小鼠精原细胞分选方法改良的研究

目的:通过特异抗体结合的磁珠分选,改进小鼠未分化和分化中两类精原细胞分选方法。方法:利用Thy1和c-Kit两个特异抗体结合的磁珠分选技术,分别将出生后7 d雄性小鼠睾丸中的Thy1~+细胞和c-Kit~+细胞分别做为未分化和分化中的精原细胞分选出来,利用免疫荧光技术和流式细胞术,检测两种精原细胞的纯度,利用实时荧光定量PCR检测两种精原细胞中Gfrα1、Plzf、c-kit和sohlh2 mRNA的表达差异来鉴定两种精原细胞,并将Thy1~+细胞进行原代细胞培养。结果:Thy1~+细胞和c-Kit~+细胞的分选纯度分别达到(85.6±8.35)%和(89.40±2.77)%(P0.01)。Thy1~+细胞中Gfrα1和Plzf基因的相对表达量分别可达到c-Kit~+细胞的(9.47±1.29)、(4.40±0.59)倍,而在c-Kit~+细胞中kit和sohlh2基因的相对表达量分别可达到Thy1~+细胞的(7.38±1.07)、(3.88±0.28)倍(P0.01)。原代培养后,可见细胞状态良好,能够顺利的自我增殖,并具有精原干细胞增殖特征。结论:利用Thy1和c-Kit两个特异抗体结合的磁珠分选技术可以有效地将未分化和分化中的精原细胞分选出来,并将未分化的精原细胞进行体外培养。     

单细胞转录组测序技术在人精原干细胞研究中的应用

精原干细胞的自我更新、增殖与分化对于维持精子发生至关重要。然而,调控这一过程的分子机制尚未完全阐明。精原干细胞具有不同细胞亚型,其在精子发生过程中扮演不同角色。单细胞转录组测序技术提供有效的手段,揭示各精原细胞亚型及其转录组水平和生物学功能变化,为精原干细胞的分子机制研究提供新思路。     

超声测量膈肌运动诊断慢性阻塞性肺疾病

目的 探讨M型超声测量膈肌头尾向运动幅度与运动时间变化诊断慢性阻塞性肺疾病（COPD）的价值。方法 运用M型超声观察68例稳定期COPD患者（COPD组）和68名健康志愿者（对照组）膈肌头尾向运动幅度与运动时间,比较两组间平静呼吸与深呼吸时膈肌运动幅度与运动时间,分析膈肌运动幅度与肺功能的相关性,采用ROC曲线判断M型超声诊断COPD的效能。结果 平静呼吸时,COPD组双侧膈肌运动幅度大于对照组;深呼吸时,对照组双侧膈肌运动幅度大于COPD组;平静呼吸和深呼吸时,对照组右侧的膈肌运动时间均大于COPD组（P均<0.05）。深呼吸时,膈肌运动幅度与第1秒用力呼气容积（FEV1）、FEV1/用力肺活量均呈正相关（P均<0.05）。平静呼吸和深呼吸时,膈肌运动幅度诊断COPD的ROC曲线下面积（AUC）为0.823、0.858;膈肌运动时间诊断COPD的AUC分别为0.620、0.678。结论 M型超声可通过判断膈肌运动情况快捷地评估膈肌功能,可辅助诊断COPD。     

HPLC法同时检测肺癌患者血浆中奥希替尼与吉非替尼的药物浓度

摘要：目的:建立HPLC法同时检测肺癌患者血浆中吉非替尼和奥希替尼的血药浓度。方法:色谱柱:Waters X-bridge C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）;流动相:乙腈:5 mmol·L-1磷酸二氢钾（pH 4.0,含0.3%三乙胺）=32∶68（V∶V）;检测波长:251nm;流速:1.0 ml·min-1;柱温:30℃;内标为埃克替尼。血浆样品经乙酸乙酯液液萃取后进样测定。结果:血浆中吉非替尼和奥希替尼分别在0.062 75～2.51μg·ml-1和0.063 25～2.53μg·ml-1内呈良好的线性关系（r>0.999）,方法的回收率为95%～110%,RSD均小于11%,方法的提取回收率均高于85%,所有稳定性考察均符合要求。应用该方法对10例肿瘤科使用奥希替尼和吉非替尼治疗的肺癌患者进行血药浓度监测,结果表明奥希替尼平均谷浓度为（0.206±0.098）μg·ml-1,吉非替尼平均谷浓度为（0.571±0.206）μg·ml-1。结论:该方法简便准确,专属性高,可用于临床上吉非替尼和奥希替尼的治疗药物监测,为促进其临床个体化用药提供技术支撑。     

氧化苦参碱对非小细胞肺癌细胞抗肿瘤作用及机制

目的 研究氧化苦参碱（OM）对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞增殖、迁移及侵袭的影响,并探讨其可能的作用机制。方法 使用细胞增殖与活性检测（CCK-8）实验检测OM在不同浓度（0,1.0,2.0,4.0,8.0,16.0,32.0和64.0 mmol·L^-1）对NSCLC A549和H1299细胞增殖的影响;通过transwell小室法和划痕愈合实验观察不同浓度的OM（8.0,16.0,32.0 mmol·L^-1）对A549和H1299细胞侵袭与迁移能力的影响;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测不同浓度OM（8.0,16.0,32.0 mmol·L^-1）对Notch信号通路相关蛋白的表达水平的影响。结果 OM可有效抑制NSCLC A549和H1299的细胞活力（P<0.05,P<0.01）,且呈浓度依赖性;此外,OM可抑制A549和H1299细胞的迁移与侵袭（P<0.01）,也呈一定的浓度依赖性。高浓度（32.0 mmol·L^-1）OM可以明显抑制Notch信号通路中Notch 1细胞内结构域（NICD）,转录复合蛋白［肿瘤坏死因子-α转化酶（TACE）和无毛重组结合蛋白抑制子（RBPSUH）］及其下游蛋白Hes家族发状分裂相关增强子1（Hes1）的蛋白表达水平。结论 OM可抑制A549和H1299细胞的增殖、迁移和侵袭能力,且可抑制Notch信号通路相关分子的表达。     

7～14岁儿童情绪识别特点初步分析

目的 研究7～14岁儿童情绪识别的特点。方法 选取961名7～14岁的中、小学生为研究对象,采用前期编制的儿童情感图片库分别进行愉悦度、唤醒度和优势度的情绪评分,分析情绪各维度评分间的关系及其在不同性别和年龄受试儿童间的差异。结果 对于正性图片（愉悦度评分>6）,愉悦度与唤醒度和优势度评分呈显著正相关（r=0.56,r=0.40,P<0.01）;对于中性图片（愉悦度评分4～6）,愉悦度与唤醒度评分呈显著负相关（r=-0.70,P<0.01）,与优势度评分呈显著正相关（r=0.69,P<0.01）;对于负性图片（愉悦度评分<4）,唤醒度与优势度评分呈显著负相关（r=-0.95,P<0.01）。不同性别受试者情绪各项维度评分比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。不同年龄受试者唤醒度和优势度评分比较,差异均有统计学意义（P<0.01）;年龄与唤醒度评分呈弱负相关（r=-0.18,P<0.01）,与优势度评分呈弱正相关（r=0.10,P<0.01）。结论 儿童的情绪识别存在性别和年龄的差异,不同性质图片的情绪维度评定亦不相同,需在今后相关研究中考虑这些因素的影响。     

框架式并联骨科手术机器人辅助椎弓根螺钉置入北大核心

背景:课题组与上海大学机器人研究所以及上海禾璞医疗科技有限公司共同开发了框架式并联骨科手术机器人,希望为国产骨科手术机器人的发展做出贡献。目的:通过动物腰椎实验测试框架式并联骨科手术机器人辅助腰椎手术的可行性,验证其操作性能及辅助置钉的准确度。方法:将12具山羊腰椎随机分成2组,实验组(6具,60个钉道)使用手术机器人根据三维CT数据规划钉道,并应用框架式并联骨科手术机器人辅助置入克氏针;对照组(6具,60个钉道)由医生根据二维X射线数据手动置入克氏针。记录钉道规划时间、克氏针置入时间、X射线暴露时间。实验结束后采集两组CT影像,依据改良Gertzbein-Robbins分类标准评估置入克氏针的准确性与优良率。结果与结论:(1)实验组钉道规划时间长于对照组(P <0.001),两组间克氏针置入时间及X射线暴露时间比较差异无显著性意义(P> 0.05);(2)标本CT扫描显示,实验组置钉成功率、优良率分别为100%,96.7%,对照组置钉成功率、优良率分别为98.3%,85.0%,实验组置钉优良率明显高于对照组(P <0.05);(3)结果表明,与术中C臂机透视引导徒手置钉相比,应用框架式并联骨科手术机器人进行辅助椎弓根螺钉置钉的准确率更高,可以有效提高手术安全性。     

上海市2020—2021学年因病缺课监测系统结果分析

目的 了解新冠肺炎流行期间上海市学生因病缺课情况,为完善监测系统在学校传染病防控中的应用提供借鉴和科学依据。方法 用描述性流行病学方法,收集2020—2021学年上海市幼托机构及所有中小学校的因病缺课监测数据并对其进行统计分析。结果 2020—2021学年,上海市幼托机构学生人均因病缺课天数为2.10d,因病缺课率为16.50‰;中小学生人均因病缺课天数为1.98 d,因病缺课率为4.15‰,幼托机构的因病缺课率明显高于中小学生(χ²=80.784,P<0.001)。在各地区的因病缺课率中,郊区居首位,为75.00‰;中心城区最低,为40.21‰,两地差异有统计学意义(χ²=33.690,P<0.001)。学生因病缺课呈现秋冬及春季两个高峰。因病缺课症状构成显示,因病缺课排名前三的症状分别是咳嗽(47.92%)、发热(17.67%)、咽痛(6.18%)。因病缺课疾病构成显示,耳鼻喉疾病(25.23%)是因病缺课的主要原因,传染性疾病占17.12%,传染性疾病顺位前三位是水痘、手足口病、腮腺炎,构成比依次为6.25%、5.31%、2...     

上海市浦东新区HIV-1感染者基因亚型分析

目的了解浦东新区艾滋病病毒1型(HIV-1)感染者的病毒亚型分布特征,为该区制定针对性的艾滋病防治策略和措施提供科学依据。方法采用分层抽样的方法选取浦东新区242例HIV-1感染者的血浆标本,应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增,将PCR产物测序分析,确定基因亚型,并结合现场流行病学调查资料进行分析。结果获得186份pol区基因片段,HIV-1亚型分布显示,CRF01_AE比例最大,为52.69%,其次为CRF07_BC,31.72%,B,5.91%。CRF08_BC未在同性性传播者中发现,在异性性传播者中占5.36%。CRF01_AE与B亚型重组体在25岁以下年龄组和外地户籍感染者中相对较高,分别为12.20%和6.25%。在同性性传播者中发现2例CRF01_AE和CRF07_BC的重组体。结论浦东新区HIV感染者HIV-1型流行株呈现多样化的特点,且分布与年龄、户籍、文化程度以及传播途径相关。     

24MHz高频超声对健康成人不同部位皮肤厚度的检测

目的:利用高频超声检测健康成人全身多个部位皮肤表皮及真皮厚度。方法:招募80名健康成人,采用频率24MHz高频超声检测前额、颧部、面颊、下颌、颈部、前臂和腹部7个部位表皮及真皮厚度。结果:检测的7个部位中表皮最厚的部位为前臂[(0.2061±0.02862)mm],真皮最厚的部位为腹部[(1.5819±0.31710)mm],颈部的表皮[(0.1764±0.02812)mm]和真皮[(0.9616±0.18852)mm]最薄(P<0.05);男性所有检测部位表皮、真皮厚度显著大于女性(P<0.05);无论男性还是女性,<40岁组的前额、颧部和面颊的真皮厚度显著大于≥40岁组(P<0.05);BMI<24组的腹部表皮、颧部真皮、颈部真皮厚度显著小于BMI≥24组(P<0.05)。结论:健康成人不同部位的表皮、真皮厚度有差异;男性皮肤表皮、真皮厚度均大于女性;面部真皮厚度与年龄有关。