甘肃省鼠疫耶尔森菌规律成簇间隔短回文重复序列位点多态性分析及地区分布

目的 研究甘肃省鼠疫耶尔森菌（鼠疫菌）的规律成簇的间隔短回文重复序列（CRISPR）位点多态性及地区分布。方法 选取1962－2014年分离的203株鼠疫菌,培养并提取DNA。采用3对CRISPR引物对菌株DNA进行PCR扩增,对PCR产物进行测序。根据菌株CRISPR位点的间区序列种类和排列情况,确定菌株的基因型（类群）,采用BioNumerics 5.10软件进行聚类分析。结果 203株鼠疫菌发现有16种间区序列,包括YPa位点9种、YPb位点4种、YPc位点3种,发现新的间区序列a1''。共发现5个CRISPR基因簇,分别为Cb2、Ca7、Ca7''、CaΔ5''、Ca35''。不同的基因簇呈现区域性特征：Cb2主要分布在会宁县、平川区,Ca7主要分布阿克塞哈萨克族自治县;Ca7''主要分布在夏河县;Ca35''主要分布肃北蒙古族自治县、玉门市;CaΔ5''主要集中在肃南裕固族自治县。结论 CRISPR分子分型方法能够较好地区分甘肃省不同疫源地的菌株,且各基因簇呈现一定的区域性特征。对研究甘肃省鼠疫菌进化规律和人间疫情分子生物学溯源有一定意义。     

护士遭受职业暴露后的应对方式与心理体验

目的了解护士遭受职业暴露后的应对方式和心理体验,以期为制定减轻职业暴露后果的有效应对措施提供临床依据。方法 2013年1-6月,采用目的抽样法选择上海市某3所三级甲等医院10名遭受职业暴露的护士为研究对象。采用质性研究中的现象学研究法,对其进行访谈,并运用Colaizzi法的程序分析访谈资料,提炼出主题。结果护士遭受职业暴露后,大多数研究对象均积极采取暴露后预防(post-exposure prophylaxis,PEP)措施,会出现意外、恐惧和害怕、后悔和沮丧、痛苦、抱怨及职业倦怠感等负性心理体验。结论护理管理者应完善职业暴露上报系统,提高职业暴露后随访检测的依从性,关注职业暴露护士的身心健康,减轻职业暴露的负面影响。     

一期后路手术治疗人类免疫缺陷病毒阳性胸腰椎结核

目的观察一期后路手术治疗人类免疫缺陷病毒(HIV)阳性胸腰椎结核患者的临床疗效。方法 2011年11月—2016年5月,首都医科大学附属北京地坛医院骨科采用一期后路手术治疗的13例HIV阳性胸腰椎结核患者作为观察组,选取同期性别、年龄、手术节段及手术方式相匹配的13例HIV阴性胸腰椎结核患者作为对照组。收集患者血红蛋白、白蛋白、CD4+T淋巴细胞计数、病毒载量、手术节段、手术时间、术中出血量等资料,记录术后并发症和死亡情况,并采用疼痛视觉模拟量表(VAS)评分、神经功能美国脊柱损伤协会(ASIA)分级、红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、后凸Cobb角、后凸矫正率、矫正丢失角度、融合时间等指标评估临床疗效。结果 2组患者血红蛋白、白蛋白、手术时间和术中出血量差异无统计学意义(P0.05)。2组均未出现切口感染、慢性窦道形成、脑脊膜感染等并发症,观察组中出现脑脊液漏1例,神经根刺激症状1例,机会感染1例,伤口延迟愈合4例;对照组出现神经根刺激症状1例,伤口延迟愈合1例;2组并发症发生率差异有统计学意义(P0.05)。观察组中出现术后并发症患者的CD4+T淋巴细胞计数、病毒载量、血红蛋白及白蛋白与未发生术后并发症的患者比较差异有统计学意义(P0.05)。所有患者随访(31.0±12.1)个月,末次随访时未见结核复发,ESR、CRP恢复正常,2组患者植骨融合时间、末次随访VAS评分、神经功能ASIA分级、后凸矫正率、矫正丢失角度的差异无统计学意义(P0.05)。结论通过全面的术前评估、围手术期规范化抗病毒及抗结核治疗、术后积极预防并发症,一期后路手术治疗HIV阳性胸腰椎结核可获得满意的临床疗效。     

Development of a novel ZIKV vaccine comprised of immunodominant CD4+ and CD8+ T cell epitopes identified through comprehensive epitope mapping in Zika virus infected mice

Zika virus (ZIKV) caused over two million human infections in more than 80 countries around 2015–2016. Current vaccines under development are mostly focused on inducing antibodies that despite capable of inhibiting the virus, may have the potential to trigger antibody dependent enhancement (ADE). T cell vaccines that do not induce antibodies targeting viral surface will unlikely cause ADE, but be capable of potentiating the effectiveness of an antibody-inducing vaccine. To develop such a protective T cell vaccine, we first examined the repertoire of antigen-specific T cells in immunocompetent mice that have been transiently infected by ZIKV. Through epitope mapping using 427 overlapping peptides spanning the entire length of ZIKV polyprotein, we discovered 27 immunodominant epitopes scattered throughout the virus on C, E, NS1-NS5 proteins. Among them, 8 were confirmed as CD4+ T cell epitopes, and 16 as CD8+ T cell epitopes, while 3 for both T cell subsets. From these 27 newly identified epitopes, the top 10 epitopes were selected to formulate three T cell vaccines comprised of either CD4+ T cell epitopes, or CD8+ T cell epitopes, or a mixture of both. Immunization with these T cell epitopes induced T cell-mediated cytotoxicity and cytokine production, and conferred varying degrees of protection against ZIKV challenge. Moreover, these new T cell vaccines also improved the protective efficacy of a neutralizing antibody-inducing recombinant E80 protein vaccine. Together, our results provided additional evidence in support of the protective role of ZIKV-specific CD4+ and CD8+ T cells, and laid foundation for future development of T cell vaccines for ZIKV.     

创伤骨科在新型冠状病毒肺炎疫情期间应急流程管理及防控策略专家共识

由于新型冠状病毒肺炎(COVID-19)潜伏期长,早期症状无特异性,以往针对严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)的筛查和防护手段已经不能满足COVID-19疫情控制的需求,必须对COVID-19进行全新的认识并采取特殊的处理流程。由于骨科创伤、出血及疼痛等急性症状的掩盖,COVID-19疫情容易被忽略,使得创伤骨科门急诊亦存在一定的风险和隐患。为了规范创伤骨科门急诊患者的收治,加强创伤骨科医护人员的防护,本文对COVID-19感染的特点及防治原则、疫情期间创伤骨科门急诊的管理、创伤骨科病房和手术室的防控策略、医护人员COVID-19感染防控知识培训进行阐述,为创伤骨科患者的救治以及医护人员的防护提供依据。     

甘肃省鼠疫耶尔森菌多位点可变数目串联重复序列基因分型及地区分布

目的 采用多位点可变数目串联重复序列(MLVA)对甘肃省鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)进行基因分型,探讨甘肃省鼠疫菌地区分布特征。方法 选取1962-2014年间甘肃省各市县(区)不同生态型的鼠疫菌198株,培养并提取基因组DNA。采用14+12对引物进行PCR扩增,产物进行测序,确定每对引物串联重复序列(VNTR)位点的拷贝数。应用BioNumerics 5.10软件对菌株的VNTR位点拷贝数进行聚类分析。结果 甘肃省鼠疫菌分为10个群,群内的菌株依据分离地点继续细化为5-28个分支。10个群分别为:阿拉善黄鼠疫源地菌株聚为1个群;甘南高原疫源地菌株聚成1个群;阿克塞县菌株分成2个群,为当金山群和加尔乌宗村群;肃北县菌株分为3个群,为马场群、党城湾镇群和鱼儿红群;玉门市菌株聚集在肃北县鱼儿红群内;肃南县菌株分为3个群,为大河乡群、马蹄乡群和康乐乡群。结论 MLVA可以清晰地区分甘肃省不同鼠疫疫源地的菌株,将疫源地内菌株继续细分为不同分支,直至精确的分离地点。MLVA分型方法可用于鼠疫菌株的溯源分析。     

干扰素治疗慢性乙肝患者外周血调节性T细胞动态变化和临床意义

目的探讨干扰素抗病毒治疗过程中慢性乙肝患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg）的变化及其临床意义。方法采集干扰素抗病毒治疗的CHB患者46例外周血,在治疗前及治疗后12、24、36、48周,停药后24周时,分别以流式细胞仪检测外周血CD4＋CD25＋Treg比例,实时荧光定量RT-PCR检测血清HBV-DNA载量,酶联免疫吸附法检测HBV标志物,全自动生化分析仪检测ALT水平。结果在46例CHB患者中,完全应答的13例患者CD4＋CD25＋Treg频率在12、24、36、48周及停药后24周时分别为（4.16±0.64）%、（3.98±0.75）%、（3.70±0.55）%、（3.44±0.48）%、（3.07±0.48）%,呈逐步下降趋势,明显低于治疗前（5.73±0.62）%（P〈0.01）。部分应答的18例患者CD4＋CD25＋Treg频率在12、24、36、48周及停药后24周时分别为（4.98±0.62）%（、4.50±0.54）%、（4.10±0.64）%、（4.02±0.64）%（、3.82±0.47）%,呈逐步下降趋势,明显低于治疗前（5.84±0.68）%（P〈0.01）。无应答的15例患者CD4＋CD25＋Treg频率较治疗前无明显变化。完全应答、部分应答组患者Treg频率在12、24、36、48周及停药后24周时与无应答组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。治疗24、48周,停药后24周时,HBeAg阴转率分别为10.8%、26.1%、28.3%,发生HBeAg血清学转换者在治疗12周时CD4＋CD25＋Treg比例明显下降。结论本实验初步认为,干扰素抗病毒治疗过程中及治疗后,有应答的CHB患者的外周血CD4＋CD25＋Treg频率下降。治疗早期CD4＋CD25＋Treg比例下降的患者HBeAg血清学转换率可能更高。