对中暑患者行探索B型脑钠肽检测以评估病情轻重的临床研究

目的探讨B型脑钠肽(BNP)对中暑患者病情评估作用。方法选取2016年5月—2017年8月间于广州市白云区第三人民医院收治的60例中暑患者为研究对象,根据病情程度分为轻症中暑组30例及重症中暑组30例,在发病第1 d、3d、7 d时抽取血浆检测BNP及肌酸激酶同工酶(CK-MB)。另选取同期健康体检者25例做对照。结果轻症中暑组与重症中暑组在发病第1 d、第3 d、第7 d时的BNP水平均较健康体检组高,重症中暑组在各时间段的BNP水平均高于轻症中暑组,差异均有统计学意义(P<0.05);轻症中暑组与重症中暑组在发病第1 d时的CK-MB水平与健康体检组无明显差异(P>0.05),发病第3 d时,重症中暑组的CK-MB水平较轻症中暑组与健康体检组高(P<0.05),轻症中暑组的CK-MB水平与健康体检者差异无统计学意义(P>0.05);轻症中暑组与重症中暑组在发病第7 d时CK-MB水平均高于健康体检组(P<0.05)。结论中暑患者发病早期CK-MB未升高时BNP已经明显升高,且BNP越高病情越严重,可作为临床判断中暑患者病情的有效指标。     

IAP方案治疗中晚期肺癌32例疗效评价

我们从 1998年 7月至 2 0 0 0年 10月收治中晚期肺癌 3 2例 ,采用ＩＡＰ方案进行化疗 ,观察其疗效和不良反应 ,现将结果报告如下。1　临床资料3 2例肺癌患者 ,男性 2 0例 ,女性 12例 ,年龄 3 6～ 78岁 ,中位年龄 5 5岁。组织学类型 :腺癌 16例 ,鳞癌 11例 ,鳞腺癌 3例 ,小细胞癌 2例。临床分期 :Ⅱ期 9例 ,Ⅲ期 18例 ,Ⅳ期 5例。初治 9例 ,复治 2 3例。治疗方法 :采用ＩＡＰ方案 ,异环磷酰胺(ＩＦＯ ) 1.2 ｇ/ｍ2 ,静脉点滴 ,第 1～ 4天 ;阿霉素 (ＡＤＭ ) 40ｍｇ/ｍ2 ,静脉注射 ,第 1天 ;顺铂 (ＰＤＤ 3 0 )ｍｇ/ｍ2 ,静脉点滴 ,第1～ 3天…     

人resistin基因原核表达载体构建和表达

[目的]构建人resistin基因原核表达载体并观察其表达,为开展对resistin的研究打下实验基础.[方法]酚氯仿一步法从一位2型糖尿病合并胆管癌患者腹壁皮下脂肪组织抽取总RNA,RT-PCR法扩增出re-sistin基因cDNA,经测序后,PCR产物亚克隆入T载体,用EcoRI和KpnI分别酶切重组T质粒和原核表达载体pGENKS,然后resistin基因片段和表达载体通过T4DNA连接酶进行定向连接,用核酸内切酶EcoRI、KpnI酶切和测序方法鉴定出重组表达质粒.重组表达质粒转化大肠杆菌JM109,经1 mmol/LIPTG在32℃诱导表达2 h,裂解细菌,进行PAGE凝胶电泳鉴定融合蛋白的表达.[结果]RT-PCR扩增产物分子大小为327 bp,序列分析表明为人resistin基因完整编码区.PCR产物与T载体连接、转化大肠杆菌后,从细菌质粒中酶切回收了目的片段.重组表达质粒经EcoRI和KpnI双酶切后能产生出327 bp、4 980 bp大小的两个片段,序列分析表明重组表达质粒包含人resistin基因完整编码区,基因编码无移位,PAGE凝胶电泳表明在细菌裂解上清有分子质量为39.5 kD的融合蛋白.[结论]成功构建了人resistin基因原核表达载体,且构建的载体能表达出含目的蛋白的融合蛋白,为下一步研究打下了实验基础.     

HSV_1-TK转染人肺腺癌细胞A549的实验研究

目的　体内外观察HSV1 TK/GCV对人肺腺癌细胞A5 49的杀伤效应。方法　构建含TK基因的逆转录病毒表达载体 ,电穿孔法转化肺癌细胞A5 49。MTT法检测转染细胞对GCV的药物敏感性 ,并观察旁观者效应 ;电镜、FCM、TUNEL法检测GCV诱导转染细胞凋亡变化 ;PCR和细胞原位杂交分别检测转染细胞TK基因整合和表达 ;活体内观察GCV对转染细胞、亲代细胞接种裸鼠皮下肿瘤治疗效果。结果　转基因细胞变得较不规则 ,多角型 ,易形成空泡。A5 49、A5 49 PLXSN、A5 49 TK三种细胞体外倍增时间分别为 ( 3 6.15± 3 .2 7)、( 4 0 .82± 3 .75 )和 ( 4 2 .0 6± 4.12 )小时 (P >0 .0 5 )。转染细胞对GCV的敏感性比亲代细胞提高 46倍 (P<0 .0 0 1)。旁观者效应在高细胞密度接种 ( 1× 10 4细胞 /孔 )较低细胞密度接种 ( 1× 10 3细胞 /孔 )明显。电镜发现转染细胞有凋亡小体、核呈半月征。FCM、TUNEL均能检测到转染细胞凋亡发生率明显高于对照细胞 (P<0 .0 0 1)。PCR及原位杂交表明转染细胞有TK基因整合和表达。体内实验表明GCV能明显抑制转染细胞接种的肿瘤 ,而亲代细胞接种的肿瘤未受抑制。结论　转TK基因细胞在体内外都获得了对GCV的敏感性。TK/GCV系统杀灭肿瘤可能与诱导细胞凋亡有关。GCV能在活体内抑制转TK基因细胞裸鼠移     

胞苷脱氨酶基因治疗肿瘤研究进展

肿瘤自杀基因治疗是目前肿瘤基因治疗研究热点之一,胞苷脱氨酶(简称ＣＤ)基因是其中之一。本文把ＣＤ基因治疗肿瘤近年有关文献作一简要综述。1　胞苷脱氨酶基因结构及治疗肿瘤机理ＣＤ基因是一个由3000个碱基对组成的分子。ＣＤ蛋白由427个氨基酸组成。ＣＤ是一个非哺乳?..     

HSV1-TK/GCV系统对人肺腺癌细胞A549生物学特性的影响

目的　观察转TK基因肺癌细胞对丙氧鸟苷 (GCV)的敏感性及TK GCV系统杀灭肿瘤细胞机制。方法　观察转TK基因、转空载体A5 49细胞 (下分别简称A5 49 TK、A5 49 pLXSN)和A5 49细胞形态学改变、生长增殖特性。GCV对 3种细胞生长抑制 (MTT法 )。电镜、流式细胞仪观察A5 49 TK、A5 49细胞经 5 0μmol LGCV作用 3d后细胞凋亡。 结果　转基因细胞变为不规则 ,呈多角型 ,透亮度下降 ,体外增殖能力下降 ,A5 49 TK ,A5 49 pLXSN ,A5 493种细胞倍增时间分别为 42 .3 5、41.75、3 6.18h。依据IC5 0 ,A5 49 TK细胞对GCV敏感性比A5 49细胞提高 46倍 ,电镜发现A5 49 TK细胞有凋亡小体 ,核呈半月征等 ,流式细胞仪发现A5 49 TK、A5 49细胞亚G0 G1 期分别为 ( 12 .2 1± 1.76) %、( 1.3 2± 0 .47) % ,两者比较P <0 .0 1。结论　A5 49 TK细胞获得了对GCV敏感性 ,TK GCV杀灭肿瘤细胞与诱导凋亡有关。     

基因转导方法研究进展

基因治疗是从分子水平上对疾病的发生、发展进行调控。由Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ［１］１９９０年首先进行第１次人类基因治疗研究以来,近 １０ ａ来这一领域发展很快,本文把有关基因治疗的转导方法进行简要综述。１概述 目前,基因转移方法有物理方法（显微注射法、电穿孔法、基因枪）,化学方法（磷酸钙共沉淀、ＤＥＡＥ－萄聚糖法）,生物学方法（脂质体、原生质体融合法、病毒性载体）等。病毒性载体是目前研究得最多,应用最广泛的核酸运载工具（ｖｅｃｔｏｒ）,因此人们通常简单地把基因转递方法分为病毒性载体和非病毒载体两种。２非…     

HSV1-TK基因转导人肺腺癌细胞A549体内外表达的研究

目的:观察TK基因转导A549细胞后在体外和体内的表达.方法:将已构建的逆转录病毒表达载体PLXSN-TK用电穿孔法转化A549细胞,原位杂交检测TKmRNA在A549-TK细胞和由它接种裸鼠形成肿瘤组织中的表达.斑点杂交检测外源基因在细胞中整合.并体外观察A549-TK细胞对GCV的敏感性.结果:原位杂交表明A549-TK细胞及由其所形成的肿瘤组织中TKmRNA表达阳性,对照细胞无表达,斑点杂交证明A549-TK细胞中有TK基因整合.A549-TK细胞对GCV的敏感性是亲代细胞的46倍.结论:TK基因在A549-TK细胞中表达阳性,转基因细胞对GCV敏感.     

丙氧鸟苷诱导转单纯疱疹病毒胸苷激酶基因人肺腺癌细胞A549凋亡研究

目的:观察丙氧鸟苷(GCV)对A549-TK细胞的作用与诱导细胞凋亡的关系。方法:A549-TK、A549两种细胞经50μmol/LGCV作用3～5d后,用电镜、流式细胞仪、细胞凋亡原位检测法(Tunel)观察细胞凋亡。结果:电镜下发现A549-TK细胞有凋亡特征:如凋亡小体、半月征、核浓缩,流式细胞仪发现A549-TK细胞有亚G₀G₁峰,凋亡细胞占12.21%±1.66%,而A549细胞无G₀G₁峰,凋亡细胞占1.32%±0.25%,两者比较P<0.01。Tunel表明A549-TK、A549两种细胞凋亡发生率分别为16%±167%,2.5%±0.36%,两者比较P<0.01。结论:GCV诱导A549-TK细胞凋亡。