阿尔茨海默病患者的汉字阅读能力研究

目的:研究汉语文化背景下的阿尔茨海默病患者的阅读能力和失读的特点。方法:正常老人、轻、中、重度AD各20名,性别、年龄和教育程度匹配。4组受试简明精神状态量表(MMSE)总分分别为27.7±2.2分、21.2±2.2分、15.2±2.3分和6.9±2.6分。汉字阅读包括22个记号字、17个音符字和17个义符字。结果:不管是记号字、音符字还是义符字,在正常老人组、轻度AD组和中度AD组之间两两比较没有显著差异(P>0.05),音符字和义符字在中度和重度AD组之间比较有显著差异(P<0.01)。“视觉性错读”在四组之间没有显著差异(P>0.05),表层失读出现在AD早期,并在AD晚期明显加重,好发于声符与其本字的发音不一致的义符字,不能用左侧忽视来解释。深层失读仅出现在AD晚期。组词现象是汉字深层失读的主要类型。结论:可以通过汉字阅读能力的评估判断早期痴呆被试的病前智力。汉字失读的类型与西方语言不同。     

RT-PCR-ELISA方法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度的初步研究

目的 应用核酸扩增产物测定的固相杂交酶联显色法(RT-PCR-ELISA)检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度。方法 应用RT-PCR-ELISA。将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的疫苗病毒基因产物。与微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交，通过辣根过氧化物酶标记的链亲和素进行酶联显色。读取吸光度(A值)。判断结果。应用此法检测了11批甲肝活疫苗滴度。并与常规细胞培养法(CCID50)比较。结果 本方法与细胞培养法的敏感性相仿，具有简便、快速、特异的优点。结论 RTPCR-ELISA法有望代替常规细胞培养法应用于甲肝减毒活疫苗病毒滴度的检测。     

向量诊断心肌缺血的基础研究

目的：通过心电向量图（VCG）与心电图（ECG）两种方法描记犬心肌缺血，比较VCG和ECG的技术特征与图形特征，寻找心脏功能在病理状态下的准确表达途径，这对心肌梗塞的早发现、早治疗很有意义。方法：将31只正常犬的冠状动脉左前降支结扎，建立犬的心肌缺血模型。结扎60min、再灌注120min通过VCG、ECG两种方法记录每一时段的信息特征，以比较它们诊断心肌缺血异常项目的检出率。结果：心电向量图不管是结扎60min还是再灌注120min。对心肌缺血异常项目的检出率均明显地高于心电图。结论：对心肌缺血的诊断VCG优于ECG。     

骨间前血管腕背支骨膜瓣移位修复骨不连的临床应用

报道用骨间前血管腕背支骨膜瓣移位修复骨不连、骨坏死的手术方法及疗效。方法：根据应用解剖学研究，设计以骨间前动脉腕背支为蒂的骨膜瓣，顺行移位修复尺、桡骨骨不连，逆行移位修复手舟骨、月骨不连与骨坏死。结果：临床应用19例，随访1年，在术后3～6月均达到骨愈合和骨坏死修复，关节活动功能明显改善。结论：骨间前血管腕背支为蒂的骨膜瓣移位术适合邻近骨不连、骨坏死修复。     

重组质粒pcDNA3.1IL-2/Fc对HBV preS2S DNA疫苗免疫作用的影响

目的 探讨IL-2/Fc融合表达后对HBVpreS2S基因疫苗诱导免疫反应的佐剂效应.方法 采用HBV preS2S DNA疫苗作为基础免疫,重组质粒pcDNA3.1IL-2/Fc作为佐剂加强免疫BALB/c小鼠,采用0、2、4周的方案接种,检测各次接种后抗体水平.初次免疫后7周,测定免疫脾细胞的杀伤活性、增殖活性和细胞因子的分泌水平.结果 pcDNA3.1IL-2/Fc作为佐剂在HBV preS2S注射3 d后免疫组小鼠抗体滴度、免疫脾细胞的杀伤活性和增殖活性、TH1型细胞因子的分泌水平,均比各对照组明显增强.结论 IL-2/Fc是有效的HBV preS2S DNA疫苗佐剂之一.     

cTnI( 28-110aa)-linker-TnC融合蛋白基因的构建、表达及鉴定

目的构建及表达人cTnI（28-110aa）-linker-TnC融合蛋白。方法应用PCR技术从人心脏cDNA文库中扩增出cTnI（28-110aa）和TnC基因，通过引物设计在两者之间加上linker序列即编码19个中性氨基酸残基TS-（G4S）3-AC的序列，克隆PCR产物，并构建成pET28a-cTnI（28-110aa）-linker-TnC表达质粒，转化人大肠杆菌表达菌株BL21（DE3），用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导目的蛋白的表达，NTA树脂亲和层析纯化后检测其纯度和免疫反应性。结果成功构建了cTnI（28-110aa）-linker-TnC融合蛋白的基因，并在大肠杆菌中实现可溶性高表达，在摇瓶中的表达量为20mg／L．经一步NTA树脂亲和层析纯化，获得条带单一的目的蛋白，采用进口全自动免疫检测系统鉴定证实．目的蛋白有较高的免疫反应性。结论采用原核表达方法获得了具有高纯度和高免疫反应活性的cTnI（28-110aa）-linker-TnC融合蛋白。     

Comparison of the unlabeled and labeled pre-mRNA splicing assays in vitro

Pre-mRNA splicing is a fundamental process required for the expression of most metazoan genes. It is carried out by the spliceosome that catalyzes the removal of non-coding intron sequences to ligate exons into mature mRNA prior to transport and translation. The purpose of our study is to explore whether the in vitro unlabeled pre-mRNA splicing assay could be performed as an alternative method of splicing reaction other than the radiolabeled one. Two different splicing methods in vitro , P labeled and unlabeled pre-mRNA as the substrates in the reaction, were investigated. The radiolabeled products were visualized by autoradiography while the unlabeled products were observed by Ethidium Bromide (EB) staining. As a result, although there are more unspecific bands in the EB staining assay than 32P labeled one, the RNA products of in vitro splicing could be observed clearly. This suggests that the unlabeled pre-mRNA splicing assay can be an optional substitution for the isotope-labeled assay.     

急性高原病患者支气管肺泡灌洗前后肺功能及血气的改变

目的:探讨急性高原反应(HAAR)及高原肺水肿(HAPE)的发病机理。方法:对10例HAAR患者及6例HAPE患者灌洗前和灌洗后进行肺功能和动脉血气检测, 并与10例高原健康者进行对比。结果:HAAR患者及HAPE患者灌洗前动脉血氧分压明显低于对照组, HAAR同HAPE均存在弥散功能障碍;HAPE肺弥散功能(DLCO%)由灌洗前的(76.01±6.29)%, 上升到灌洗后的(103.31±9.23)%;气体转化因子(DLCO/VA%)由灌洗前的(150.30±15.20)%, 上升到灌洗后的(176.04±16.10)%;动脉血氧分压(PaO₂)由(31.73±3.01)mmHg上升到(45.31±3.56)mmHg。而HAAR及对照组灌洗后上述指标差异不显著。结论:HAPE患者肺泡内大量的液体渗出是HAPE病情恶化的主要原因之一。HAAR属HAPE发展的初级阶段, 存在着间质性肺水肿。     

重组人bFGF的原核表达及其高效价抗血清的制备

目的 以重组人碱性成纤维生长因子为免疫原，制备高效价抗hbFGF抗血清。方法通过PCR方法改造5’编码区的12个密码子，构建hbFGF’原核表达载体并在大肠杆菌(E．coli)中表达，以纯化的hbFGF、免疫新西兰兔，制备高效价抗血清，用于重组hbFGF、的免疫印迹分析。结果经过改造的hbFGF基因在E．coli中获得较高水平表达。从可溶性部分纯化得到纯度95％以上的重组hbFGF，以该重组蛋白免疫兔子，在二次加强后以间接ELISA检测抗血清效价可达1：512000。免疫印迹分析显示该抗血清与E．coli中表达的重组hbFGF、和标准hbFGF、均有特异性反应，但与某些细菌蛋白存在弱交叉反应，经E．coli菌体蛋白吸附的抗血清，与菌体蛋白的弱交叉反应消失。结论以纯化的重组hbFGF为免疫原制备了高效价的特异性抗血清，经菌体蛋白吸附可消除存在的交叉反应性。     

紫外线照射对腺病毒气溶胶活力和粒级分布的影响

目的 研究紫外线照射对腺病毒气溶胶活力和粒级分布的影响.方法 在2000L的腔室中通过TK-3微生物气溶胶发生器将绿色荧光蛋白(GFP)标记的腺病毒形成气溶胶,暴露在预先设定波长的紫外线下,用多级撞击式空气微生物采样器进行采样.对采样样品进行实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测基因组拷贝数.通过在荧光显微镜下计数带绿色荧光的PK15细胞数可直观检测病毒的感染力及活力.结果 带有绿色荧光的PK15细胞数及FQ-PCR检测结果均提示所采集的病毒气溶胶主要分布在第6级.波长为254 nm的紫外线照射5 min时,在显微镜下观察到的荧光数明显减少.波长为254 nm紫外线照射30 min时,6个级别的细胞内均未见绿色荧光.波为365 nm紫外线照射30 min时,绿色荧光数仍较多.波长为254 nm的紫外线照射30 min时没有观察到有绿色荧光的细胞,但是FQ-PCR结果提示病毒基因组拷贝数仍较高.结论 波长为254 nm的紫外线比365 nm的紫外线照射灭活腺病毒气溶胶的效果更显著.两种波长的紫外线照射对腺病毒气溶胶的粒级分布没有显著影响.病毒基因组的存在并不能代表病毒有感染力.