人β3肾上腺素受体真核表达质粒pcDNA3.1(+)-β3-AR的构建及表达

目的构建人β3肾上腺素受体(β3-AR)的真核表达质粒pcDNA3.1( )-β3-AR,并通过脂质体介导转染HEK293细胞使之表达该受体蛋白。方法以pENTR_ADRB3-Stop质粒为模板,采用PCR法扩增出人β3-AR cDNA,将其插入真核表达载体pcDNA3.1( )中,构建成真核表达质粒pcDNA3.1( )-β3-AR。将该质粒转染HEK293真核细胞,通过RT-PCR检测β3-AR mRNA在HEK293细胞内的表达,通过免疫荧光法检测β3-AR蛋白在HEK293细胞中的表达。结果酶切和DNA测序鉴定均证实重组质粒含有人β3-AR编码区全长。在转染重组质粒pcDNA3.1( )-β3-AR的HEK293细胞中检测到了β3-AR基因的转录和翻译产物。结论通过基因工程方法成功构建了β3-AR的真核表达质粒pcDNA3.1( )-β-AR,为进一步建立β-AR的稳定表达细胞株,用于筛选高效、高选择性β-AR激动剂奠定了基础。     

壳聚糖对大鼠Ⅲ度烧伤创面表皮生长因子的影响研究

目的:研究壳聚糖对大鼠Ⅲ度烧伤创面表皮生长因子(EGF)和EGFmRNA表达的影响及意义。方法:105只Wistar大鼠除5只作为正常对照组外,其余建立烧伤模型后分为壳聚糖低、中、高浓度(1%、2%、4%)组及贝复济组(阳性对照组)和自然愈合组(模型组),每日2次连续21d于受伤处喷以相应药物,采用免疫组织化学法、核酸分子杂交法及图象分析法检测烧伤后3、7、14、21d时大鼠Ⅲ度烧伤创面EGF和EGFmRNA的表达。结果:与模型组比较,壳聚糖各浓度组均可增强EGF和EGFmRNA的表达,并呈浓度依赖性,尤以4%壳聚糖组作用更强(P<0.01或P<0.05)。结论:壳聚糖对大鼠Ⅲ度烧伤创面有促愈合作用,其促愈合机制与增强创面EGF和EGFmRNA表达有关。     

减肥药的作用新靶点及相关新药研发近况

对近年来发现的减肥药作用新靶点，如瘦素及其受体、睫状神经营养因子、大麻素受体、神经肽Y5受体、β3肾上腺素受体、脂肪酸转运蛋白4等进行了介绍，并对以这些新靶点为基础开发的一系列相关新药的研究进展进行了综述。     

氟康唑胶囊在健康人体的药代动力学及生物等效性

目的建立人血浆氟康唑(抗真菌药)HPLC测定法,比较氟康唑2种制剂在健康志愿者体内的药代动力学和相对生物利用度。方法用随机开放交叉试验设计,20名健康志愿者分别单剂量口服试验和参比制剂氟康唑胶囊300mg,用高效液相色谱法法测定血药浓度,计算2制剂的药代动力学参数,并进行生物等效性评价。结果试验和参比制剂氟康唑胶囊的主要药代动力学参数t1/2分别为(31.20±3.98),(31.51±3.26)h;tmax分别为(2.83±0.37),(2.65±0.24)h;Cmax分别为(6.20±1.08),(6.11±1.01)μg·mL-1;AUC0-96分别为(208.42±21.77),(200.27±18.27)μg·h·mL-1;AUC0-∞分别为(234.00±24.56),(227.14±20.91)μg·h·mL-1。各药代动力学参数无显著性差异(P>0.05)。试验制剂氟康唑胶囊相对生物利用度F为(104.3±8.5)%。结论2制剂具有生物等效性。     

果糖二磷酸钠镁保护缺血性脑损伤的作用机制

目的研究果糖二磷酸钠镁对缺血突触体乳酸含量、胞内游离钙浓度及ATP酶与一氧化氮合酶活性的影响,以探讨其保护脑缺血的作用机制.方法以相分离法制备正常大鼠脑突触体,氧糖剥夺培养建立缺血突触体模型,加入1.3 mmol/L的果糖二磷酸钠镁,4.0mmol/L的1,6-二磷酸果糖与之培养60 min后,测定突触体乳酸含量、胞内游离钙浓度及ATP酶与一氧化氮合酶活性.结果氧糖剥夺培养后使突触体乳酸浓度显著增加,从(0.201±0.014)mmol/L增加到(0.282±0.018)mmol/L(F=11.417 8,P＜0.01),突触体内游离钙浓度也显著增加(P＜0.01);一氧化氮合酶活性显著增高,从(13.669±1.084)nkat增加至(44.142±1.167)nkat(F=44.847 2,P＜0.01);而ATP酶活性显著降低(P＜0.01).加入1.3 mmol/L果糖二磷酸钠镁与之共孵,可使缺血突触体乳酸含量降至(0.204±0.016)mmol/L(F=10.437 1,P＜0.01);静息状态和除极化状态突触体内游离钙浓度分别降低(P＜0.01),一氧化氮合酶活性降低为(18.654±1.317)nkat(F=28.042 3,P＜0.01),而Na+-K+ATP酶和Ca2+-Mg2+ATP酶活性升高(P＜0.01).果糖二磷酸钠镁的作用强于4.0 mmol/L的1,6-二磷酸果糖(P＜0.01).结论果糖二磷酸钠镁保护脑缺血的作用机制可能与其阻止改善脑缺血后脑组织能量代谢,减轻组织酸中毒,阻止细胞内钙超载及抑制一氧化氮合酶活性有关.     

地龙提取液药理与毒理实验研究

供本实验用地龙液,是按西南农业大学提供的技术工艺,取人工饲养的大平2号活地龙提得的溶液,收得率约60％左右。小鼠一次灌胃给药40ml/kg,观察7天,未见异常反应。亚慢性毒性试验,采用小鼠口服地龙液,连续90天,对两个剂量级及对照组动物的生长无影响,经病理学检查对心、肝、肾等组织,未引起实质性损害;又家兔灌胃     

汉防己碱与1, 6-二磷酸果糖对兴奋性氨基酸所致突触体内游离钙浓度升高的影响

目的:研究汉防己碱(Tet)与1, 6-二磷酸果糖(FDP)对兴奋性氨基酸(EAA)诱导的突触体内游离钙浓度升高的影响。方法:制备大鼠脑突触体, 以荧光法测定突触体内游离钙浓度;加入谷氨酸(Glu, 100μmol·L^-1), 天冬氨酸(Asp, 100μmol·L^-1), N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA, 100μmol·L^-1)及Glu+Asp(50μmol·L^-1+50μmol·L^-1)后, 测定突触体内游离钙浓度的变化;提前给予Tet(10、30、60μmol·L^-1), FDP(15、30、75、150μmol·L^-1), MK-801(10、20μmol·L^-1)及Tet+FDP(10+15, 30+30μmol·L^-1)预孵, 再加入上述浓度的Glu、Asp、NMDA及Glu+Asp, 观察突触体内游离钙浓度的变化。结果:Glu、Asp、NMDA及Glu+Asp均呈剂量依赖性升高突触体内游离钙浓度, 提前给予不同浓度的Tet、FDP、MK-801及Tet+FDP, 均可使突触体内游离钙浓度呈剂量依赖性降低, 且以Tet+FDP的作用最明显。结论:Tet与FPD可显著抑制EAA诱导的突触体内游离钙浓度的升高, 这可能是二者保护缺血脑细胞的作用机制之一。Tet与FDP联合应用可能对缺血脑细胞有更强的保护作用。     

顺铂对肝癌细胞杀伤效应的研究

目的：探讨顺铂（ＣＤＤＰ）对Hca-F细胞的生长抑制及其导凋亡的作用。方法：采用MTT,Hoechst33342和PI荧光染色,流式细胞术分析法。结果：CDDDP对Hca-F细胞有明显的细胞毒性,其IC50值为0．57μg/ml,且诱导细胞凋亡贯穿全程并呈逐渐增强趋势。结论：顺铂能明显抑制癌细胞的生长;诱导细胞凋亡是其抗肿瘤作用的主要机制之一。     

益气祛瘀化痰治疗不稳定性心绞痛76例

目的观察益气祛瘀化痰法治疗不稳定性心绞痛的临床疗效。方法将已确诊的123例不稳定性心绞痛患者随机抽取分为2组。对照组47例,予以抗心绞痛常规西药治疗;治疗组76例,在对照组治疗基础上加用益气祛瘀化痰中药(药用黄芪、党参、元参、半夏、茯苓、白僵蚕、丹参、水蛭、虫),4周为一疗程。结果 2组治疗心绞痛疗效,治疗组76例,显效23例(30.27%),有效46例(60.53%)、无效7例(9.20%)、总有效率90.80%;对照组47例,显效7例(14.90)、有效26例(55.30%)、无效14例(29.7%)、总有效率(70.20%)。2组比较显效率有显著性差异(P0.05);2组心电图疗效:治疗组显效23例(28.44%),有效43例(56.58%),无效11例(14.48%),总有效率为85.52%,对照组显效7例(14.90%),有效23例(48.93%),无效17例(36.17%),总有效率为(63.83%)。2组比较显效率有显著性差异(P0.05);2组治疗前后血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、C反应蛋白(CRP)、血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)比较,均有显著性差异(P0.05)。治疗组与对照组治疗后比较,有显著性差异(P0.05)。结论益气祛瘀化痰有较好的调脂及改善供血,稳定动脉粥样斑块的作用,是治疗不稳定性心绞痛的有效疗法。     

急性冠脉综合征PCI术后近期再发胸痛原因分析

[目的]分析急性冠脉综合征患者行经皮冠状动脉介入治疗（PCI）术后近期再发胸痛的原因。[方法]回顾分析过去26个月内行PCI术的320例冠状动脉疾病患者术后胸痛的情况,其中,男186例,女134例,平均年龄60.5岁。围手术期口服氯吡格雷及阿斯匹林,低分子肝素皮下注射,硝酸酯扩冠,控制危险因素,调整生活方式。[结果]术后有41例患者近期复发胸痛,胸痛发生率为12.8%（41/320）,其中由亚急性血栓形成致胸痛再发1例,由边支闭塞及远端栓塞致胸痛再发3例,因非完全血运重建所致2例,由慢血流、无复流及快速心律失所致4例,由支架植入反应及精神因素所致25例,由其他脏器致非心源性胸痛6例。[结论]冠状动脉支架植入术后胸痛发生率高,原因复杂多样,应仔细辩别,识别危险程度,积极干预。