南京“5.7” 192Ir源放射事故患者的生物剂量估算

目的 用3种方法估算南京"5.7" ¹⁹²Ir源放射事故患者的生物剂量,为核与辐射事故受照者的临床救治提供剂量资料。方法 受照后第5天采集患者外周血,分别进行外周血淋巴细胞染色体"双着丝粒+环"("dic+r")畸变分析、胞质分裂阻滞微核(CBMN)分析、核质桥(NPB +FHC)分析,并估算生物剂量。用双着丝粒畸变在细胞间的泊松分布情况检验照射的均匀性。结果3种方法估算的该患者受到的一次全身等效剂量分别为"dic+r"畸变分析1.51 Gy (95% CI 1.40~1.61),CBMN 分析1.47 Gy (95% CI 1.36~1.60),NPB+FHC分析1.30 Gy(95% CI 1.00~1.60)。泊松分布检验结果显示,该患者"dic+r"畸变偏离泊松分布,受到了不均匀照射。结论 外周血淋巴细胞染色体"dic+r"畸变分析、CBMN分析、NPB+FHC分析均是有效的生物剂量估算手段,对本例急性局部不均匀照射患者估算的一次全身等效剂量与临床诊断结果相符。     

RNA相关的低剂量辐射响应标志物

电离辐射会对人体造成损伤,根据受照剂量、时间等因素的不同可诱发多种生物效应.目前对于低剂量辐射产生的健康效应仍有争议,筛选对低剂量敏感的辐射响应生物标志物,对于完善低剂量辐射生物效应机制、拓宽低剂量辐射在临床中的应用均具有重要理论意义.综述探讨各核糖核酸(RNA)在低剂量辐射反应中的变化及其对辐射敏感性的调节作用,同时...     

性别和年龄对60Coγ射线照射离体人外周血辐射敏感基因mRNA表达的影响

目的：探讨性别和年龄因素对电离辐射诱导的离体人外周血中辐射敏感基因mRNA表达变化的影响。方法：采集30例健康人离体外周血,以剂量率为1 Gy/min的⁶⁰Co γ射线进行照射,照射剂量分别为0.5、1、2、3、4、6和8 Gy （以0 Gy为阴性对照组）,照射后培养12 h,应用实时荧光定量PCR （qPCR）方法检测18个辐射敏感基因的mRNA表达水平变化,分析性别和年龄因素对这些基因mRNA表达水平的影响。结果：与阴性对照组相比,各剂量γ射线照射组人外周血18个辐射敏感基因的mRNA表达水平均明显增加,并且呈剂量-效应关系（R²=0.63~0.97,P < 0.05）。在相同照射剂量,MDM2、XPC、FDXR、DDB2、ASTN2和TNFSF4 mRNA相对表达水平在不同个体之间存在较大的差异。女性外周血中BAX、TNFRSF10B、ASTN2、TNFSF4、POLH和GADD45A mRNA相对表达水平均高于男性,在0.5~8 Gy照射剂量范围内具有统计学差异（P < 0.05或P < 0.01）。MDM2、FDXR、DDB2和RPS27L mRNA表达水平在不同年龄组间（20~29岁、30~39岁、40~49岁和50~60岁）存在差异（P < 0.05或P < 0.01）。结论：离体人外周血中辐射敏感基因mRNA表达水平的变化存在个体间差异,且与受照者性别和年龄相关。     

甲基化芯片检测电离辐射诱导人外周血淋巴细胞DNA甲基化水平的变化

目的：筛选正常人细胞基因组中电离辐射后甲基化水平发生变化的基因,为在其中寻找新型辐射损伤标志物奠定研究基础。方法：⁶⁰Co γ射线照射人外周血全血,照射剂量为0、0.5和2.0 Gy。利用Illumina 450K芯片检测外周血淋巴细胞基因组DNA甲基化水平的变化,筛选甲基化水平差异的基因,利用GO功能富集分析基因的分子功能和参与的生物学途径。结果：0.5和2.0 Gy γ射线照射下人外周血淋巴细胞基因组DNA甲基化水平显著上调的基因有1 311个,显著下调的基因286个。GO功能富集分析表明,按富集度大小排列,差异基因在生物途径水平上排在首位的是“细胞过程”（富集度=5.86）,在细胞定位水平上排在首位的是“细胞”（富集度=7.48）,在分子功能水平上排在首位的是“结合”（富集度=5.27）。进一步细分后得到差异基因显著富集在与转录调控及转录因子活性相关的功能上,与以往的研究结果认为DNA甲基化参与转录调控和基因表达相一致;甲基化水平差异基因还显著富集在核苷连接（GO：0001882）上,并在其中寻找到与DNA修复相关的基因RAD50、RAD54L和INIP,以及与维持染色体结构稳定相关的基因HIST1H4K、SMC1B。结论：正常人外周血淋巴细胞基因甲基化水平受电离辐射影响,可进一步研究将这些与DNA修复、维持染色体结构稳定相关的基因甲基化水平作为辐射损伤标志物的可行性。     

双核细胞中核质桥和核芽的形成及其影响因素

胞质分裂阻滞法 (cytokinesis-block micronucleus,CBMN)主要用来分析双核细胞中的微核,研究发现该方法还可以分析其他指标,如核质桥和核芽等。目前核质桥 (nucleoplasmic bridge,NPB)及核芽 (nuclear bud,NBD) 分析是细胞组学分析的重要组成部分。NPB和NBD的形成受到许多因素的影响,而且有望成为新的辐射损伤生物标志物。本文将对NPB和NBD的定义、形态特征、形成机制及影响因素等方面进行综述。     

碱性单细胞凝胶电泳技术用于淋巴细胞辐射生物剂量估算初探

目的 初步探索碱性单细胞凝胶电泳（SCGE）方法用于电离辐射生物剂量估算的可行性.方法 不同剂量水平（0～5 Gy）的60Co γ射线照射正常人外周血,用碱性SCGE分析淋巴细胞“彗星”尾长和尾矩,建立各自的剂量-效应曲线.收集某基地放射工作从业人员的外周血进行碱性SCGE分析,并估算受照剂量,与监测物理剂量相比较.结果 淋巴细胞“彗星”尾长和尾矩均随着照射剂量的增加而增加,其剂量-效应曲线均为线性平方模式.以“彗星”尾长为指标的剂量-效应曲线方程为Y=13.59＋20.87X-2.27X^2,以尾矩为指标的曲线方程为Y=8.50＋15.04X-1.43X^2.参照上述方程,以尾矩为指标估算放射工作从业人员的剂量更接近实际受照剂量.结论 用碱性SCGE分析淋巴细胞“彗星”尾矩有希望成为电离辐射生物剂量计.     

共济失调毛细血管扩张基因和Rad3相关基因介导电离辐射诱导的A549细胞早衰作用研究

目的:研究共济失调毛细血管扩张突变(ATM)基因和ATM-Rad3相关基因(ATR)对早衰相关的p53蛋白及p16蛋白的促进作用。方法:通过阐明ATM、ATR在电离辐射诱导的A549细胞早衰中是否发挥作用,对ATM、ATR与A549细胞早衰的关系做进一步验证。将采用ATM、ATR抑制剂处理的A549细胞定义为实验组,将采用二甲基亚砜(DMSO)处理的A549细胞定义为对照组,1 h后进行4 Gy X射线照射,72 h后利用蛋白免疫印迹法检测p62蛋白的表达、β-半乳糖苷酶(β-Galactosidase)染色试剂盒检测细胞早衰的发生。结果:实验组在ATM、ATR抑制剂处理后72 h,A549细胞中p62蛋白的表达水平升高,与对照组相比差异有统计学意义(t=51.68,P<0.001)。ATM、ATR抑制剂处理后72 h,A549细胞早衰水平升高,实验组与对照组相比A549细胞早衰减少,差异有统计学意义(t=6.018,P<0.001);当4 Gy X射线照射实验组与对照组细胞后,实验组细胞发生早衰的数量较对照组明显下降,差异有统计学意义(t=6.030,P<0.001)。结论:抑制ATM、ATR可促进A549细胞p62蛋白的表达,同时抑制细胞早衰的发生;在4 Gy X射线照射A549细胞72 h后,ATM、ATR具有调控X射线诱导的A549早衰的作用。     

放射生物剂量学研究的新进展

放射生物剂量学方法在历次放射事故应急处置中起到非常重要的作用,主要采用非稳定性染色体畸变和微核分析。最近的研究关注快速高通量的生物剂量计的探索,不仅涉及上述方法的自动化,还涉及DNA双链断裂、基因表达等分子生物学剂量计的研究以及代谢组学和血清学指标的筛选。笔者主要就2012-2014年放射生物剂量学研究的新进展进行综述。     

早熟染色体凝聚最长染色体长宽比和最长与最短染色体长度比作为估算辐射剂量指标的研究

目的：用花萼海绵体诱癌素A（calyculin A,CA）诱导早熟染色体凝聚（prematurc chromosome condensation,PCC）,探索将G_2/M-PCC细胞中最长染色体长宽比（L/B）和最长与最短染色体长度比（L/L）用于分析电离辐射损伤和作为估算辐射剂量指标的可行性。方法：分别用0、4、8、12、16和20Gy（剂量率为1Gy/min）的~（60）Coγ射线照射外周血,培养48h后用50nmol/L CA诱导PCC。分析各射线照射剂量组G_2/M-PCC指数,并进一步分析G_2-PCC、M-PCC中L/B和L/L值的变化,建立L/B和L/L值与射线照射剂量之间的剂量-效应曲线。结果：用CA可成功诱导人外周血淋巴细胞产生PCC,G2/M-PCC指数随着照射剂量水平的增高而降低（P〈0.05）。G2-PCC、M-PCC分裂相中的L/B和L/L值在8～20 Gy范围内显著增大（P〈0.05或P〈0.01）,在同样照射剂量水平上L/L值较L/B值增加更快（P〈0.05或P〈0.01）。结论：CA诱导淋巴细胞G2/M-PCC中的L/B和L/L值可用于电离辐射损伤程度的测定和作为估算辐射剂量的指标。     

电离辐射对胃癌细胞增殖和周期的影响

目的：研究电离辐射对体外胃腺癌细胞增殖、凋亡及周期的影响。方法：~（60）Coγ射线单次照射胃腺癌BGC-823细胞,照射剂量分别为0、2、4 Gy,利用MTT和克隆形成率实验检测各剂量组BGC-823的增殖能力;同时利用Annexin-V/PI双染法检测各剂量组BGC-823细胞的凋亡;用PI单染测定各剂量组BGC-823的细胞周期。结果：与0 Gy组相比,2、4Gy 60Coγ射线照射可显著抑制胃腺癌BGC-823细胞的增殖（P〈0.05）,诱导BGC-823细胞在照射后依次出现S期和G2/M期阻滞。4Gy 60Coγ射线照射后48h,凋亡细胞比例显著高于对照组（P〈0.05）。结论：60Coγ射线照射可抑制胃腺癌细胞BGC-823增殖、诱导胃癌细胞出现周期阻滞和细胞凋亡。