角膜内皮细胞改良培养技术的初步探讨

目的 评价角膜后弹力层撕除联合酶消化法分离角膜内皮细胞的效率,分析细胞体外生长的生物学特性.方法 将兔角膜带有内皮细胞的后弹力层完整撕下,用胰蛋白酶-EDTA联合酶消化,纯化的角膜内皮细胞进行体外培养.观察细胞形态,用神经元烯醇化酶抗体进行细胞表型鉴定.苏木精-伊红染色以及茜素红-台盼蓝联合染色分析细胞活性,流式细胞仪检测细胞体外生长过程中Anne xiv-PE的表达情况,透射电镜和扫描电镜进行细胞超微结构形态的观察.结果 带角膜内皮细胞的后弹力层撕除联合酶消化法可快速获得大量纯化的角膜内皮细胞,快速贴壁生长并增生,体外培养3～4d即融合成单层细胞,且表达神经元烯醇化酶抗体阳性,苏木精-伊红染色及活性染色提示细胞功能良好,Annexiv-PE抗体表达水平微弱.结论 角膜后弹力层撕除联合酶消化法可提高角膜内皮细胞的获取和培养效率,为工程化角膜内皮移植膜的构建提供稳定的种子细胞来源.     

腹泻治疗的体会

难治性腹泻是指长期、反复或短期内大量腹泻，用一般止泻药物难以控制者。病因广泛，由细菌、病毒、原虫感染、吸收不良、过敏、缺血、各种理化因素及类癌综合症等。临床上常见以下四种类型，分述如下。 1、分泌性腹泻：病因多因为小肠或结肠疾病，肠道细菌外毒素、类VIP多肽、甲状腺髓样癌分泌前列腺素、降钙素及5一羟色胺等。     

新生儿化脓性脑膜炎38例临床分析

分析 38例新生儿化脓性脑膜炎。结果 :男婴发病率明显高于女婴 ,男∶女为 3.75∶1。病儿有明显感染病灶占73 .7% ,同时伴有产科高危因素。早期新生儿发病率、病死率高 ,分别为 6 5 .8%、32 %。早期诊断早期治疗效果满意     

双骨瓣成形在乙状窦前入路脑肿瘤切除术中的应用(附14例报告)

目的探讨经岩骨-乙状窦前入路切除岩斜区肿瘤双骨瓣成形的临床效果。方法对14例岩斜区肿瘤采用经岩骨-乙状窦前入路行肿瘤切除双骨瓣成形术,先取颞枕游离骨瓣(乙状窦后),再通过磨钻,游离出乳突表面骨瓣(乙状窦前)。保留骨性半规管、耳蜗的完整性,避免将乳突及岩骨根部大部分切除。结果肿瘤全切除8例,次全切除3例,部分切除3例。术后2例脑脊液耳漏,无皮下积液、颅内感染等并发症,无死亡。14例术后3、6个月随访,无并发症发生。结论经岩骨-乙状窦前入路手术中采用双骨瓣成形术后脑脊液漏、皮下积液、颅内感染等并发症少,手术创伤小,安全性高。     

针对TGF-β-SMAD信号传导机制预防瘢痕增生的研究进展

TGF-β是目前已知的最强烈的纤维化促进因子,与创伤后瘢痕增生关系十分密切[1],TGF-β与相应的受体结合后产生信号,通过SMAD信号传导蛋白将信号由胞质传导到细胞核内,作用于相应的靶基因产生作用,刺激血管生成和成纤维细胞增殖,促进成纤维细胞合成胶原等细胞外基质(ECM)成份,同时它还能抑制基质金属蛋白酶活性,减少ECM的降解,导致其过度沉积.此外,TGF-β还介导其他细胞因子的致纤维化作用[1-3].从理论上来讲,任何能阻碍TGF-β-SMAD信号传导的方法均能抑制瘢痕的形成.对此,人们进行了大量的研究试图抑制TGF-β的促细胞分裂作用,阻断其与受体结合,调控SMAD蛋白的信号传导,以达到从根本上预防瘢痕增生的目的.     

产伤股骨干骨折的治疗分析

我院自1987～1997年,收治了新生儿产伤股骨干骨折8例,疗效满意,报告如下: 1 临床资料 1.1 一般资料:本组8例,男5例,女3例;左侧4例,右侧4例;骨折确诊时间:新生儿刚娩出4例,1天后1例,2天后1例,5天后1例,7天后1例。骨折类型:横形骨折3例,斜形骨折2例,螺旋形骨折2例,青枝骨折1例;骨折部位:股骨上1/3 4例,中1/3 3例,下1/3 1例。胎位:全臀位3例,单臀位3例,足位2例。分娩方式:剖宫产3例,经产道分娩5例。 1.2 治疗方法:全部采用非手术疗法。Crede氏法治疗2例,即把患儿伤肢过度屈曲,贴住胸腹部前方,该足搁于肩上,用绷带将躯干和伤肢一起固定起来。圆形纸板固定青枝骨折1例。Bryant氏垂直悬     

吗啡联合新斯的明用于小儿术后硬膜外镇痛

观察小儿术后硬膜外注入不同剂量的吗啡和新斯的明的镇痛效果及不良反应,以期使药物之间能扬长避短,充分发挥最佳作用,最大限度地降低不良反应,更利于术后患儿的恢复。1资料与方法1.1一般资料:选择60例ASAⅠ～Ⅱ级,年龄6～12岁的患儿。随机将其分为3组,每组20例。Ⅰ组,吗啡0.02mg·kg-1,Ⅱ组,新斯的明0.02mg·kg-1,Ⅲ组吗啡0.02mg·kg-1加新斯的明0.02mg·kg-1,以上各组容积均为5ml,以生理盐水为溶剂。     

SiO2-Pickering乳液佐剂增强沙眼衣原体Pgp3蛋白免疫效果

目的优化二氧化硅(SiO₂)Pickering(SPE)乳液佐剂,研究其对沙眼衣原体(Ct)Pgp3蛋白的免疫增强效应,为预防Ct感染性疾病提供实验依据。 方法优化SiO₂质量浓度、水油比及超声功率,超声乳化制备SPE佐剂。30只小鼠均分为SPE+Pgp3组(Pgp3蛋白和SPE混合免疫)、Pgp3组(Pgp3蛋白单独免疫)和PBS组。ELISA检测各组小鼠血清抗体水平和脾细胞上清细胞因子水平,流式细胞术检测脾细胞γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平。 结果SPE最优制备条件为超声功率337 W、水油比10∶2、SiO₂质量浓度1 g/L,最优条件下SPE直径为(300.12±44.26) nm,聚合物分散性指数为0.33±0.12。除PBS组外,其他组均检测到了特异性抗体,SPE+Pgp3组总抗体IgG及其亚类IgG1、IgG2a抗体水平高于Pgp3组,且以IgG2a升高为主(P＜0.05)。SPE+Pgp3组、Pgp3组脾细胞IFN-γ和刺激指数高于PBS组,且SPE+Pgp3组高于Pgp3组(P＜0.05)；IFN-γ主要由CD4＋T细胞和CD8＋T细胞分泌。各组IL-4含量均较低。 结论SPE乳液佐剂具有良好的佐剂效应,能有效增强Pgp3蛋白体液免疫和细胞免疫,且可优势诱导Th1型免疫反应。