基于个体化治疗的肺癌分子分型相关基因芯片的初步研究

目的 本项研究拟通过采用寡核苷酸芯片技术,初步筛选与肺癌分子分型相关基因,并对肺癌的基因分型诊断及肺鳞癌、肺腺癌内亚型的存在进行有益的探讨,为分子分型研究、实现个体化治疗提供一定参考依据.方法 ①共筛选了与肺癌分型、分期相关的基因332个,用NCBI提供的BLAST系统分析确定其特异性序列,利用生物学软件设计成长度为60bp寡核苷酸探针,随后点制成芯片;②分别提取95D细胞、7例肺腺癌组织、8例肺鳞癌组织的总RNA,以总RNA逆转录为cDNA,制作成有荧光标记的探针;③上述制备的杂交荧光探针与芯片进行杂交,获得杂交结果,用ScanarrayLite激光共聚焦扫描仪扫描芯片.所得图像由Genepix 5.1分析软件,分析Cy3和Cy5两种荧光信号的强度和比值,采用聚类方法分别对肺鳞癌和肺腺癌的基因表达谱进行相关性分析.结果 ①芯片杂交技术的可靠性:芯片上的332个oligo,分布在4个区域,每块区域设有阴性对照5个基因;②芯片可重复性:在基因连续横向点3个点的情况下,CV(变异系数)为10％,不同批次95D细胞与芯片杂交之间的重复性为98.2％;③7例肺腺癌组织的共有差异基因29个,与鳞癌组相区别的有7个如DCTN2、Stst2、BRCA2、TGFD等;8例肺鳞癌组织的共有差异基因46个,与腺癌组相区别的有24个,如KRT6A、HMGB2、lumican等;④7例腺癌组织中对332个基因表达的一致性在52％～92％之间,8例腺癌组织中对332个基因表达的一致性在55％～ 97％之间.结论 ①基因芯片技术能够快速高通量的筛选出与肺癌分子分型可能相关的基因;②初步筛选出肺腺癌特征性表达基因如DCTN2、Stst2、CENPM等,肺磷癌特征性表达基因如CCT6A、HMGB2、EEFlA1等,对肺癌组织进行分子分型,提供一定线索,为临床诊断提供更多信息;③在7例肺腺癌组织之间、8例肺鳞癌组织之间,也仍然存在表达差异较大的基因,可能预示肺腺癌、肺鳞癌内存在不同的亚型.     

肺癌患者血清ProGRP、CA125、CYFRA21-1和TPS检测的临床意义

目的：探讨血清肿瘤标志物ProGRP、CA125、CYFRA21-1和TPS在肺癌诊断中的价值。方法：回顾性分析180例患者的临床资料和肿瘤标志物水平,评价肿瘤标志物与肺癌的关系。结果：肺癌组患者ProGRP、CA125、CYFRA21-1和TPS阳性率明显高于肺部良性病变组,三项或四项联合检测敏感性和特异性明显优于单项检测。结论：ProGRP、CA125、CYFRA21-1和TPS中至少三项联合检测可提高肺癌诊断的敏感性和特异性。     

第12例低热-胸痛-纵隔及肺门淋巴结肿大-胸腔积液(II)

本例的病历摘要见本卷第 2 3期第 14 6 9页分析与讨论本例患者具有如下特征 :( 1 )整个病程中 ,患者一般情况较好 ,呈良性经过。 ( 2 )尽管胸部ＣＴ示病变广泛累及双肺、纵隔、胸膜等多个部位 ,但患者除低热外 ,无其他结核中毒症状。旧结核菌素试验阴性 ,血沉正常。( 3 )左侧胸腔积液为淡黄色 ,具有逐渐吸收好转趋势。( 4)病理报告互相矛盾 ,2次胸水涂片报告找到癌细胞 ,且免疫组化癌胚抗原染色示癌细胞阳性 ,但经支气管镜肺活检病理报告为增殖性结核 ,未找到典型干酪样坏死灶和结核杆菌。根据临床诊治程序 ,必须首先确定本例患者胸部病变的…     

血、便、痰和尿标本中SARS冠状病毒核酸的检测和病毒基因谱的初步建立

目的：利用冠状病毒全基因组芯片检测SARS患者血、便、痰和尿标本中的冠状病毒核酸并试图建立其基因谱。方法：提取SARS患者血、便、痰和尿样本中的冠状病毒RNA，经全基因组随机反转录和PCR扩增标记成荧光探针，与SARS病毒全基因组芯片进行杂交，同时用体外培养的病毒RNA和从健康人血液中提取的RNA做对照。结果：SARS患者的4种标本中都能检测到冠状病毒核酸的存在，与整个病毒基因组相比，大都为一些不连续的片断。其中尿、痰和便标本中的基因谱较为相似，另外，发现编码S1蛋白的核酸在一些标本中是连续的，具体为23份血标本中有2份是连续的，13份痰标本中有8份是连续的，51份便标本中有48份是连续的，2份尿标本中都是连续的。结论：冠状病毒全基因组芯片能够检测出SARS患者血、便、痰和尿标本中的冠状病毒核酸，并能建立各来源标本中病毒核酸的基因谱。     

细菌耐药突变选择窗与合理用药

耐药突变选择窗(mutant selection window,MSW)理论是近年来提出的一个遏制抗菌药物耐药的新策略,它从一个全新的角度来看待耐药性的产生,为预防耐药研究提供了新思路。同时MSW理论也对传统的抗感染药物开发策略提出了重要的修正,并为如何更好地通过联合用药来抑制耐药性的产生提供了新的理论依据与指导,已受到国内外学者的高度关注与重视。1MS W理论Baquero[1]在1990年首先提出抗菌药物存在一个最容易选择出耐药突变体的危险浓度区域。1999年Dong等[2]和Zhao等[3]在结核分支杆菌和金黄色葡萄球菌对氟喹诺酮类药物的耐药研究中确定了这…     

肺鳞癌组织中208个肺癌相关基因的表达(英)

目的:病理学上诊断同样为肺鳞癌的患者,其治疗疗效和愈后往往存在一定差异,本研究利用本实验室制作的208个肺癌相关基因芯片,探讨了7例肺鳞癌组织中基因表达的异质性,试图为患者的治疗和预后提供分子依据。方法:提取7例男性肺鳞癌患者(年龄在55～65岁之间)癌组织的总RNA并用LD-PCR标记成探针,然后与含有208个肺癌相关基因的cDNAMicroarray杂交,芯片用ImaGene软件分析和处理数据。结果:7例肺鳞癌组织之间208个肺癌相关基因表达的相似性在60.65%～82.69%之间。结论:本研究首次对肺鳞癌患者不同个体之间基因的表达进行研究并发现存在一定的差异,提示应注意癌症患者的个体化诊断和治疗。     

纤毛轴动力蛋白基因在老年人支气管组织中的表达

人类呼吸系统的结构和功能随着年龄增长会发生衰退性改变，一般在60岁以后更加显著。我们采用半定量的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法分别检测了老年人和非老年人正常支气管组织纤毛轴动力蛋白基因的表达水平，目的是探讨衰老对纤毛运动影响的分子机制。     

气管镜培训模式的转变

气管镜检查和气管镜下介入治疗已经成为呼吸内科专业领域不可缺少的诊断与治疗技术.培训的模式从“师带徒”方式向注重模型与仿真模拟训练的方式转变,并且更加重视基本技术的评价.同时,要重视基础知识尤其是与操作相关的解剖学知识的学习,如支气管树的命名与解剖、纵隔淋巴结的解剖学等.     

机械通气肺损伤的发生机制

机械通气肺损伤(ventilator—induced lung ingjury，VILI)的发生机制目前还不十分清楚，国内外学者已在病理生理学、细胞生物学及分子生物学方面进行了广泛深入的研究，并取得了一定的进展。     

骰骨内异物误诊为骰骨髓炎2例

1 病历摘要 例1：男，16岁。因劳动时左足不慎被竹茬刺伤，伤口局部反复发作红肿、痛疼、流脓，伤口经久不愈43d入院。伤后曾在多家医院求治，均诊断为左骰骨骨髓炎，行清创、引流、抗感染处理，无效，故转入我院。查左足肿胀，足底中部有一窦道口，挤压有脓液溢出。拍片示：左骰骨密度不均，疑诊为左骰骨骨髓炎。入院后在连硬外麻下行清创，术中自左骰骨一破口中取出一竹茬约4．5cm×1．5cm×1cm，行清创缝合，术后半个月痊愈出院。[第一段]