基质金属蛋白酶及抑制因子与膀胱癌关系的研究进展

基质金属蛋白酶(Matrixmetalloproteinases,MMPs)是一类能降解细胞外基质成分的重要蛋白酶类,具有促进恶性肿瘤侵袭转移的作用。金属蛋白酶组织抑制因子(tissueinhibitorsofmetalloproteinases,TIMPs)可以特异性抑制MMPs活性。本文就基质金属蛋白酶及其抑制因子与膀胱癌关系的研究进展作一综述。     

小鼠胚胎干细胞向成牙本质样细胞的诱导分化

目的探讨胚胎干细胞(ES细胞)向成牙本质样细胞诱导分化的方法。方法首先通过悬浮培养的方式,将ES细胞诱导分化形成拟胚体,然后将拟胚体细胞与牙髓成纤维细胞通过Transwell培养系统共培养,研究拟胚体细胞向成牙本质样细胞的分化情况。结果RT-PCR结果显示,拟胚体细胞与牙髓成纤维细胞共培养10d后,可检测到成牙本质细胞的特征性分子——牙本质涎磷蛋白(DSPP)的表达;共培养15d后,表达有所增强。而单独培养的拟胚体细胞,则始终未检测到DSPP的表达。结论通过与牙髓成纤维细胞共培养,可以促进胚胎干细胞向成牙本质样细胞分化。     

白细胞介素13刺激成纤维细胞胶原基因转录和胶原蛋白的合成

目的:以成纤维细胞株3T3为实验对象,观察白细胞介素13对成纤维细胞株3T3胶原合成作用,探讨白细胞介素13对纤维化形成的作用机制。方法:实验于2005-03/2006-10在江西医学科学研究所江西省医学生物高技术重点实验室进行。实验材料:成纤维细胞株3T3细胞为江西省医学科学研究所江西省医学生物高技术重点实验室保存。白细胞介素13购自Peprotech公司。实验方法:①3T3细胞培养:3T3细胞常规培养在含体积分数为0.15胎牛血清、100U/mL青、链霉素的DMEM培养液中,置于37℃、含体积分数为0.05的CO2孵箱中培养,并分为实验组和对照组,两组细胞均用无血清DMEM培养12～16h,实验组加入100μg/L白细胞介素13,作用24,48,72h后进行以下实验。②应用Van Gieson胶原纤维特殊染色观察白细胞介素13作用下,3T3细胞体外合成胶原纤维情况。细胞培养上清液采用羟脯氨酸实验检测细胞分泌的总胶原蛋白含量。采用RT-PCR检测3T3细胞Ⅰ型胶原α1基因(COL1A1)mRNA的表达。采用Western blotting检测白细胞介素13作用后成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果:①Van Gieson胶原纤维特殊染色观察白细胞介素13对成纤维细胞体外合成胶原纤维的影响:有胶原纤维地方被Van Gieson液染成红色,细胞核则为灰黑色。显微镜下可见成纤维细胞呈放射状、编织状或旋涡状排列,细胞体呈梭形或不规则三角形,胞质向外伸出大小不等的突起,核为椭圆形,位于胞浆的中央,在白细胞介素13孵育的3T3细胞中可观察到较多的胶原纤维。②羟脯氨酸实验检测白细胞介素13对成纤维细胞分泌总胶原含量影响:白细胞介素13刺激3T3细胞分泌的总胶原含量24h后即明显增高,持续至72h(t=6.751,P<0.01),明显高于对照组(t=3.019,P<0.05)。③RT-PCR检测白细胞介素13作用下3T3细胞Ⅰ型胶原α1mRNA水平:在511bp(β-actin)和378bp处(COL1A1)均可见一明显条带。④Western blotting检测白细胞介素13作用下Ⅰ型胶原蛋白表达情况:白细胞介素13作用3T3细胞0,24,48,72h后,Ⅰ型胶原蛋白表达逐渐增强,与actin蛋白相比,差异显著(P<0.05)。结论:白细胞介素13可促进3T3细胞胶原基因的转录和胶原蛋白的合成,可能在纤维化疾病发病机制中发挥重要作用。     

白细胞介素13对HEL细胞分化和转录因子c-fos表达的影响

目的研究白细胞介素13（IL-13）对红白血病细胞系HEL细胞分化作用及对HEL细胞转录因子c-fos表达的影响。方法用RT—PCR方法检测HEL细胞IL-13受体仪1、GPⅡb、vWF和c-fos基因mRNA表达，用Western blot和流式细胞术分别检测IL-13受体α1、c-fos、GPⅡb和vwF蛋白水平的表达。结果HEL细胞表达IL-13受体α1，用IL-13（100ng／ml）作用于HEL细胞，GPⅡb和vWF基因mRNA表达上调，实验组和对照组GPⅡb／β-actin吸光度比值分别为2．912，1．303，实验组为对照组的2．23倍（P〈0．05）；实验组和对照组vWV／f3一actin吸光度比值分别为0．506，0．217，实验组为对照组的2．33倍（P〈0．05）。流式细胞术分析结果显示，实验组GPⅡb和vWF蛋白表达明显高于对照组。IL-13作用于HEL细胞30min，c—fos基因mRNA表达水平达高峰，IL-13作用HEL细胞60min，c—fos蛋白表达达高峰，30min组、60min组c-fos/β-actin吸光度比值高于其它各组（P〈0．05）。结论IL-13可促进HEL细胞分化，并上调c-fos表达。     

合并感染的多囊肾病原菌及耐药性调查分析

目的对合并感染的多囊肾病原菌及耐药性进行分析。方法回顾性分析97例多囊肾合并感染患者的临床资料。结果通过采集到的97例多囊肾感染囊液送检结果得出:病原菌以革兰阴性菌为主,其中前两位分别为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌,其较敏感的抗生素为亚胺培南、美罗培南、厄他培南、呋喃妥因、哌拉西林/他巴唑坦等。结论大肠埃希菌是合并感染多囊肾患者主要的感染病原菌,随着抗生素的普遍使用,病原菌的耐药性也随之增高,临床医生在选用抗生素时应根据尿培养结果,有针对性的合理使用,提高治疗效果。     

医学细胞生物学中细胞外基质教学的思考

细胞外基质（extracellularmatrix,ECM）是近年来医学细胞生物学研究的热点,也是本科生教学授课的难点。通过对国内部分高校《医学细胞生物学》课程中ECM章节授课的类比,指出该知识模块在整个课程体系内倍受“冷落”的现状,分析导致该教学环节薄弱的可能因素：相关教材知识及其授课比重过少、ECM编排位置多种多样、ECM相关疾病知识的更新与补充不足。提出改进教学实践的3点建议：及时修订与补充教材中的相关内容、采用适合ECM知识框架的课堂设计、精心挑选和讲述具有代表性的相关疾病。旨在为相关教育工作者提供教学参考。     

IL-13和乙醇促进人肺成纤维细胞胶原的表达

目的:研究乙醇和/或白细胞介素13(IL-13)对人肺成纤维细胞(HFL-1)Ⅰ、Ⅲ型胶原α1链基因(COL1A1、COL3A1)以及Ⅰ型胶原蛋白(CoⅠ)表达的影响,探讨肺纤维化的机制。方法:培养HFL-1,通过实时定量荧光RT-PCR检测乙醇和/或IL-13对HFL-1细胞IL-13受体(IL-13Rα1、IL-13Rα2、IL-4Rα)mRNA、COL1A1 mRNA和COL3A1 mRNA表达的影响,ELISA的方法检测乙醇和/或IL-13对HFL-1分泌CoⅠ的影响。结果:单独低浓度乙醇(25、50、100、200mmol/L)作用HFL-1后,与对照组相比IL-13Rα1 mRNA与IL-4Rα mRNA水平比对照组显著增高(P<0.05),而IL-13Rα2 mRNA水平比对照组显著降低(P<0.05)。单独低浓度乙醇(25、50、100、200 mmol/L)对HFL-1的COL1A1 mR-NA和COL3A1 mRNA表达无影响(P>0.05)。IL-13(10、20、50μg/L)可以促进HFL-1的COL1A1 mRNA和COL3A1 mR-NA的表达(P<0.05),且存在浓度依赖性。乙醇(200 mmol/L)与IL-13(10、20、50μg/L)共同作用刺激HFL-1促进COL1A1 mRNA和COL3A1 mRNA的表达比IL-13(10、20、50μg/L)单独作用强(P<0.05)。IL-13组(10、20、50μg/L)和乙醇(200 mmol/L)与IL-13(10、20、50μg/L)共同刺激组HFL-1均有CoⅠ的分泌,但共同刺激组HFL-1分泌CoⅠ量显著增加(P<0.05)。结论:单独低浓度乙醇(25、50、100、200mmol/L)不影响HFL-1细胞的COL1A1和COL3A1表达,但可以影响HFL-1细胞IL-4Rα、IL-13Rα1和IL-13Rα2的表达,而乙醇与IL-13共同刺激与单独IL-13刺激相比对HFL-1的COL1A1和COL3A1以及CoⅠ的表达有显著的促进作用。     

大肠埃希菌嘌呤核苷磷酸化酶基因载体的构建及对胰腺癌细胞的作用

目的 构建大肠埃希菌(Escherichia coli)嘌呤核苷磷酸化酶(purine nucleoside phosphorylase,PNP)基因表达载体,研究其生物活性,为肿瘤的基因治疗奠定基础.方法 PCR扩增大肠埃希菌K12的PNP基因,T4连接酶将PNP连接入pMSCV逆转录病毒载体,构建重组逆转录病毒载体...     

补中益气汤研究进展

补中益气汤首见于《脾胃论》卷中,历代医家读东垣书者,鲜不奉为金科玉律,而后人对补中益气汤方也是进行了深入的研究,通过加减化裁使得临床应用范围更加广泛。当代运用补中益气汤更是渗透到各科各病,现追溯求源,进行简要归类,以飨同道。     

周仲瑛教授治疗失眠病机与药物关系探讨

以当代名老中医、国医大师周仲瑛教授近30年来失眠病案为研究对象,筛选192例389诊纳入病案,基于Visual FoxPro软件技术建立病案数据库,结合现代先进的挖掘技术,运用强双向关联规则、卡方检验、影响率等具体数据挖掘方法对周仲瑛教授失眠的临证经验与学术理论进行深入地探讨与研究,着重挖掘其治疗失眠组方运用规律,为临床推广应用提供方案支撑。