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目的 研究异柠檬酸脱氢酶1(isocitrate dehydrogenase 1,IDH1)基因突变对替莫唑胺干预下脑胶质瘤U87细胞凋亡的影响,以期深入了解其生物学特性及其化疗敏感性.方法 通过DNA重组技术构建携带野生IDH1基因(wIDH1)或突变的IDH1基因(mIDH1)的真核表达载体;通过CCK-8检测三种稳定细胞系的增殖能力和细胞活力;利用流式细胞仪技术检测稳转细胞系细胞凋亡率及替莫唑胺干预后细胞凋亡率的变化;构建裸鼠移植瘤模型,替莫唑胺干预,ELISA技术和蛋白质免疫印迹检测细胞相关凋亡蛋白[半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)]的表达情况;测量肿瘤大小为宽和长度,计算肿瘤大小;统计不同处理组肿瘤形成抑制率和总有效率.结果 wIDH1组(100.37±10.24),对照组(102.45±13.57)和mIDH1组(100.63±12.42)之间细胞增殖差异无统计学意义(P>0.05).mIDH1组U87细胞在CCK-8测定中显示出对替莫唑胺的敏感性,mIDH1组(36.84±3.55)细胞增殖和细胞活力较wIDH1组(98.17±8.54)和对照组(73.26±5.37)低(P<0.05);mIDH1组(62.18±3.47)%细胞的凋亡率高于对照组(33.16±6.54)%和wIDH1组(15.36±2.33)%;蛋白质免疫印迹和酶联免疫吸附测定(ELISA)结果显示,三组不同处理中,mIDH1组在Caspase-3,Caspase-9和Bax中的蛋白表达水平最高,Bcl-2的蛋白表达水平最低(P<0.05),wIDH1的异位过表达诱导Bcl-2蛋白表达水平的上调及Caspase-3,Caspase-9和Bax蛋白水平的下调(P<0.05);与其余两组相比,mIDH1组(220.17±12.15)mm3的肿瘤体积最小(P<0.05).wIDH1组(624.36±33.54)mm3与对照组(601.17±36.18)mm3差异无统计学意义(P>0.05);在替莫唑胺治疗组中,mIDH1组的总有效率为(73.15±8.46)%,wIDH1组的总有效率为(22.16±3.96)%.对照组的结果为(42.25±3.17)%.结论 mIDH1通过上调替莫唑胺后胶质瘤细胞Caspase-3、Caspase-9、Bax表达并下调Bcl-2表达提高胶质瘤细胞凋亡率,增强治疗敏感性. 相似文献
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中华皮肤科杂志编辑部:你们好!我是贵刊一名读者,就贵刊1995年第28卷第3期的“淋病与淋球菌L型培养”一文提出自己的看法。细菌L型变异是由于抗生素、抗体、氨基酸等的作用使正常的细菌失去细胞壁,这种L型细菌因无细胞壁保护其抵抗低渗透压而不能在一般培养基中生长,需要在高渗培养基(一般称为L型培养基)中培养。为了研究L型细菌的性状,往往要在体外将正常的细菌人工诱导成L型细菌,通常的方法是在高渗培养基中加抗生素或其它诱变剂[1].但分离体内L型细菌的培养基不应含有抗生素或其它诱变剂,如果加了这些物质就难以区分L型是体内形成的还是培养基中诱变剂诱导形成的。 相似文献
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目的:探究严重创伤患者不良预后的影响因素,并基于潜在类别分析不同早期外周血淋巴细胞水平患者不良预后影响因素的分布特征。方法:选择2020年9月至2022年9月绵阳市中心医院收治的174例严重创伤患者作为研究对象,根据患者入院后24 h内大量输血或死亡情况,分为预后良好组(136例)和预后不良组(38例)。比较两组患者临床资料,多因素Logistic回归分析影响患者不良预后的因素;采用聚类分析和潜在类别分析探讨不同早期外周血淋巴细胞水平患者不良预后影响因素的分布特征。结果:多因素Logistic回归分析结果显示,格拉斯哥昏迷评分(GCS)降低、活化部分凝血活酶时间(APTT)延长、D二聚体(D-D)升高、纤维蛋白原(Fib)降低、纤维蛋白原降解产物(FDP)升高、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)升高、淋巴细胞水平降低是影响患者不良预后的因素(P<0.05);聚类分析结果显示,患者不良预后风险呈明显聚集性,可将患者分为不良预后高风险组(淋巴细胞水平≤0.90×109 L-1,72例)和低风险组(淋巴细胞水平>0.90×109 L-1,102例),高风险组不良预后发生率[33.... 相似文献
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中药调控一氧化氮合酶-一氧化氮系统的研究 总被引:13,自引:9,他引:4
一氧化氮(NO)是生物体细胞内及细胞间的重要信号分子,由不同类型一氧化氮合酶(NOS)催化生成,即内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、神经元型一氧化氮合成酶(nNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)。生理情况下,组织中eNOS和nNOS持续低水平表达维持正常生理功能。病理情况下,eNOS活性下降,NO生成减少,中药可以通过蛋白质磷酸化调节eNOS活性增加NO浓度以及通过抗氧化作用提高NO的生物利用度。而iNOS在生理情况下不表达,炎症状态下,iNOS被激活产生大量NO,导致组织损伤,加剧炎症进程。中药通过NF-κB和p38MAPK下调iNOS减少NO生成治疗炎症。不少活血化瘀药可以下调iNOS起到抗炎作用,为活血化瘀药治疗炎症提供了试验依据。 相似文献
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目的:分别对HBA2:c.2T>C和HBA2:c.2delT两种罕见HBA2基因起始密码子突变复合东南亚型α-地贫的血红蛋白H病病例及其家系成员进行致病基因分析,了解HBA2:c.2T>C和HBA2:c.2delT突变与临床表型的关系。方法:采集家系成员外周血进行血细胞分析及毛细管电泳血红蛋白分析,缺口PCR(Gap-PCR)、反向点杂交法(RDB)检测ɑ-地贫基因常见类型突变,Sanger测序法对HBA1和HBA2基因序列进行分析。结果:检测出两个先证者基因型分别为--SEA/αα复合HBA2:c.2T>C和--SEA/αα复合HBA2:c.2delT,家系成员中检出HBA2:c.2T>C/WT和HBA2:c.2delT/WT,均表现为小细胞低色素性贫血。结论:HBA2:c.2T>C和HBA2:c.2delT为杂合突变时机体可出现静止型α-地贫的表型,当其复合轻型α-地贫时可使机体出现血红蛋白H病的临床表现,本研究为遗传咨询提供依据。 相似文献
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目的 观察不同处理条件对苹果梨果皮中叶绿素稳定性的影响.方法 分别采用浸提法、索氏提取法提取苹果梨果皮叶绿素,并测定氧化剂、还原剂、金属离子、太阳光照、紫外线照射以及储存时间对苹果梨果皮叶绿素稳定性的影响.结果 索氏提取法获得的叶绿素含量为(0.550±0.006)mg/g高于相同条件下浸提法提取含量(0.150±0.... 相似文献