环氧合酶抑制剂NS-398增强放射诱导的肝癌细胞凋亡

目的：探讨环氧合酶-2（COX-2）选择性抑制剂NS-398对放射诱导的人肝癌细胞HepG2凋亡的影响及可能作用机制。 方法:应用MTT 法检测NS-398对细胞的抑制率;透射电子显微镜观察细胞凋亡的形态学变化,流式细胞术(FCM)定量检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因bcl-2、bax及caspase-3 mRNA表达;Western blotting检测Bc1-2、Bax蛋白表达;比色法分析caspase-3酶活性变化。 结果:NS-398对HepG2细胞的生长抑制作用呈时间与剂量依赖性;电镜下处理组细胞呈现典型的凋亡形态学变化,NS-398显著增加放射诱导的细胞凋亡,上调bax mRNA、Bax蛋白及caspase-3mRNA 表达,并增强caspase-3酶活性,而Bcl-2 表达无明显变化（P>0.05）。 结论:NS-398能增加放射诱导的HepG2细胞凋亡,其机制可能与上调Bax、 caspase-3表达,上升Bax／Bcl-2比例,激活线粒体凋亡通路,活化caspase-3,最终诱导细胞凋亡相关。     

应用荧光原位杂交技术检测肺癌患者染色体数目的改变

目的应用荧光原位杂交(FISH)技术研究肺癌患者染色体数目改变及其意义。方法用人的全套染色体特异探针与肺癌患者中期染色体进行杂交检测。结果肺癌患者细胞为异倍体,染色体数目以亚二倍体居多,常见2、5、7、8、10、11、14和17号染色体增多及1、4号染色体的丢失。结论 FISH技术可检测肺癌患者染色体数目的改变,肺癌遗传学变异主要是2、5、7、8、10、11、14、17号染色体的增加,并对肺癌的发生、发展和预后有一定的提示作用。     

生长分化因子-15在慢性乙型肝炎和肝硬化中的表达

生长分化因子-15（GDF-15）又称巨噬细胞抑制因子-1（MIC-1），是转化生长因子-B（TGF-B）超家族成员之一。     

粉防己碱:一种治疗支气管哮喘的双苄基异喹啉类生物碱

支气管哮喘(简称哮喘)是一种常见的气道过敏性疾病,以气道炎症、气道高反应性和气道重塑为主要临床特征.中药粉防己碱是从防己科植物粉防己根中提取的一种双苄基异喹啉类生物碱,具有抗炎、抗过敏、抗氧化、抗纤维化及免疫调节作用.本文将就粉防己碱治疗哮喘的研究进展作一综述.     

HBsAg基因与细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4单链抗体的真核质粒载体构建及表达蛋白活性鉴定

目的 构建HBsAg基因(HBV S)与抗鼠细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)单链抗体(ScFv)的真核质粒载体,并检测融合表达蛋白特异性抗原的结合活性.方法 将CTLA-4单链抗体的真核表达质粒pSect2/ScFv4F10及含HBV S基因的质粒pSect2/S分别经SfiI和HindⅢ双酶切后,S基因片段进一步克隆至质粒pSect2/ScFv4F10中.将质粒pSect2/ScFv40、pSect2/S-ScFv4F10转染中华仓鼠卵巢细胞,Western印迹法检测目的蛋白的表达.将表达的蛋白经超滤浓缩与亲和层析纯化后,分别通过竞争抑制ELISA和表面等离子共振(SPR)技术,检测其与重组小鼠CTLA-4抗原的结合活性及亲合常数.采用One-way ANOVA比较组间差异.结果 成功构建可稳定表达S-ScFv4F10蛋白的真核质粒载体pSect2/S-ScFv4F10.十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western印迹法检测表明,其表达蛋白的相对分子质量约为52×103.当将抗鼠CTLA 4的亲本单链抗体4F10浓度固定时,其与CTLA-4纯化抗原混合反应的吸光度(A)570值随ScFv融合蛋白比例的减少而逐步增大;且当ScFv、S-ScFv4F10与4F10单链抗体以摩尔比为2∶1混合时,其对4F10结合抗原的竞争抑制率分别可达到72.6％和64.5％;亲本单链抗体、ScFv4F10、S-ScFv4n0与重组CTLA-4抗原的结合平衡常数KA值分别为7.29×108mol/L、9.52×106mol/L和2.04×106mol/L,解离平衡常数KD分别为1.40×10-9mol/L、1.05×10-7mol/L和4.91×10-7mol/L.结论 成功构建了HBV S基因与CTLA-4单链抗体ScFv4F10的真核表达质粒载体pSect2/S-ScFv4F10,其表达的蛋白与CTLA-4抗原具有一定的亲和活性.     

TSLP基因多态性与支气管哮喘遗传易感性的关系

支气管哮喘（简称哮喘）是多基因参与的具有遗传易感性的慢性气道变应性炎症。胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）是一种由上皮细胞产生的白介素7样细胞因子,与靶细胞TSLP受体相互作用,激活骨髓源性树突状细胞,并诱导一种特殊类型的炎症性Th2免疫应答,参与哮喘的发生和发展。TSLP还可通过调节核因子κB,参与哮喘的发病过程。多数家系聚集、孪生和大的遗传队列研究均证明,哮喘存在遗传易感性。靶向TSLP有望为今后哮喘免疫治疗带来新的前景。     

胸腺基质淋巴细胞生成素在哮喘Th2优势免疫中的作用

支气管哮喘（简称哮喘）是以树突状细胞（DC）介导的Ⅱ型辅助性T细胞（Th2）优势免疫为特征的慢性气道炎症性疾病。哮喘气道产生大量的促炎症细胞因子,募集嗜酸粒细胞、肥大细胞和淋巴细胞等炎症细胞,释放一系列炎症因子,引起气道炎症、黏膜水肿、黏液分泌和血管扩张等过敏症状。     

布地奈德抑制支气管哮喘小鼠TSLP及Th2优势免疫作用的研究

目的:研究布地奈德抑制哮喘小鼠Th2优势应答的作用及其机制?方法:选择24只6周龄SPF级BALB/c小鼠,随机分为3组:正常对照组?哮喘模型组?布地奈德组,每组8只?卵白蛋白(OVA)致敏和激发制作哮喘模型?小鼠末次雾化吸入激发24 h后,采用小鼠肺功能仪检测气道对乙酰胆碱(Ach)的阻力;苏木精-伊红(HE)染色观察气道炎症浸润情况;支气管肺泡灌洗液(BALF)瑞氏染色计数嗜酸性粒细胞百分比;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清总IgE?BALF液中白细胞介素4(IL-4)和IL-13;免疫印迹(Western blot)测定肺组织胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)表达水平?结果:与正常对照组比较,哮喘模型组气道阻力?气道炎症?血清总IgE?BALF中Th2细胞因子(IL-4?IL-13)以及肺组织TSLP蛋白表达明显增高(P < 0.05)?与哮喘模型组比较,布地奈德组各项观测指标均明显降低(P < 0.05)?结论:布地奈德通过降低肺组织TSLP表达?抑制Th2细胞因子水平而降低哮喘气道炎症和气道高反应性,可能是糖皮质激素治疗哮喘的重要机制?