再生障碍性贫血线粒体突变与端粒长度相关性的研究

目的：研究再生障碍性贫血患者线粒体突变及端粒长度情况,了解两者间的相关性。方法选择2010~2014年确诊为再生障碍性贫血的患者45例,留取骨髓及口腔黏膜上皮标本以进行线粒体DNA ( mitochondrial DNA, mtDNA)突变和端粒长度的检测。线粒体全测序检测到了151个突变,分布在18个基因中,其中包括了40个沉默突变及28个框移突变。同时使用HBG作为内参基因,检测了再障患者和健康志愿者端粒的相对长度( relative T/S value,端粒长度)。结果分析发现非沉默突变的mtDNA突变与白细胞数、血红蛋白水平及血小板数成负相关。端粒长度与白细胞数、血红蛋白水平及血小板数成正相关性,而且非沉默突变的mtDNA突变与端粒长度呈负相关性。结论研究提示突变导致线粒体氧化呼吸链功能紊乱及端粒的缩短是再障患者骨髓衰竭病程中的一个重要因素,而且这两者还会互相影响。     

中药复方对急性髓系白血病干细胞的影响

背景：白血病的发生发展、治疗耐药和容易复发的根本原因在于白血病患者体内存在一群白血病干细胞。目的：观察中药复方对急性髓系白血病干细胞的影响。方法：30例患者骨髓进行免疫磁珠分选白血病干细胞CD34＋CD38-,将所得每例白血病干细胞细胞混悬液分成2组：对照组不加药物,实验组加入中药复方制剂,终浓度为100mg/L。结果与结论：中药复方对于白血病干细胞的抑制率为（36.660±0.018）%,核转录因子κB在22例标本中有表达,阳性率73.33%（22/30）。电泳迁移率检测核转录因子κB活性,通过凝胶成像系统分析DNA蛋白质结合条带灰度值的比较,实验组核转录因子κB活性低于对照组（P〈0.05）。结果表明,中药复方可干预白血病干细胞的生长状态,可能是通过抑制核转录因子κB活性实现的。     

急性淋巴细胞白血病并发自身免疫性溶血性贫血一例

患者,女,73岁.因"黄疸、间断发热半个月"于2011年5月24日入院.既往有2型糖尿病史6年;脑梗死病史10余年,无后遗症;有贫血史,患者及其家属未能详述.查体:体温36.5℃,神志清,精神差,重度贫血貌,全身皮肤及巩膜黄染,无出血点,浅表淋巴结未触及肿大,胸骨无压痛,心肺未见异常,腹软,肝脾肋缘下未触及.     

从母系遗传研究肾阴虚型慢性再生障碍性贫血的发病机制**☆

背景：多项研究表明恶性血液病可以出现线粒体的突变,但尚未有关于慢性再生障碍性贫血中线粒体变化的研究。目的：研究肾阴虚和肾阳虚型慢性再生障碍性贫血患者线粒体突变情况,探讨母系遗传的本质——线粒体与肾阴虚型慢性再障发生、发展的关系,以期进一步研究慢性再障的发病机制。方法：收集10例诊断明确的肾阴虚型5例肾阳虚型慢性再生障碍性贫血患者骨髓和口腔黏膜上皮,提取DNA,进行线粒体DNA的全测序,比较线粒体基因。结果与结论：肾阴虚型慢性再生障碍性贫血患者线粒体全测序表明许多患者的突变位点发生在与线粒体氧化呼吸链密切相关的区域,涵盖了还原态烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶1~2、4~6,细胞色素B等多个线粒体DNA的编码基因。而肾阳虚型慢性再生障碍性贫血患者线粒体突变不明显。提示线粒体基因突变引起的呼吸链酶复合体表达水平的改变,造成细胞能量代谢障碍,可能在造血干细胞衰竭的发生发展中起到关键作用。而这一变化是与肾阴虚——母系遗传息息相关的。     

从端粒-端粒酶致衰老学说和"肾为先天之本主骨生髓"理论探讨慢性再生障碍性贫血的发病机制

慢性再生障碍性贫血(慢性再障)是血液系统常见疾病,以贫血、出血、感染为主要临床表现,近年来的发病率逐渐上升,严重危害人类特别是青壮年的健康.近年研究发现,慢性再障的骨髓细胞中端粒缩短,并发现约有10%患者有端粒酶突变,从而提出染色体端粒长度的改变、端粒酶突变以及端粒酶活性的丧失影响了骨髓干细胞的衰老过程从而导致慢性再障的发生.     

陈泽涛教授应用柴胡剂治疗老年失眠临证经验

陈泽涛教授在多年诊治老年病的基础上总结认为,老年人具有独特的生理特点,常出现虚实夹杂以虚为主、多瘀多痰的疾病特征,而失眠是老年人常见病症,应用经方对难治性的失眠具有良好的效果,文章总结陈泽涛教授基于和解少阳治疗老年失眠的临证经验。     

益气养阴方及其拆方影响急性髓细胞白血病细胞Flt3和N-ras表达研究

目的研究益气养阴方及其拆方后的扶正方、祛邪方对Flt3和N-ras在人急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)表达的影响,探讨益气养阴方治疗白血病的作用机制。方法收集60例AML患者骨髓单个核细胞,将所提取每例患者的细胞混悬液分成4组:对照组不加药物,实验组分别加入益气养阴方、扶正方、祛邪方中药制剂。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),免疫印迹法(Western bloting)观察益气养阴组、扶正组、祛邪组及对照组对Flt3、N-ras基因及FLT3蛋白表达的影响。结果 RT-PCR法检测:对照组、益气养阴组、扶正组、祛邪组Flt3基因表达率分别为(90.78±6.92)%、(38.18±4.50)%、(65.57±5.55)%、(61.35±6.39)%,N-ras基因表达率分别为(93.28±5.54)%、(34.38±6.69)%、(59.42±7.35)%、(65.28±7.64)%,益气养阴组、扶正组、祛邪组与对照组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。Westernbloting检测:对照组、益气养阴组、扶正组、祛邪组FLT3蛋白灰度值分别为0.8127±0.0284、0.4265±0.0353、0.5396±0.0274、0.5473±0.0282,对照组与益气养阴组、扶正组、祛邪组比较差异有统计学意义(P0.01)。结论中药益气养阴方可抑制AML细胞的克隆性增殖,可降低Flt3和N-ras在AML细胞的表达水平,对AML治疗具有作用。     

Role of Heteroplasmic Mutations in the Mitochondrial Genome and the ID4 Gene Promoter Methylation Region in the Pathogenesis of Chronic Aplastic Anemia in Patients Suffering from Kidney Yin Deficiency

Objective: To analyze changes in gene amplification in the mitochondrial genome and in the ID4 gene promoter methylation region in patients with chronic aplastic anemia(CAA) suffering from Kidney(Shen) yin deficiency or Kidney yang deficiency. Methods: Bone marrow and oral epithelium samples were collected from CAA patients with Kidney yin deficiency or Kidney yang deficiency(20 cases). Bone marrow samples were collected from 20 healthy volunteers. The mitochondrial genome was amplified by polymerase chain reaction(PCR), and PCR products were used for sequencing and analysis. Results: Higher mutational rates were observed in the ND1–2, ND4–6, and CYTB genes in CAA patients suffering from Kidney yin deficiency. Moreover, the ID4 gene was unmethylated in bone marrow samples from healthy individuals, but was methylated in some CAA patients suffering from Kidney yin deficiency(positive rate, 60%) and Kidney yang deficiency(positive rate, 55%). Conclusions: These data supported that gene mutations can alter the expression of respiratory chain enzyme complexes in CAA patients, resulting in energy metabolism impairment and promoting the physiological and pathological processes of hematopoietic failure. Functional impairment of the mitochondrial respiration chain induced by gene mutation may be an important reason for hematopoietic failure in patients with CAA. This change is closely related to maternal inheritance and Kidney yin deficiency. Finally, these data supported the assertion that it is easy to treat disease in patients suffering from yang deficiency and difficult to treat disease in patients suffering from yin deficiency.     

RT-PCR法检测白血病干细胞Flt3和N-ras基因的表达

目的：采用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）法检测益气养阴方及其拆方后的扶正方组、祛邪方组急性白血病干细胞Fh3和N-ras基因的表达,以期阐明Flt3和N-ras基因表达与疾病发生、发展的关系。方法：RT-PCR法检测中药益气养阴方组、扶正方组、祛邪方组及对照组AML患者骨髓单个核细胞Fh3和N-ras基因表达的情况。结果：Fh3和N-ras基因表达阳性率益气养阴组、扶正组、祛邪组与对照组比较,差异有显著性意义（P均〈0．01）;益气养阴组与扶正组和祛邪组比较,差异有显著性意义（P均〈0．01）;扶正组与祛邪组比较,差异无显著性意义（P〉0．05）;各FAB亚型AML间Fh3与N-ras表达阳性率比较,差异无显著性意义（P〉0．05）。结论：中药益气养阴方可降低Flt3和N-ras基因在AML细胞的表达水平,抑制AML细胞的克隆性增殖,对AML具有治疗作用。     

白血病干细胞与SDF-1/CXCR4生物学轴关系的研究进展

急性髓细胞性白血病是造血干细胞克隆性增殖的肿瘤性疾病,其发病机制至今仍不十分清楚,而且髓外浸润和侵袭仍是导致复发和病人死亡的重要原因之一。因此,有关急性白血病发生、发展和髓外浸润的机制和相应的治疗学研究成为当今血液学研究的重点和难点之一。已有的研究表明,基质细胞衍生因子1(SDF-1)及其特异性受体CXCR4所组成的SDF-1/CXCR4轴可通过改变白血病骨髓造血微环境,在白血病细胞的增殖、耐药、浸润中发挥一定的作用。本文重点探讨SDF-1/CXCR4轴在白血病干细胞迁移与归巢中的作用。