放疗后早期肿瘤组织内99Tcm-rh-Annexin Ⅴ的分布 与bcl-2、bax蛋白表达的相关性研究

目的：评价应用99Tcm-rh-Annexin Ⅴ显像检测单次放疗后早期肿瘤细胞凋亡的可行性，并进一步探讨肿瘤组织内99Tcm-rh-Annexin Ⅴ的分布与凋亡调控蛋白bcl-2、bax表达的相关性。方法：采用直接标记法标记rh-Annexin Ⅴ作为核素凋亡显像示踪剂。将小鼠肝癌细胞（Hca-F25）接种于小鼠右腋下部位；随机分为A（n=9，对照组）、B（n=10，放疗组）两组，B组另分为3个亚组（分别为B1组，n=4；B2组n=3；B3组，n=3）。8d后肿瘤生长至直径约1cm时，B1、B2、B3组分别接受2Gy、5Gy、10Gy不同剂量直线加速器照射；1h后两组同时由鼠尾静脉注入99Tcm-rh-Annexin Ⅴ；4h后行SPECT显像并处死、取材，应用井型闪烁探测器检测荷瘤小鼠肿瘤组织内示踪剂分布，以%ID/g（每克组织百分注射剂量率）表示。采用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡；采用免疫组化SP法检测标本中bcl-2、bax蛋白表达。结果：B组肿瘤组织的%ID/g、TUNEL检测阳性细胞数及bax蛋白表达均明显多于A组（P<0.01）；A组bcl-2蛋白表达及bcl-2/bax明显高于B组（P<0.05）。相关性研究表明，在A、B组中肿瘤组织的%ID/g与TUNEL阳性细胞数均呈明显正相关（r=0.801、0.846），而bcl-2蛋白表达与bax蛋白表达间无明确相关性；A组肿瘤组织内bcl-2、bax蛋白表达与肿瘤组织的%ID/g及TUNEL阳性细胞数均无明确相关性；B组肿瘤组织内，bcl-2蛋白表达与%ID/g及TUNEL阳性细胞数均无明确相关性，bax蛋白表达与%ID/g及TUNEL阳性细胞数均呈明显正相关（r＝0.921、0.723），而bcl-2?蛐bax比值与%ID/g及TUNEL阳性细胞数均呈明显负相关（r＝－0.828、－0.687）。结论：肿瘤组织内99Tcm-rh-Annexin Ⅴ的分布可以反映放疗后早期肿瘤组织细胞凋亡的状况以及凋亡调控蛋白bcl-2、bax表达水平的变化。     

胶体金标记游离细胞表面抗原的电镜样品制备方法

目的 胶体金标记游离细胞表面抗原研究的样品制备方法。方法 对白血病细胞如耐药株K562／ADM细胞和敏感株K562细胞进行离心，前固定，清洗，冰冻切片，后固定，漂洗，脱水，包埋聚合，超薄切片，染色等电镜样品制备过程的研究。结果 在阳性细胞（耐药株K562／ADM细胞）实验组表面发现大量胶体金颗粒，而对照组没有发现胶体金颗粒。阴性细胞（敏感株K562细胞）实验组发现极少量胶体金颗粒，而对照组没有发现胶体金颗粒。结论 白血病细胞表面抗原可以用胶体金来标记。此种方法也适合游离细胞表面特异性抗原的技术定位。     

冷冻保存Epon812包埋剂在电镜样品制备中的应用

[目的]探讨冷冻保存Epon812包埋剂及其再利用的方法。[方法]将电镜样品制备中剩余包埋剂在特定条件下冷冻保存，需要时解冻，进行常规浸透包埋。比较包埋剂冷冻前后超薄切片的切割性能。[结果]用冷冻后复温的包埋剂制备的包埋块，超薄切片时切割性能良好，两种包埋剂制备的样品各项观察指标无明显差异。[结论]冷冻保存Epon812包埋剂及其再利用的方法是可行的。     

透射电子显微镜胶片的干燥度对电镜真空系统的影响

[目的]测定透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)胶片的干燥度和数量对TEM达到工作要求规定的真空度水平所用时间的影响规律.[方法]将不同数量的胶片预先干燥不同时间后,装入TEM中,测定TEM达到工作真空度水平所用的时间.[结果]①TEM达到工作要求规定的真空度水平所用时间与胶片数量成正比;与胶片预先被干燥的时间成反比.②一定数量的胶片在预先被干燥一定时间后,对TEM的真空度水平没有影响.[结论]TEM胶片在用干燥器预先被干燥7 h后,对TEM达到工作要求规定的真空度水平所用时间没有影响.     

微波辐射快速制备电镜标本的实验研究

用常规方法制备电镜标本时 ,标本制备周期过长一直是影响临床应用电镜及时诊断的一个突出问题。近年来 ,一些学者相继利用微波辐射协助电镜标本进行固定、脱水、浸透及聚合 ,明显缩短了标本制备的时间 ,并且不影响组织细胞超微结构[1] 。微波制样技术的原理、方法和步骤与常规制样有较大区别。微波辐射功率、加热时间、标本大小及其在微波炉中的位置等因素 ,对不同的组织标本均有较大影响 ,而且不同厂家及型号的微波炉 ,其功率大小和火力段的功率分配亦不相同。因此 ,目前尚无统一的微波辐射制样方法。我们根据现有实验室条件 ,对微波辐射快速制备电镜标本的方法进行了探讨 ,现报告如下。1　材料与方法1 1　材料小鼠肝、肾及大鼠心肌、骨骼肌组织 ,切成0 5ｍｍ3～ 1ｍｍ3 小块 ,放入 2 5%戊二醛 ( 0 1ｍｏｌ/Ｌ磷酸缓冲液 ,ｐＨ7 4 )中固定。1 2　微波辐射准备采用国产格兰仕ＷＰ - 750型微波炉 ,其输出功率在 12 7 5Ｗ、 2 77 5Ｗ、 30 0Ｗ、 4 95Ｗ、 637 5Ｗ、 750Ｗ之间可调。辐射时在微波炉内放一个盛有 30 0ｍｌ水的烧杯 ,使炉内加热物总量基本一致 ,保持温度基本恒定。...     

放疗同步健择与顺铂化疗对大鼠脊髓损伤的实验研究

目的:探讨放射治疗同步顺铂(DDP)和健择(GEM)化疗对大鼠脊髓损伤的影响.方法:观察正常对照组、单纯放疗组、单纯化疗组(健择组、顺铂+健择组)与放疗联合化疗组(健择联合放疗组、顺铂+健择联合放疗组)的光镜和电镜下脊髓的形态学改变.结果:光镜下,单化组灰质出现白质部分脱髓鞘、变性、炎性细胞浸润,灰质结构疏松和血管增多,排列紊乱.单放组白质内神经纤维排列松散紊乱,部分白质出现细胞肿胀、坏死和炎细胞浸润,部分神经元尼氏体消失,神经胶质细胞固缩.化放组白质出现广泛脱髓鞘、炎细胞浸润、灰质血管增多和神经元固缩等改变.电镜下单化组脊髓髓鞘的髓板增厚、扭曲和皱缩;单放组髓鞘的板层结构松解、扭曲;化放组髓鞘轴索皱缩,髓鞘不规则分层且不规则增生,板层结构不明显.结论:不论健择单药还是健择和顺铂联合化疗均可引起大鼠脊髓损伤,放射治疗同步顺铂和健择化疗较单纯放疗加重对大鼠的脊髓损伤.     

20(R)-人参皂甙Rg3对K562/ADM细胞凋亡诱导的研究

目的 :探讨抗癌药物 2 0 (R) -人参皂甙Rg3(2 0 (R) -GinsenosideRg3)对肿瘤细胞凋亡的诱导。方法 :采用人红白血病耐阿霉素 (adriamycin ,ADM)细胞株K5 6 2 /ADM细胞作为实验模型 ,用ADM作阳性对照。结果 :MTT法细胞毒实验显示 ,Rg3对K5 6 2 /ADM细胞的IC 5 0为 10 4 9± 0 30 μg/ml;流式细胞仪法测定该细胞与浓度为 1 0 μg/ml(无毒剂量 )和 5 0 μg/ml(低毒剂量 )的Rg3共同培养 4 8h的细胞凋亡率分别为 3 39± 0 2 5 %和 9 36± 0 6 1% ;电镜下 ,可见凋亡的K5 6 2 /ADM细胞及凋亡小体。结论 :Rg3具有较强的诱导肿瘤细胞凋亡的能力 ,其诱导强度与其浓度呈正相关 ,对作用时间有依赖性。     

建平县鼠疫自然疫源地宿主及媒介动物数量变化趋势

建平县鼠疫自然疫源地属老哈河黄土丘陵干草原地理景观,自1979年开展鼠疫监测以来,达乌尔黄鼠(以下简称黄鼠)野栖小型鼠及黄鼠体寄生蚤数量均发生了明显的变化,我们统计了1990～2001年的数据如下。     

悬浮细胞扫描电镜快速制样方法

电镜用于某些疾病的病理检查已为广大医务工作者熟知.但电镜样品常规制备的方法时间长,约需要2d,影响及时诊断.我们参考有关文献[1,2],在实践工作中,经过多次实验,总结出电镜诊断的快速制样方法.     

舌质超微结构与微循环

本文创新一项活检方法,用于透射电镜下舌乳头组织细胞及毛细血管内皮细胞的研究。从尸体过渡到活体取材。其方法简便,无剧烈疼痛,24小时创面消失。样品制备后,超薄切片,双重染色,电镜观察。共做健康人10例,白血病患者14例。