朗格汉斯细胞与宫颈癌及HPV16 E6的关系

目的:研究宫颈组织中朗格汉斯细胞(LC)的数量、形态及分布特点与宫颈癌及人乳头瘤病毒(HPV)16E6的关系.方法:用免疫组织化学技术(SP染色法)对标本的朗格汉斯细胞进行检测,以直接PCR法检测HPV16E6并对E6基因测序.结果:40例宫颈鳞癌,16例宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅱ/Ⅲ级与14例正常宫颈组织中,S-100蛋白阳性LC数量在正常组、CINⅡ/Ⅲ组、宫颈癌组中依次增加(P=0.000),与宫颈癌的临床分期呈负相关(R=-0.552,P=0.000),随宫颈癌组织分化程度降低而减少(P=0.039),与淋巴结转移无关(P=0.245).HPV16 E6在正常对照组、CINⅡ/Ⅲ组和浸润癌组中的阳性率依次上调(P=0.000).HPV16 E6(+)组中LC数量比HPV16E6(一)组少(P=0.011).LC的表达在HPV16 E6原型组和在HPV16 E6 D25E突变株组中无统计学差异(P=0.813).结论:LC功能缺陷与宫颈癌的发生有关.     

LPS对宫颈癌细胞HMGB1主动释放及侵袭转移能力的影响

目的探讨脂多糖（LPS）对宫颈癌细胞HMGB1主动释放及侵袭迁移能力的影响。 方法 高糖培养液培养三种细胞系：宫颈癌HeLa细胞系、宫颈癌C33A细胞系和正常宫颈上皮HUCEC细胞系,加LPS前后分别做Western blot检测HMGB1在宫颈癌细胞系（HeLa 和C33A）及正常宫颈上皮HUCEC细胞系细胞内外的表达情况。LPS刺激前后行小室细胞侵袭实验分析检测宫颈癌细胞株的侵袭迁移能力。 结果 100 ng/ml LPS刺激后,三种细胞内HMGB1总蛋白较刺激前均减少,而上清液HMGB1表达增加（P＜0.05）;HeLa及C33A宫颈癌细胞侵袭迁移能力明显增强（P＜0.05）。 结论LPS能刺激宫颈癌细胞HMGB1主动释放从而增强其侵袭迁移能力。     

医科大学生自学能力培养方法初探

医科学生掌握自学能力对于其职业规划非常重要。通过入学教育、课外讲座、课堂教学、实验授课、临床实习、社会实践和考试等各个环节着手,培养学生的自学能力,为医学生将来参加工作和进一步学习打下良好的基础。     

Proteomic Analysis of Chronic Restraint Stress-Induced Gan (肝)-Stagnancy Syndrome in Rats

Objective: To analyze the proteomic characteristics of Gan (肝))--ssttaaggnnaannccyy syndrome ((GGSSSS)) by seeking the differential protein in blood and tissues of GSS model rats.Methods: GSS model rats were established by chronic restraint stress,keeping rats in restrain chamber for 6 h every day for 21 successive days.Their blood and liver samples were collected at the end of experiment for differential protein detection with methods of isoelectrofocusing and polyacrylamide SDS-PAGE,silver staining,and scanning.The gel images were analyzed with Imagemaster 2D Elite software,and the excavated differential protein spots were identified with matrix assistant laser resolving TOF mass spectrometry,Western blot,ELISA,and RT-PCR,respectively.Results: A method for isolating the protein in blood serum and tissues by two-dimensional gel electrophoresis was established and optimized.Six serum proteins and three liver proteins that differentially expressed were identified.The down-regulated differential proteins in serum of GSS model rats were serum albumin precursor,beta 1 globin,antibody against muscle acetylcholine receptor,Ig lambda-2 C region,and transthyretin (TTR),and those in liver tissue were aryl sulfotransferase,enoyl-CoA hydratase,and TTR.TTR down-regulation was found in both serum and liver.Preliminary biological information analysis showed that these differential proteins involved in immune,neuroendocrine,nutrition,and substance metabolism.Conclusion: Proteomic analysis of differential proteins showed that TTR,aryl sulfotransferase,and enoyl-CoA hydratase expressions are downregulated in the GSS model rats,suggesting that the susceptibility of cancer could be enhanced by chronic stress.     

腹腔热灌注联合全身静脉化疗在卵巢癌治疗中的不良反应评价

目的 评价肿瘤细胞减灭术后行腹腔热灌注联合全身静脉化疗在卵巢癌治疗中的不良反应及其对患者生存期的影响。方法 选取163例卵巢癌患者作为研究对象,所有患者均行肿瘤细胞减灭术并按照治疗方法分为观察组（47例）与对照组（116例）,观察组为术后行腹腔热灌注联合全身静脉化疗,对照组为术后单纯全身静脉化疗。观察两组患者的不良反应发生情况,并对所有患者进行术后随访。 结果 观察组低蛋白血症发生率高于对照组,而白细胞减少、血小板下降、腹胀及腹痛发生率低于对照组（P<0.05）,其余不良反应差异无统计学意义。当患者热灌注次数＞2次时D2聚体升高、低钙血症、血糖升高和恶心呕吐的发生率升高（P<0.05）。两组患者总生存率无显著差异,观察组无贫血或轻度贫血患者生存情况优于重度贫血患者（P<0.05）,其余不良反应的发生对患者整体生存率没有显著影响。结论 卵巢肿瘤细胞减灭术后行腹腔热灌注化疗联合静脉化疗并不会增加不良反应、尤其是严重不良反应的发生,但存在低蛋白血症发生率高的特点。     

肺癌癌因性疲乏中医辨证论治探讨

癌因性疲乏（cancer related fatigue,CRF）是肿瘤患者最常见的临床症状,发生率60%～90%。肺癌是我国近10年来发病和病死率上升最快的肿瘤,因肺癌本身或各种治疗不良反应所导致的CRF严重影响患者的生存质量,CRF的治疗引起了临床医生的高度重视,其中以整体观念、辨证论治思想指导的中医药治疗在临床实践中发挥了重要作用。作者近5年对肺癌内科治疗阶段CRF进行了系统研究,在辨证分型、处方用药、随证加减等方面取得了部分经验,将肺癌CRF分为气血两虚、气阴两虚、脾虚痰湿、气滞血瘀、阴阳俱损5个证型并辨证论治。     

黄连、吴茱萸诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的配比研究

目的探讨黄连、吴茱萸不同配比的水提物(CREF)对人胃癌细胞(SGC-7901)生长和凋亡的影响,找出两药的最佳配比。方法采用MTT比色法观察不同配比的CREF对SGC-7901细胞生长的影响。应用流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞线粒体膜电位的变化。结果 1 mg/ml不同配比的CREF作用SGC-7901细胞24 h和48 h后,对细胞生长有明显抑制作用(P<0.05),且细胞的抑制率与黄连的剂量呈正比。流式细胞仪PI单染亚二倍体峰分析结果显示,以1 mg/mL不同配比的CREF 1∶6、2∶5、3∶4、4∶3、5∶2、6∶1(黄连:吴茱萸)作用于SGC-7901细胞48 h后,细胞凋亡率分别为(8.50±1.59)%、(9.90±1.01)%、(17.15±1.68)%、(21.55±1.97)%、(34.10±1.06)%和(34.40±1.02)%,与对照组(1.69±1.91)%比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。JC-1染色检测结果显示,不同配比的CREF作用于SGC-7901细胞6 h后,绿/红荧光比值显著降低,细胞线粒体膜电位下降。结论 CREF能明显抑制SGC-7901细胞生长并可诱导其凋亡,黄连:吴茱萸最佳配比为6∶1。     

氯喹对卵巢癌细胞增殖、迁移和自噬的影响

目的：探讨氯喹对卵巢癌A2780细胞和SKOV3细胞增殖、迁移和自噬的影响。方法：采用CCK8法检测不同浓度氯喹处理A2780细胞和SKOV3细胞后的增殖能力;克隆形成实验检测氯喹对A2780细胞和SKOV3细胞克隆形成的影响;划痕实验和Transwell实验检测氯喹对A2780细胞和SKOV3细胞的迁移能力的影响;红绿双荧光mRFP-eGFP-LC3自噬双标质粒转染A2780细胞和SKOV3细胞,荧光显微镜观察氯喹处理48 h后自噬小体的形成和自噬流的变化;Western Blot检测氯喹处理A2780细胞和SKOV3细胞48 h后自噬标志蛋白LC3的表达及PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白的表达。结果：氯喹显著抑制A2780细胞和SKOV3细胞增殖能力和迁移能力,另外,氯喹处理能显著抑制卵巢癌细胞的自噬水平。A2780细胞和SKOV3细胞经氯喹处理后LC3Ⅱ、PI3K、p-AKT和mTOR蛋白表达水平显著增高,而AKT、p-mTOR蛋白表达水平显著降低。结论：氯喹能显著抑制A2780细胞和SKOV3细胞增殖和迁移能力,并可能通过激活PI3K/Akt/mTOR通路抑制细胞自噬。     

"肝郁证"方证的代谢组学研究

目的 在肝郁证大鼠模型代谢组学研究基础上,进行逍遥散治疗肝郁证大鼠模型的方证代谢组学研究,探讨逍遥散治疗机制及进一步明确肝郁证的代谢组学特征.方法 24只Wistar大鼠随机分为逍遥散+模型组、逍遥散+空白组、模型组、正常对照组,每组6只.逍遥散+模型组和模型组采用慢性束缚的方法造模,逍遥散+模型组和逍遥散+空白组同时用逍遥散灌胃,第22天采血检测血浆皮质酮,运用1H NMR技术对4组大鼠血清进行代谢组学分析.结果 模型组大鼠第15天,22天体质量增长缓慢,显著低于其它三组(P均<0.01);4组血浆皮质酮存在差异(P<0.001),浓度从高到底依次为模型组、逍遥散+模型组、逍遥散+空白组和正常对照组,组间比较模型组显著高于逍遥散+模型组及其它两组(P<0.01).代谢组学分析表明,4组样本间沿第1主成分(t1)方向有明显的分组差异,其中逍遥散+空白组与正常对照组之间稍有差异,而逍遥散+模型组与正常对照组样本的差别较大,模型组与正常对照组样本的差别最大,且物质的变化大多呈单向改变.结论 逍遥散对肝郁证的治疗作用在代谢物水平并非仅仅简单的上调、下调从而中和模型造成的代谢物变化,而可能是通过对机体的整体调节发挥治疗作用.通过方证整体研究,找出随证候模型和相应方剂治疗后变化一致并趋于正常的物质,可能较好地代表证候的代谢组学特征,从而更适合于中医证候研究.     

白蒺藜血清对酪氨酸酶活性的双向调节作用

目的 :观察白蒺藜高、中、低三种给药剂量大鼠不灭活血清对酪氨酸酶 ( TYE)活性的影响 ,以期指导临床用药。方法 :重复测量设计 ,应用多巴氧化速率法检测不同时间点 5组不同大鼠血清对反应体系中吸光度值的变化 (△ OD)。结果 :白蒺藜低剂量 ( 1 0 g)对 TYE具有抑制作用 ,高剂量 ( 30 g)对 TYE活性有激活作用 ( P<0 .0 5) ;中剂量 ( 2 0 g)和补骨脂素对 TYE的作用倾向于激活作用 ,与空白血清对照无统计学意义。结论 :白蒺藜对酪氨酸酶活性的影响与大鼠给药剂量有关 ,有低浓度抑制 ,高浓度激活的双向调节作用 ,临床应用白蒺藜治疗色素障碍性疾病时 ,除应辨证用药外 ,色素沉着性疾病宜用低浓度 ,色素脱失性疾病宜用较大剂量