为10 Pa及3 Pa时,实际测定压差分别为2.2 Pa和7.8 Pa,经培养法及荧光定量PCR法检测,金黄色葡萄球菌培养数量在30 min检测最低值为222个/平皿,60 min检测均大于500个/平皿,而放置于笼盒内的平皿未见生长;小鼠脑脊髓炎病毒拷贝数在30 min检测最低为1.23×102,60 min最低为1.61 × 104,而放置于笼盒内的平皿未能检出.结论 IVC笼盒在最小压差为2.2 Pa时也能够防止外来病原的进入.     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌系统性感染小鼠模型的制备

目的 采用临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）感染ICR小鼠,建立MRSA系统性感染小鼠模型。方法 采用连续3 d腹腔注射环磷酰胺（100 mg/kg）进行免疫抑制后,将浓度为1×10⁷ cfu/mL的MRSA菌液经尾静脉接种ICR小鼠,通过生存分析、外周血白细胞计数、组织载菌量和病理学检查对模型进行评价。结果 MRSA接种后第2天小鼠开始死亡,14 d内累积死亡率达60%;外周血白细胞总数显著升高,细菌在多个器官定植,载菌量由高到低依次是肾、关节、肺、肝和脑,肾载菌量高达10⁹ CFU/g,关节、肺、肝和脑的载菌量范围在10⁴~10⁹ CFU/g。病理观察显示肾、心脏、肺、肝、脑和关节多器官感染的组织病理学改变。结论 采用环磷酰胺免疫抑制后静脉接种MRSA的方法首次成功建立MRSA系统性感染小鼠模型,该模型可应用于MRSA发病机理及药物筛选等研究领域。     

50余种miRNA在神经胶质瘤中的表达水平及作用靶点

miRNAs是一类内源性的非编码小分子RNA,它能降解靶mRNAs或阻遏其翻译过程。在神经胶质瘤中,有些miRNAs表达水平是上调的,而有些则是下调的;有些miRNAs在肿瘤发生发展过程中起促进作用,而有些则发挥着类似抑癌基因的功能。因此,研究神经胶质瘤中miRNAs的表达概况,既可以为临床上胶质瘤的早期诊断提供辅助依据,还可以提供新的治疗策略。本文将就miRNAs在胶质瘤中表达水平及作用靶点的研究作一综述。     

病毒样颗粒技术的研究进展

病毒样颗粒( Virus-like Particles,VLPs),也称为核心样颗粒( Core-like Particles,CLPs),是由病毒单一或多个结构蛋白自行装配而成的高度结构化的介于15nm～400nm的空心蛋白颗粒[1].形态上,VLPs类似未成熟的病毒粒子,但由于缺乏调节蛋白和感染性核酸而无复制和感染能力,不存在感染宿主的危险性.但VLPs具有天然病毒的类似嗜性,能高密度地展示病毒抗原表位,通过和病毒感染一样的途径呈递给免疫细胞,引发强有力的特异性体液和细胞免疫,有效诱导机体的免疫系统产生免疫应答[2].     

中国大陆柯萨奇病毒A组16型全基因参照序列的初步建立和分析

目的建立中国大陆柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）流行株的全基因参照序列。方法从GenBank中获得CoxA16中国大陆分离株的所有全基因序列和氨基酸序列,用DNAstar/MegAlign软件对所得序列进行多序列比对和进化分析,按照参照序列标准拟定CoxA16的全基因参照序列和氨基酸序列,并与参考序列进行比对分析。结果中国大陆分离的CoxA16毒株全基因序列共8株,分离于2005-2009年,其中2008年5株,广东省5株;通过序列比对获得了大陆CoxA16全基因和氨基酸参照序列;参考毒株间核苷酸序列同源性介于79.0%～98.8%,氨基酸序列同源性为94.3%～99.9%,与参照序列的核苷酸同源性为79.7%～97.0%,氨基酸同源性介于95.1%～99.5%之间,同源性最低的为2008年安徽阜阳的FY18株。结论比对分析了中国大陆CoxA16毒株全序列,成功建立了中国大陆CoxA16全基因和氨基酸参照序列。     

利用微卫星标记对五指山小型猪近交群的遗传分析

目的 分析五指山小型猪近交群的遗传变异及近交程度.方法 利用26个微卫星基因座对五指山小型猪近交群进行了遗传多样性检测,统计了各位点等位基因组成,并计算它们的平均基因纯合率、平均多态信息含量和平均杂合度.结果 近交群26个基因座的共检测到180个等位基因,平均等位基因数为6.92,平均基因纯合率为56.57％,平均多态信息含量为0.6042,平均杂合度为0.4478.结论 五指山小型猪近交群具有较高的纯合度,保持了一定的遗传稳定性.     

实时荧光定量TaqMan-PCR检测小鼠多瘤病毒方法的建立

目的 建立一种快速、特异、敏感的小鼠多瘤病毒 (murine polyomavirus, MPyV)荧光定量 TaqMan PCR检测方法, 用于MPyV核酸的检测。 方法 根据GenBank中小鼠多瘤病毒基因组序列设计了一对特异性引物及TaqMan探针, 扩增长度为69 bp的片段, 通过优化反应体系和反应条件, 对构建的重组质粒标准品进行检测, 并绘制标准曲线, 进行特异性、敏感性和重复性试验。最后用建立的方法对人工感染MPyV的肺脏、脾脏和粪便, 及86 份小鼠临床样本进行检测, 验证在临床应用中的效果。 结果 所建立的检测方法特异性强, 只能在小鼠多瘤病毒DNA中检出荧光信号, 检测灵敏度达到100拷贝, 批内和批间重复性好, 检测结果变异系数(CV)均小于1.13%, 人工感染MPyV小鼠的肺脏、脾脏和粪便均为阳性, 对86份临床样本进行检测, 有3份样本呈阳性(阳性率为3.5%)。 结论 建立的MPyV荧光定量TaqMan-PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好, 适合用于MPyV临床诊断、日常监测和流行病学调查。     

五指山小型猪腹腔粘连模型的建立

目的 建立五指山小型猪的腹腔粘连模型.方法 五指山小型猪术前禁食不禁水过夜,手术前用速眠新Ⅱ、戊巴比妥钠联合麻醉,然后采用浆膜物理损伤、化学损伤、血管结扎、腹膜壁层结扎等多因素方法建立五指山小型猪腹腔粘连模型.结果 术后1d即可观察到五指山小型猪形成了腹腔粘连,粘连程度评分可达2分,粘连面积评分也达到2～3分;术后3d观察发现形成较为严重的粘连,粘连程度和面积评分达到3～4分;腹腔粘连维持时间较长,术后12个月仍可见粘连,粘连程度和面积评分达到2～3分.性别间比较,腹腔粘连的程度及面积差别并不明显.结论 采用多因素方法成功建立了五指山小型猪腹腔粘连模型.     

高磷联合腺嘌呤饮食诱导大鼠高转化型肾性骨病模型 的建立与分析

目的探讨高磷联合腺嘌呤制作大鼠慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)模型诱导的骨矿代谢异常。方法雄性3月龄SD大鼠30只,随机分成三组:基础组(Basal)、对照组(Control)、慢性肾病组(CKD),实验持续6周。所有大鼠先饲养两周以适应环境,Basal在实验开始时处死;Control组给予高磷(1.03%)饮食;CKD组前四周给予腺嘌呤(0.75%)和高磷(1.03%)饮食,后两周给予不含腺嘌呤的高磷(1.03%)饮食。所有动物在处死前进行体内双荧光标记。实验结束时,取左侧胫骨上段(proximal tibia metaphometry,PTM)不脱钙包埋,并采用骨组织形态计量学方法分析。结果与Basal组相比:6周高磷饮食的Control组大鼠骨组织未出现静态参数、生长板参数的变化;而动态参数显示矿化沉积率(MAR)、类骨质体积百分数(%OV/BV)明显增加,矿化延迟时间(MLT)明显减少。与Control组相比:CKD组骨小梁面积百分数(%Tb.Ar)、骨小梁数量(Tb.N)显著降低,骨小梁分离度(Tb.Sp)显著性升高;荧光周长百分率(%L.Pm)、矿化沉积率(MAR)、骨形成率(BRF/TV、BRF/BS、BRF/BV)、类骨质周长百分数(%O.Pm)、类骨质面积百分数(%OV/BV)、每毫米成骨细胞数量(Ob.N)、成骨细胞贴壁周长(%Ob.S.Pm)、每毫米破骨细胞数(Oc.N)、破骨细胞贴壁周长(%Oc.S.Pm)、明显升高,MLT与髙磷对照组比无变化,与Basal组比也减少。生长板参数显示:生长板宽度(G.P.Wi)、纵向生长率(L.G.R)明显减少,但是退行细胞高度(D.C.H)没有改变。结论 CKD模型导致骨的变化表现为明显的骨高转换模型,既促进骨形成,也促进骨吸收;最终骨量减少,说明骨吸收大于骨形成。生长板参数G.P.Wi和L.G.R减少,说明此模型对软骨下成骨有抑制作用。