人胚神经干细胞植入大鼠脑梗死区后的存活和分化

背景:神经干细胞移植可明显改善受损的神经功能,但在体内外多种因素的影响下,移植的神经干细胞其分化数量和分化方向受到限制.目的:观察人胚神经干细胞植入大鼠脑梗死区后的存活、迁移和分化情况.设计、时间及地点:细胞学体内观察,于2007-04/2008-04在泸州医学院附属医院分子生物实验室完成.材料:SD雌性大鼠30只,由中国医学科学院实验动物研究提供.流产胎儿由泸州医学院附属医院妇产科提供.方法:取流产胎儿大脑皮质,剪碎后消化离心,过滤后取沉淀细胞重新悬浮,加入含成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、白血病抑制冈子的DMEM/F12培养基,体外培养获得人胚神经干细胞.30只大鼠通过结扎颈外动脉建立脑梗死模型,行走时向右侧转圈者为成功模型,剔除5只无上述明显症状的失败模型鼠.于造模后24 h,以前囟尾侧0.8 mm,中线右外侧1.2 mm为注射点,每只大鼠移植行BrdU标记的1×109 L-1人胚神经干细胞悬液10 μL,深度为硬脑膜下3.0～3.2 mm.主要观察指标:免疫组织化学及免疫荧光染色观察植入的人胚神经干细胞在脑梗死区的存活、迁移和分化状态.结果:人胚神经干细胞体外培养48 h后聚集成球悬浮生长,传三四代后加入血清诱导可见巢蛋白免疫荧光染色呈阳性,发出绿色荧光并聚集成球.BrdU阳性细胞为椭圆形棕褐色,移植后第2,4 周均可见其在脑梗化区存活片向周围迁移,且第4周时迁移的范围更广.移植后2周,皮质颗粒层和皮质下均见较多的BrdU阳性细胞,目BrdU/微管相关蛋白2双阳性细胞多于BrdU/胶质纤维酸件蛋白双阳性细胞;移植后4周脑梗死区BrdU阳性细胞数明显减少,主要存在于脉络丛和微血管中,且BrdU/胶质纤维酸性蛋白双阳性细胞多于BrdU/微管相关蛋白2双阳性细胞.结论:人胚神经干细胞能存活于脑梗死的环境中,并逐渐分化成神经元或星形胶质细胞.移植后期脑实质内存活的神经干细胞明显减少,大量迁移到侧脑室脉络丛和脑表面微血管内,被内皮吞噬系统消化.     

一步法多重RT-PCR快速筛查A型、B型和新型甲型H1N1流感病毒

目的 建立能同时筛查A型、B型和新型甲型H1N1流感病毒的多重RT-PCR技术.方法 针对A型流感病毒的M基因、B型流感病毒的NS基因设计通用扩增引物,针对新型甲型H1N1流感病毒的HA基因设计特异性扩增引物,采用一步法建立多重RT-PCR反应体系.通过盲法实验与实时荧光RT-PCR进行比对来评价方法的准确性,并应用于临床评价方法的实用性和有效性.结果 琼脂糖凝胶电泳分析多重RT-PCR产物,结果显示目的扩增片段条带清晰明亮,没有非特异性产物出现,可见该方法扩增效率高,特异性强.50份样本的盲法实验结果显示两种方法检测结果完全一致,符合率为100%.结论 建立的多重RT-PCR方法能通过一次实验快速、准确地同时筛检A型、B型和新型甲型H1N1流感病毒,是一项成本低廉、对流感的疫情监测和早期诊断具有实用价值的筛检技术.

Abstract：

Objective To developed a multiplex RT-PCR assay for simultaneous screening of type A, B and novel A (H1N1)influenza viruses. Methods Two pairs of universal primers in were designed for amplifying the M gene and NS gene of type A and B influenza viruses, respectively. A pair of specific primers of HA gene was designed to detect novel A (H1N1) influenza virus. A one-step method was used to establish the multiplex RT-PCR system. A blinded experiment was carried out to validate the accuracy of this assay in comparison with the results of real-time fluorescence RT-PCR. The clinical practicability and efficacy of this assay was also evaluated. Results The RT-PCR products were analyzed using agarose gel electrophoresis,which yielded distinct bands of the target fragments without non-specific reactions, suggesting the high efficiency and specificity of the multiplex RT-PCR. Blinded study of 50 samples demonstrated a concordance rate of 100%. Conclusion This multiplex RT-PCR assay allows one-step simultaneous detection of type A, B and novel A (H1N1) influenza viruses rapidly and accurately, and provides a valuable low-cost screening technique for influenza epidemic monitoring and early diagnosis.     

β-七叶皂甙钠对脑梗死患者血清TNF-α含量的影响

目的观察β-七叶皂甙钠对脑梗死患者血清TNF-α含量的影响。方法经螺旋CT或MRI确诊的急性脑梗死病人58例,随机分为2组,治疗组30例,用β-七叶皂甙钠加用一般治疗;对照组28例,疗程均为10d。结果治疗组与对照组治疗10d后血清中TNF-α含量比较,有显著性差异(P<0.05)。结论β-七叶皂甙钠对治疗急性脑梗死有较好疗效,具有降低TNF-α含量,保护神经元的作用。     

西地兰与普罗帕酮转复心房纤颤临床研究

我们分析了1995～2000年静脉应用西地兰与口服普罗帕酮(德国基诺药厂,商品名悦复隆)于房颤转复心律80例,疗效满意,总有效率78.7％,优于单纯应用西地兰治疗,现报告如下。     

The study on change of serum cytokines levels and its correlation with function rehabilitation in patients with cerebral infarction

TO explore the relationship between CK and pathologic process of CI as well as its clinical signific ance,we measured the serum IL －６,TNF and sIL －２R levels in ４６CI patie nts as well as ２２recovery phase patients of ４６．１Materials and Methods １．１Clinical Materials CI group：There were forty －six pa－tients ,２５were men,２１women ,aged ４２to ８６year,averaging（６２．９２±１４．６７）year old．They were selected from those consec－tively from hospitalized in Depar…     

血液透析患者口服冲击和静脉注射钙三醇治疗的疗效比较:对血清IL-1、IL-6和骨矿密度的影响

目的　增加骨吸收细胞因子如 IL-1和 IL-6的血清水平已经影响了血透患者骨重建的变化。在这个前瞻性的随机研究中 ,我们的目的在于比较口服和静脉冲击钙三醇对血清IL-1和 IL-6水平的影响。方法　 2 8例血透患者连续、随机地分配到口服冲击钙三醇治疗组 (n=14 ,男 /女 =7/7,平均年龄 42± 15岁 )或静脉冲击钙三醇治疗组 (n=14 ,男 /女 =6/8,平均年龄 3 8±14岁 )治疗。两组在年龄、性别分布、原发肾脏疾病、血透平均时间和生化参数基线包括 IL-13和 IL-6的血清水平都无显著性差异。结果　从开始到第 3个月 ,静脉组较口服钙三醇组甲状旁…     

多潘立酮治疗功能性消化不良86例临床观察

目的 观察多潘立酮对功能性消化不良(FD)的疗效及安全性.方法 172例患者随机分为治疗组86例,对照组86例.治疗组予多潘立酮10 mg,每日3次,对照组予胃复安10 mg,每日3次,每周复查1次,共治疗4周.按罗马Ⅲ标准记录上腹部疼痛、烧灼感、餐后饱胀、早饱等症状变化及不良反应.结果 4周总有效率:治疗组为80.23%,对照组为59.30%,差异有显著性(P＜0.01).不良反应的发生率:治疗组为1.16%,对照组为9.30%,差异有显著性(P＜0.05).结论 多潘立酮治疗罗马Ⅲ标准FD安全有效,依从性好,不良反应少.     

浅谈血液短缺时的应对策略

《中华人民共和国献血法》颁布实施已经近十年了，采供血工作也取得了很大的成绩。但由于多种原因在目前固定无偿献血者队伍尚不十分稳定的情况下，季节性、偏血型性血液短缺时有发生，抗风险能力较弱。为了有效的应对此问题，满足临床用血需求，笔者认为，应从建立科学有效的应急预警机制；多渠道开发血源、解决血液入口问题；合理调配血液、重视血液出口等多个环节配合才能有效缓解此矛盾。下面根据笔者在上述两个环节所属岗位上多年工作的经验，结合本站实际供血情况谈谈血液短缺时的主要应对措施。     

以精神症状为表现的基底动脉分叉处巨大型动脉瘤1例

患者，女，５６岁，入院前３个月不明原因出现情感淡漠，言语减少，行为迟缓，注意力不集中，记忆力明显下降，不伴幻觉妄想及大小便失禁，１月后逐渐出现左侧肢体无力及饮水呛咳，以颅内占位病变入院。查：反应迟钝，少语，理解、判断、记忆力明显减退，计算力差，眼球活动灵活，双侧眼裂及瞳孔等大，咽反射迟钝，左侧肢体肌力Ⅳ级，肌张力正常，四肢腱反射亢进，双侧病理征（＋）。ＥＥＧ正常，头颅ＣＴ平扫示脑干前上方一直径约３ｃｍ圆形光滑、密度均匀的肿块影，其内有一小钙化点，脑于及三脑室明显受压，增强扫描肿块明显均匀强化，螺…     

26例脑干出血死亡因素分析

脑干出血是神经科的急重症,病情凶险,病死率高,如何通过临床特征判断其预后,文献报道较少。现将我院收治的26例脑干出血的临床与死亡的关系进行分析。1　临床资料1.1　一般资料:26例脑干出血均系我院1995～1999年的住院患者。男15例,女11例;年龄38～83(平均64.32±10.68)岁。其中中脑出血10例,脑桥出血16例。诊断符合第四次全国脑血管病会议所制定的标准[1],并经CT证实。血肿体积采用多田式公式计算即长轴×短轴×层面×π6。有关出血量、出血部位、血压、血糖、有无昏迷及并发症的资料数据见表1。表1　脑干出血临床、CT改变与死亡的关系…