肺癌患者噬菌体抗体库的构建及抗肺癌单抗的筛选

目的　探索从人体肿瘤局部引流淋巴结扩增免疫球蛋白基因构建噬菌体抗体库及从中筛选抗肿瘤单抗的可行性。方法　从肺癌患者肺门淋巴结提取总RNA ,经逆转录 聚合酶链反应扩增免疫球蛋白重链Fd段和κ链基因 ,以pcomb3H为载体 ,构建噬菌体抗体库 ,以 2株肺癌细胞对噬菌体抗体库进行 6轮亲和筛选 ,再以人成纤维细胞进行 2轮吸附 ,以筛选出抗肺癌细胞抗体。以细胞ELISA法初步鉴定抗体活性。结果　构建成噬菌体抗体库 ,库容为 7.5× 10 7个克隆 ,κ链和Fd段基因与载体DNA的重组率分别为 10 0 % (10 / 10 )和 90 % (9/ 10 )。通过亲和筛选和吸附从中获得了能与肺癌细胞结合的人单抗。结论　从人体肿瘤局部引流淋巴结扩增免疫球蛋白基因构建噬菌体抗体库并从中筛选抗肿瘤单抗是可行的 ,以肿瘤细胞作抗原从抗体库中筛选抗肿瘤抗体是可取的。     

微量滤膜法测定哮喘息者血清中性粒细胞趋化因子活性

血清中性粒细胞趋化因子(NCF)活性是哮喘细胞介质释放的指标之一。目前一般采用Boyden测定白细胞趋化活性(NCA)的滤膜法来测定。国内也有用Boyden法测定NCA的报道。但该法所需白细胞悬液量大,不易推广应用。Falk等在Boyden法基础上设计了48孔趋化板代替Boyden小室,使滤膜法微量化成为一种简便、经济的方法,本文介绍我们设计的30孔趋化板微量滤膜法测定CNF活性。     

ACV治疗转TK基因人肺腺癌细胞A549裸鼠皮下成瘤的实验研究

目的 观察活体内转ＴＫ基因肺腺癌细胞对ＡＣＶ（无环鸟苷）的敏感性。方法 转ＴＫ基因肺腺癌细胞Ａ５４９－ＴＫ、亲代细胞Ａ５４９分别接种于裸鼠腹部皮下左右侧成瘤后,给予腹腔注射ＡＣＶ治疗２周,测量治疗前后肿瘤大小,并做病理观察。结果 Ａ５４９－ＴＫ细胞接种的肿瘤治疗前后体积增大不明显（Ｐ〉０．０５）;Ａ５４９细胞接种的肿瘤治疗后体积明显大于治疗前,光镜发现Ａ５４９－ＴＫ细胞接种的肿瘤有局部坏死,胞核裂     

呼吸系统疾病酸碱失衡的基础研究与临床应用

本研究历时18年,分为应用基础研究和临床应用两部分,且两部分紧密结合。采用同步监测红细胞内外血气、电解质,分离、测定膜带3蛋白结构、含量以及阴离于转运功能等先进技术,运用了618只实验动物,3万余例次临床病人资料。其主要研究内容及创新如下:     

氟美松对嗜酸粒细胞凋亡的作用及其机制

目的　探讨氟美松对体外嗜酸粒细胞凋亡的作用及其机制。方法　在不同浓度白细胞介素 (IL) 5和氟美松的条件下体外培养嗜酸粒细胞 ,锥虫蓝拒染法和原位凋亡检测法观察嗜酸粒细胞凋亡的变化及嗜酸粒细胞凋亡抑制基因bcl 2表达的变化。结果　IL 5显著抑制嗜酸粒细胞凋亡 ,氟美松呈浓度和时间依赖性抑制IL 5介导的嗜酸粒细胞存活 ,10 -6mol/L氟美松显著抑制 1× 10 4 U/LIL 5介导的嗜酸粒细胞存活 ,培养 3d嗜酸粒细胞存活率为 (7± 3) % (P <0 .0 1) ,抑制率达 (90± 4) %。IL 5使嗜酸粒细胞bcl 2表达增强 ,氟美松对此具有抑制作用。但高浓度的IL 5 (1× 10 6U/L)可抑制氟美松的凋亡诱导作用。结论　氟美松具有诱导嗜酸粒细胞凋亡的作用 ,其机制可能与抑制嗜酸粒细胞bcl 2表达有关。     

呼吸系统疾病酸碱失衡的基础研究与临床应用

本研究历时18年,分为应用基础研究和临床应用两部分,且两部分紧密结合。采用同步监测红细胞内外血气、电解质、分离、测定膜带3蛋白结构、含量以及阴离子转运功能等先进技术,运用了618只实验动物,3万余例次临床病人资料。其主要研究内容及创新如下: