携带人胰岛素样生长因子-1重组腺病毒的构建和鉴定

[目的] 采用 Cre-LoxP同源重组系统构建并鉴定携带人胰岛素样生长因子-1( human insulin-like growth factor-1, hIGF-1)目的基因的复制缺陷重组腺病毒,为椎间盘退变的 hIGF-1基因治疗奠定基础.[方法] PCR合成 hIGF-1基因,用 pMD18-T载体克隆 hIGF-1目的基因,酶切、测序并进行 NCBI BLAST相似性在线分析.将 pMD18-T-hIGF-1和 pDNR-1r质粒分别行 EcoRⅠ和 BamHⅠ双酶切, DNA 连接酶连接双酶切产物,转化感受态大肠杆菌 DH5α,合成中间载体 pDNR-hIGF-1,酶切鉴定.Cre-loxP系统介导 pDNR-hIGF-1和 pInt.AV1.SpaT同源重组形成 pInt.AV1.SpaT-hIGF-1重组表达质粒,行 EcoRⅠ酶切鉴定.复苏 293细胞,将 pInt.AV1.SpaT-hIGF-1和 pInt.B.B质粒在 293细胞内进行同源重组成含 hIGF-1基因的复制缺陷重组腺病毒.倒置显微镜观察 293细胞病变样效应( cytopathogenic effect, CPE);透射电镜观察 293细胞中的病毒颗粒;提取细胞裂解液中病毒 DNA, PCR鉴定 hIGF-1目的基因的存在; Western blot 检测 hIGF-1蛋白表达.用半数组织培养感染量 (tissue culture infectious dose 50,TCID50)方法测定重组腺病毒的滴度.[结果]克隆的 hIGF-1目的基因经 NCBI BLAST相似性在线分析证实与 Homo sapiens IGF-1 (GI:19923111)完全相同.pInt.AV1.SpaT-hIGF-1酶切鉴定,出现 5.4 kb和 1 kb两条片段,与理论值完全相符.转染 293细胞 12～ 14 d后,大部分细胞出现肿胀,脱落等细胞病变样效应.PCR鉴定细胞裂解液中含有 hIGF-1目的基因.Western blot 证实重组腺病毒表达 hIGF-1蛋白.第 2代腺病毒的滴度为 80× 106 PFU/mL.[结论]成功构建出含有 hIGF-1目的基因的复制缺陷重组腺病毒.     

贲门癌手术径路与并发症的关系

目的　探讨贲门癌的手术径路与并发症的关系。方法　总结 4 6 9例贲门癌切除患者左进胸切口与胸腹联合切口常见并发症的差异。结果　 2种切口的手术切除率分别为 74 .93%、84 .98% (P <0 .0 1) ;术中脾损伤、脾切除发生率分别为 3.2 5 %、0 .93% (P <0 .0 5 ) ;肺部感染、吻合口漏、切口感染发生率相似 (P >0 .0 5 )。结论　贲门癌切除术胸腹联合切口切除率高 ,不增加并发症的发生。     

广西血竭化学成分的研究

目的对广西血竭Dracaena cochinchinensis脂溶性成分进行研究。方法采用硅胶柱层色谱，制备TLC，重结晶进行分离纯化，运用现代波谱技术鉴定化合物的结构。结果从广西血竭中分离并鉴定了6个脂溶性化合物，分别为：1，2，4，5-四氯-3，6-二甲氧基苯(I)、胆甾-4α-甲基-7-烯-3β醇(Ⅱ)、胆甾-4α-甲基-7-烯-3-酮(Ⅲ)、正二十六烷(Ⅳ)、胆甾-7-烯-3β醇(V)、胆甾-7-烯-3-酮(Ⅵ)。结论化合物Ⅳ～Ⅵ为首次从该植物中得到。     

MICROVASCULAR DECOMPRESSION FOR HEMIFACIAL SPASM - TECHNICAL NOTES AND COMPLICATION PREVENTION : EXPERIENCE OF 338 CASES

Objective To summarize our clinical experience of microvascular decompression (MVD)for medically intractable hemifacial spasm(HFS) patients with emphasis on microsurgical manipulation and to improve cure rate and avoid surgical complications. Methods Three hundred and thirty-eight patients with HFS underwent MVD under general anesthesia . With the help of "zero retraction" technique, prosthesis can be properly inserted between offending vessel loop and affected facial nerve REZ in a "rolling ball" fashion under operative microscope. Results Surgical intervention achieved high relief rate of 91 .4% and no major complications, with low recurrence rate of only 3.2% after averaging more than two years' follow-up ( M = 32 months). Conclusion It is possible to approach to the facial nerve REZ with "zero retraction", which is fundamentally important to clear from cranial nerve and cerebellar injury. Skilled microsurgical technique along with correct recognition and mobilization of offending vessels are a must     

胃癌动态增强MRI表现与肿瘤血管形成关系的研究

目的　探讨胃癌动态增强MRI强化表现与肿瘤血管形成的关系。方法　对 30例胃癌组织切片进行CD34和血管内皮生长因子 (VEGF)免疫组织化学染色。分析癌组织微血管密度 (MVD)和癌细胞VEGF的表达情况及其与临床病理特征的关系。并将动态增强MRI强化表现和扫描所获参数 (最大强化率 ,CERmax)与MVD、VEGF进行相关性研究。结果　 30例胃癌组织的MVD平均值为(4 2 95± 14 79)个 /视野 ,范围为 13 0 0～ 6 8 2 5个 /视野。VEGF低表达 30 % (9/ 30 ) ,高表达 70 % (2 1/30 )。MVD和VEGF表达与有无淋巴结转移密切相关 (P <0 0 5 ) ,与组织分化程度、有无浆膜层受侵无关 (P >0 0 5 )。MVD与胃癌TNM各分期密切相关 (P <0 0 5 )。TNM分期中Ⅰ期与Ⅳ期间VEGF表达差异有显著意义 (P <0 0 5 )。VEGF高表达者MVD值 [(4 7 30± 14 16 )个 /视野 ]与VEGF低表达者MVD值 [(32 81± 11 2 5 )个 /视野 ]间差异有显著意义 (t=- 2 716 ,P =0 0 11)。CERmax与MVD呈正相关 (r=0 5 5 6 ,P =0 0 0 14 )。微血管的分布及形态与胃癌动态增强表现的不规则强化及分层强化类型存在一致性。CERmax与VEGF蛋白表达无明显相关性 (t=- 0 84 7,P =0 4 0 4 )。结论　胃癌动态增强MRI表现反映了胃癌微血管的分布和形态。动态增强MRI可     

端粒酶活性检测在乳腺癌诊断中的意义

[目的 ]探讨细针穿刺乳腺肿瘤组织的端粒酶活性检测在乳腺癌诊断中的意义 .[方法 ]用聚合酶链反应 酶联免疫吸附测定法检测 79例术前乳腺肿瘤细针穿刺活检标本和大体标本的端粒酶活性 ,并与病理诊断进行比较 .[结果 ]乳腺癌 6 5例中穿刺组织端粒酶呈阳性的为 5 7例 ,阳性率为 88% ;大体组织端粒酶呈阳性的为 5 4例 ,阳性率为 83% .淋巴结转移者端粒酶活性高于无淋巴结转移者 .乳腺良性疾病 14例中端粒酶呈阳性的为 2例 ,阳性率为 14 % .[结论 ]术前乳腺肿瘤穿刺组织的端粒酶活性检测有利于乳腺肿瘤的早期诊断及鉴别诊断 .     

亮菌多糖抗小鼠辐射损伤作用的研究

目的观察亮菌多糖（ATS）对辐射损伤的保护作用。方法将小鼠随机分为空白对照组（0．9％生理盐水）、辐射模型组、阳性对照组（参芪片）和ATS多糖不同剂量实验组（80、160和320mg／kg）。以γ射线照射小鼠全身，引起辐射损伤后观察各组小鼠30d存活率、白细胞（WBC）数、精子畸变率、骨髓微核（MN）细胞数、骨髓DNA含量和免疫器官重量及血清和肝组织中的超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量等。结果ATS能提高受照小鼠存活率（P〈0．05）及SOD活性（P〈0．05）、升高WBC数（P〈0．05）和骨髓DNA含量（P〈0．05），抑制小鼠精子畸变率（P〈0．05）和骨髓MN细胞数的增加（P〈0．05），并使受照小鼠胸腺、脾脏重量回升（P〈0．05），还能增加内源性脾结节数（P〈0．05），降低MDA含量。结论ATS对γ射线所致小鼠辐射损伤有较好的保护作用。     

96例急性迟缓性麻痹病例监测分析

目的：观察急性迟缓性麻痹病例（AFP）在我市的发病状况。方法：对96例急性迟缓性麻痹病人采集48h内粪便进行病毒分离，并进行个案调查与随访。结果：96例中，7例分布于城镇，89例分布于农村；格林-巴利综合征55例（57.3%）-横断性脊髓炎16例（16.6%）、神经炎11例（11.5%）、重症肌无力12例（12.5%）、与疫苗相关的脊髓灰质炎AFP病例（VAPP）2例（2.08%）。结论：防疫部门与各级医院加强合作和直接管理能及时了解发病状况。市髓灰质炎减毒疫苗（OPV）免疫工作尚存不足，宣讲教育应进一步加强。     

氧化苦参碱对哮喘小鼠抗炎作用的研究

目的：探讨氧化苦参碱治疗哮喘的抗炎作用机制及其对白细胞介素－4（IL－4mRNA)表达的影响。方法：建立小鼠哮喘模型，观察氧化苦参碱对哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液中炎性细胞、肺组织病理的改变；应用半定量反转录－聚合酶链反应检测肺组织IL－4mRNA表达的变化。结果：氧化苦参碱可显著减轻哮喘小鼠气道及肺组织中哮酸性细胞的浸润，显著抑制哮喘小鼠肺组织中IL－4mRNA的表达水平。结论：氧化苦参碱对哮喘小鼠有明显的抗气道变应性炎症及抑制IL－4mRNA表达的作用。     

航渡营养口粮抗疲劳实验研究

目的：评价航渡营养口粮抗疲劳功能。方法：50只小鼠随机分成氨基酸低，中，高剂量组，混合饲料组和对照组，进行运动耐力测定，血清尿素氮浓度测定和血糖测定。结果：给予氨基酸的小鼠，与对照组比较负重游泳时间明显延长（P＜0．05），小鼠负重游泳至力竭时血清尿素氮浓度明显降低（P＜0．01），氨基酸高剂量组和混合饲料组小鼠血糖水平高于对照组。结论：航渡营养口粮能有效地提高小鼠机体运动耐力，维持血糖水平，降低血清尿素氮浓度，抗疲劳。