益肾达络饮与变应性脑脊髓炎小鼠血脑屏障的完整性

为了验证益肾达络饮对实验性变应性脑脊髓炎小鼠血脑屏障完整性的保护作用,应用实时荧光定量RT-PCR和分光光度计检测实验性变应性脑脊髓炎小鼠脑和脊髓内T淋巴细胞表面标记物CD4、CD8以及单核细胞表面标记物CD11b mRNA的表达变化以及伊文思蓝含量。结果提示实验性变应性脑脊髓炎小鼠血脑屏障通透性增高与脑内CD4、CD8、CD11b mRNA表达的升高相关,应用益肾达络饮可以明显减轻实验性变应性脑脊髓炎小鼠大脑和脊髓炎性细胞的聚集。     

益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎NF-κB信号传导通路的影响

目的:研究NF-κB信号传导通路在EAE发病中的作用,观察中药复方益肾达络饮干预实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的疗效,探讨益肾达络饮治疗EAE的作用机制。方法:采用免疫蛋白质印迹法、免疫组化法测定EAE小鼠中枢神经组织中NF-κBp65、IκB-α蛋白表达的变化。结果:中药复方益肾达络饮能降低EAE的复发率(P<0.05),改善EAE模型小鼠神经功能评分(P<0.05)。与模型组相比,激素组、中药组、中药加激素组NF-κBp65表达水平明显降低,IκB-α表达水平明显升高(P<0.05)。结论:在EAE中,NF-κB介导的炎性级联反应是EAE小鼠CNS炎性浸润、轴索损伤的重要原因;中药复方益肾达络饮能降低EAE的复发率,有效改善EAE小鼠神经功能损伤;中药益肾达络饮干预EAE的作用机制与对NF-κB信号通路的调节密切相关。     

黄芪注射液在逆转心肌细胞肥大过程中对心肌细胞线粒体结构和功能的影响

目的:通过大鼠原代心肌细胞培养,探讨心肌肥大过程中有关心肌细胞线粒体改变的病理和治疗问题。方法:分离和培养大鼠原代心肌细胞,并与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)共培养72,96 h。通过BCA法检测细胞总蛋白含量;倒置显微镜拍摄并测量细胞直径,反映心肌细胞增殖情况;通过荧光显微镜测量线粒体内膜膜电位(ΔΨm);酶标仪检测线粒体单胺氧化酶(MAO)活性;分光光度计检测线粒体细胞色素C氧化酶(COX)活性和线粒体外膜损伤百分率;高效液相色谱法检测心肌细胞内ATP,ADP,AMP含量,反映心肌细胞线粒结构和功能在与AngⅡ共培养中的损伤和能量代谢情况。在此基础上给予黄芪注射液和缬沙坦,观察它们对心肌细胞重构中线粒体结构、功能的药理作用。结果:在72,96 h 2个时间点,模型组较空白组心肌细胞总蛋白含量和心肌细胞直径均显著性增加。在该增殖过程中,心肌细胞线粒体MAO活性和线粒体外膜损伤百分率均显著升高,线粒体COX活性和线粒体ΔΨm均显著减低,ATP,ADP含量减少,AMP含量增加。黄芪注射液和缬沙坦能抑制AngⅡ引起的心肌细胞蛋白质合成增加和细胞直径增大、改善线粒体外膜损伤和内膜膜电位及COX,MAO活性,增加ATP,ADP含量、降低AMP含量。结论:在心肌肥大过程中,存在线粒体的结构和功能的损害,心肌细胞能量代谢损伤变化是继心肌细胞线粒体结构损伤后发生的。黄芪注射液和缬沙坦在逆转血管紧张素Ⅱ所引起的心肌细胞肥大的过程中具有保护心肌细胞线粒体结构和功能的作用,逆转心肌细胞肥大、纠正心肌重构有利于心肌细胞能量的改善。     

血塞通对局灶性脑梗死大鼠海马Nogo-A表达的影响

目的探讨血塞通对大脑中动脉阻塞（MCAO）模型SD大鼠脑组织的保护、促进功能恢复的机理,以及血塞通不同剂量的疗效。方法使用改良的Longa方法建立大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）模型,随机分组,选取不同恢复时间点,观察不同组别大鼠的神经功能、海马的病理形态学以及Nogo-A蛋白表达的变化。结果与正常组比较,模型组术后Nogo-A表达变化均有增高,并随时间出现下降趋势,血塞通组不同时间点的神经功能损伤、病理形态改变、Nogo-A基因的表达水平均低于同期模型组。结论血塞通可以有效降低No-go-A基因表达,促进中枢神经功能的恢复;同时发现血塞通大剂量组作用优于小剂量组。     

地黄饮子加减方对MCAO模型大鼠血浆HPA轴及脑组织HSP70表达的干预效应研究

目的探讨地黄饮子加减方对大脑中动脉线栓(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型大鼠血浆下丘脑—垂体—肾上腺轴(HPA轴)含量及其脑组织热休克蛋白70(heatshock protein 70,HSP70)表达的干预效应。方法 MCAO法制作SD大鼠脑缺血模型,造模成功后第二天开始给予地黄饮子加减方浓缩煎剂灌胃,对照组灌胃等量的生理盐水,连续7天,于最后一次灌胃后1小时取材,放射免疫法检测血浆HPA轴含量,免疫组化法检测脑组织HSP70表达。结果经地黄饮子治疗后:MCAO模型大鼠血浆皮质醇(COR)含量明显低于正常组、模型组,差异有统计学意义(P0.01),促肾上腺皮质激素(ACTH)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)含量均明显高于模型组,差异有统计学意义(P0.05);地黄饮子组较模型组脑组织的HSP70表达更为明显,差异有统计学意义(P0.01);模型组COR含量与脑组织HSP70表达存在显著的正相关关系,CRH、ACTH含量则与HSP70表达无明显相关性,地黄饮子组HPA轴各指标与脑组织HSP70表达无明显相关性。结论地黄饮子加减方可能通过纠正HPA轴的紊乱状态、提高大鼠脑组织HSP70表达等途径在脑缺血急性期发挥神经保护作用。     

人参皂苷Rb1对大鼠胎鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的：以原代培养的大鼠胎鼠海马神经细胞缺氧/缺糖再给氧为模型,观察人参皂苷Rb₁对神经细胞凋亡的抑制作用。方法：流式细胞术检测凋亡细胞百分率,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死细胞百分率,同时,测定细胞LDH的释放和NO的产生量。结果：神经细胞缺氧/缺糖5 h后再给氧可诱导神经细胞凋亡和细胞坏死,并显著增加LDH的释放和NO的产生,并随再给氧时间的延长而增加。人参皂苷Rb₁能降低神经细胞凋亡及坏死的百分率,减少LDH的释放和NO的过量产生,人参皂苷Rb₁的作用随剂量增加而作用增加。结论：人参皂苷Rb₁具有拮抗海马神经细胞凋亡的作用,这种作用可能与降低或抑制NOS活性,减少NO的过量产生有关。     

比较不同传代人骨髓间充质干细胞的生物学特性:推荐第3～6代细胞可用于临床

背景:人骨髓内间充质干细胞含量稀少,且随着年龄增加或体质衰弱细胞数量会逐渐减少,因此进行大量扩增非常必要,但目前关于扩增后各代骨髓间充质干细胞的生物学特性是否相同仍无准确定论.目的:分析比较不同传代人骨髓间充质干细胞的生物学特性,着眼于推荐其应用于临床组织工程的实际需求.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-03/10在北京中医药大学附属东直门医院骨科和中心实验室完成.材料:骨髓间充质干细胞来源于非造血系统疾病的患者骨髓,由北京中医药大学附属东直门医院骨科提供.方法:从患者髂后上棘抽取骨髓,Percoll法分离培养骨髓间充质干细胞.当细胞融合至90%以上时胰酶消化传代,定期在倒置显微镜下观察各代细胞形态变化,取第2代细胞用于指标检测.主要观察指标:细胞形态及免疫表型,MTT检测细胞活性,流式细胞仪分析细胞分裂及凋亡坏死比例.结果:传代培养的骨髓间充质干细胞形态均一,呈梭形、纺锤形,克隆样生长,培养至9代后生长减慢,并出现胞浆空泡化、胞体变大等老化现象.第2代细胞表面标志CD44,CD106,CD105均呈阳性表达,而CD34,CD45则呈阴性.骨髓间充质干细胞增殖到第9代MTT值达到最高,从第10代开始MTT值下降.细胞增殖到1 1代,分裂期细胞数量仍呈上升趋势,但从第6代开始凋亡细胞数量明显增加,第8代以后凋亡细胞数量达到60%以上.结论:通过对各代骨髓间充质干细胞生物学特性分析,推荐使用第3～6代骨髓间充质干细胞用于临床治疗使用.     

套索回归模型在中医临床研究数据的统计应用与R语言实践

目的：构建简洁且易于解释的模型,为同类研究提高模型预测的准确率提供参考。方法：从国家自然科学基金项目在研课题(81673904)中选取200例肺纤维化合并心力衰竭患者心力衰竭分级与其可能的相关因素,运用套索回归从患者的“性别”“年龄”“体质量指数”“收缩压”“舒张压”“血清总胆固醇”“空腹血糖”“舌质颜色”“舌苔颜色”“中医体质”等自变量中筛选特征变量,构建回归模型以探讨其与心力衰竭严重程度之间的关系。结果：剔除高维数据中的混杂因素,筛选特征变量,模型中包含6个特征变量,体质量指数=0.006 357 091,收缩压=0.219 695 622,血清总胆固醇=0.229 324 833,舌色红=0.004 216 705,苔色薄白=-0.825 660 057,苔色黄厚=0.356 499 153。肺纤维化合并心力衰竭出现严重心力衰竭的概率为P=-33.632+0.006×BMI+0.220×SBP+0.229×TC+0.004×是否红舌-0.826×是否薄白苔+0.356×是否黄厚苔。结论：得到的模型可用以解释严重心力衰竭发病的相关因素并推广到总体中进行预测。套索回归模型适用于中医临...     

清开灵抗内毒素所致肝细胞脂质过氧化损伤的研究

清开灵抗内毒素所致肝细胞脂质过氧化损伤的研究朱陵群，黄启福，王鸣川（北京中医药大学病理教研室北京１０００２９）关键词：清开灵注射液；内毒素；白细胞；肝细胞；脂质过氧化物自由基被认为是内毒素休克过程中的一个重要环节，其可损伤镶嵌于质膜上的蛋白质来损伤肝...