NF-kB核酸对大鼠血管平滑肌细胞炎症反应和凋亡的影响

目的 探讨NF-kB核酸对增殖的血管平滑肌细胞炎症反应和凋亡的影响。方法大鼠胸主动脉平滑肌细胞传代培养，实验共分六组。阳离子脂质体转染法将NF-kB寡核苷酸导人血管平滑肌细胞，检测细胞凋亡、细胞内NF-kBp65基因表达以及ICAM-1、VCAM-1、MCP-1蛋白合成情况。结果血管平滑肌细胞转染NF-kB反义或诱骗寡核苷酸后．细胞凋亡增强，凋亡时间延长。反义组NF-kBp65蛋白质表达较正义组降低（P〈0．05）；反义＋诱骗联合干预并未优于反义组单独治疗，但与诱骗组相比NF-kBp65的蛋白质表达降低（P〈0．05）。反义组、诱骗组的ICAM-1、VCAM-1、MCP-1蛋白质表达较相应的对照正义组、诱骗对照组均降低（P〈0．05）。结论 NF-kB的反义和诱骗寡核苷酸均能抑制血管平滑肌细胞ICAM-1、VCAM-1、MCP-1的蛋白质表达，抑制血管平滑肌细胞增殖，使细胞凋亡增强；NF-kB反义寡核苷酸及反义＋诱骗寡核苷酸联合干预可减少NF-kB生成。     

经膀胱远端输尿管切除术根治肾盂输尿管癌9例

目的 探讨经膀胱远端输尿管切除术在治疗肾盂、输尿管癌中的应用价值。方法 肾切除后,从远端输尿管放置输尿管导管入膀胱,然后经膀胱将输尿管内翻套叠于膀胱,用电刀切除远端输尿管及输尿管口周围部分膀胱壁。采用此法治疗9例肾盂癌。结果 9例术后无感染、尿瘘等并发症,亦无明显出血。经平均186个月随访,未发现环切口肿瘤种植,亦未发现膀胱其他部位发生肿瘤。结论 此手术方法操作简单,易于掌握,无需特殊设备,且并发症少,效果好,是治疗肾盂及上段输尿管肿瘤的有效手术方法之一。     

冻干血小板功能的体外评价

目的评价冻干血小板的体外功能。方法将经过可逆性激活抑制、添加DMSO和海藻糖等低温保护剂、冷冻干燥后获得的血小板再水化,与新鲜血小板比较,应用流式仪检测分析其CD62p和PAC-1的表达,评价血小板活化状态和血小板反应能力;应用APACT检测诱导剂诱导的血小板最大聚集率并用SPAT评价血小板聚集和促凝血活性;应用扫描电镜和透射电镜技术研究血小板的形态和超微结构的变化。结果经过血小板激活抑制剂和冻干保护剂预处理的冻干血小板,再水化后对凝血酶的最大聚集率(79.0%)与对照组(86.2%)差异无统计学意义(P>0.05),对ADP和没食子酸诱导的聚集反应比对照分别降低49.34%和26.25%;经凝血酶激活后CD62p再表达率为50.88%略低于对照组70.32%(P<0.05),PAC-1再表达率为54.55%与对照组63.38%无明显差异;促凝血功能SPAT检测结果69.4 s与对照组70.6 s差异无统计学意义(P>0.05)。结论经过冷冻干燥保护剂和血小板激活抑制剂预处理后获得的冻干血小板,体外聚集活性和促凝血功能接近新鲜血小板。     

超纯水对维持血液透析患者微炎症状态的影响

目的：探讨超纯水对维持血液透析患者微炎症状态的影响。方法：观察在透析机安装超纯净过滤系统前后患者一般情况和C-反应蛋白的差异。结果：改用超纯透析用水后CRP水平显著下降（P〈0.05）,食欲改善,精神好转,炎症反应减轻。结论：超纯水能有效干预维持性血液透析患者的微炎症,改善营养状况。     

持续等速被动运动对脑卒中患者下肢表面肌电的影响

目的：研究持续踝关节等速被动运动对脑卒中患者下肢表面肌电及肌痉挛的影响。方法：15例脑卒中患者（观察组）均有瘫痪侧痉挛性足下垂，将观察组患者患侧与15例正常人（对照组）对应侧踝关节进行持续等速被动运动，时间分别为5、10min，角速度为5&#176;／s，于运动前后测定双下肢在直腿坐位、踝关节被动90&#176;时的腓肠肌表面肌电均方根值（RMS）和综合痉挛量表评分（CSS）；并进行分析与比较。结果：持续等速被动运动前，观察组运动5、10min时腓肠肌RMS值明显高于对照组（3．0&#177;1．4，3．4&#177;1．8与1．8&#177;0．9，1．7&#177;0．8，P〈0．01），运动后均明显低于治疗前（1．8&#177;0．8、1．9&#177;1．0，P〈0．01）。观察组运动5、10min时CSS评分与治疗前比较明显下降（12．1&#177;3．3、12．2&#177;2．0与14．5&#177;1．7，P〈0．01，0．05）。观察组运动5与10minRMS值及CSS评分均差异无显著性意义。结论：持续等速被动运动能有效缓解脑卒中患者腓肠肌肌痉挛，改善踝关节运动功能，表面肌电可作为评定肌痉挛状况的量化指标，具有临床使用价值。     

1例Switch手术后的早期护理

Switch手术2000年后开始在国内开展,相关报道较少。我院2006年成功地为1例3m患儿实施了Switch手术,术后早期严密监测血流动力学心功能变化,加强呼吸道的管理,特别是对肺高压、左心功能不良所造成的呼吸功能不全、痰特别多采取的吸痰三步骤,十分有效,而且早期的微量营养的方法对增强抵抗力,争取尽早撤机拔管都起到了积极作用。     

肺良性有神经内分泌瘤特征的硬化性血管瘤1例

患者女性 ,4 5岁。行全消化道钡餐造影检查时 ,发现右肺中叶有一孤立的境界清楚的高密度结节影 ,2 5cm× 2cm大小。临床诊断 :良性病变 ,考虑结核瘤。 1年后CT复查 ,病灶无明显变化。腹腔镜右肺中叶切除术 ,组织送检。病理检查　巨检 :右肺组织一叶 ,表面光滑无粘连 ,切面于右肺叶正中见一 2 5cm× 2cm卵圆形肿物 ,边界清楚 ,灰白与紫褐色相间 ,少部分区域呈海绵状 ,挤压时有血性液体流出。镜检 :肿瘤细胞位于肺间质内 ,圆形、多边形及卵圆形细胞 ,大小一致 ,核染色质呈细颗粒状 ,有小核仁。胞质淡嗜酸或透明 (图 1) ,无核分裂象 ,未见坏…     

血小板冻干保存的研究进展

冻干是保存血小板最理想的方法，能常温保存、占用空间小、重量轻和便于运输等，可解决目前血小板保存和运输方面存在的局限性问题。然而冻干除引起血小板膜结构损伤、蛋白质变性甚至死亡之外．还可致血小板激活损伤，冻干所致的血小板激活与膜通道脂质发生相变有关。针对损伤机制应用各种保护剂可减少冻干损伤．目前已有研究通过海藻糖的载入，在实验室成功地进行了血小板的冻干保存，冻干再水化后血小板仍具有正常生理功能和存活能力。这些研究结果表明血小板的冻干保存可应用于将来的血库和临床输血。本文综述了冷冻干燥对血小板损伤作用、保护剂在血小板冷干研究中的应用及血小板冻干保存的实验研究。     

粉尘螨变应原点刺液在皮肤点刺试验中的应用价值

摘要：目的 评估北京协和医院（ＰＵＭＣＨ）粉尘螨变应原点刺液在使用皮肤点刺试验（ＳＰＴ）方法诊断粉尘螨过敏症中的准确 性和安全性。 方法 连续纳入 ２０１５ 年 ８ 月 １０ 日至 ２０１７ 年 ８ 月 ３０ 日在 ＰＵＭＣＨ 变态（过敏）反应科门诊确诊变应性疾病的 ９１０ 例受试者。 使用 ＰＵＭＣＨ 粉尘螨变应原点刺液对所有受试者进行 ＳＰＴ，用荧光酶联免疫方法检测血清粉尘螨特异性免疫 球蛋白 Ｅ（ｓＩｇＥ）。 通过受试者工作特征曲线（ＲＯＣ 曲线）分析诊断准确性，诊断金标准为 ｓＩｇＥ 阳性。 同时对不同诊断切点的 准确性进行分析。 该点刺液的安全性通过记录患者不良反应实现。 结果 本研究无脱落病例。 全分析集（ＦＡＳ）、符合方案集 （ＰＰＳ）、安全集（ＳＳ）分别为 ８７１ 例、６７０ 例和 ９１０ 例。 ＲＯＣ 曲线下面积分别为 ０．９０２（ＦＡＳ）和 ０．９１５（ＰＰＳ）。 在 ＰＰＳ 中，使用点 刺液诊断粉尘螨过敏的最佳诊断切点为平均风团直径 ３．２５ ｍｍ，敏感性为 ８５．７７％（９５％置信区间：８２．７１％ ～ ８８．８４％），特异性 为 ８６．５５％（９５％置信区间：８１．４４％ ～ ９１．６６％）。 ９５％特异性的诊断切点为平均风团直径 ４．２５ ｍｍ。 ＳＳ 中未有不良反应事件发 生。 结论 ＰＵＭＣＨ 粉尘螨变应原点刺液在 ＳＰＴ 中具有较高的敏感性和特异性，且安全性高，对粉尘螨过敏症的诊断具有较 高的应用价值。     

核因子κΒ对血管成形术后平滑肌细胞增殖和新生内膜形成的影响

背景：血管壁机械性损伤后的炎症和增殖效应是血管再狭窄的主要原因。核因子κΒ／Rel家族中的核因子κΒ在多种细胞类型中表达。激活一系列与血管壁病理生理相关的靶基因。 目的：探讨核因子κΒ的反义和诱骗性寡核苷酸对血管平滑肌细胞增殖以及大鼠颈动脉球囊损伤后血管新生内膜和单核细胞化学趋化因子的作用。 设计：随机对照动物实验。 单位：上海交通大学医学院附属瑞金医院心内科。 材料：3个月龄雄性SD大鼠126只，350-380g。引物合成和寡核苷酸合成：根据文献及国际互联网cDNA文库检索、设计，由上海生物工程公司合成；寡核苷酸合成：全硫代修饰。由上海生物工程有限公司合成。方法：实验于2001-05/2003-03在上海交通大学医学院细胞生物学实验室和瑞金医院心血管实验室完成。采用贴块法原代培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞，实验选用3～5代血管平滑肌细胞。检测增殖的平滑肌细胞内增殖细胞核抗原和核因子κΒ蛋白水平。制作大鼠血管球囊损伤模型。SD大鼠随机分为7组．正常组：除球囊损伤外．其余手术操作同其他组相同；反义组；正义组；诱骗组；Scramble组；反义＋诱骗组；模型组。每组分为6个时相点（6h,1,3,5,7,14d），每个时相点3只大鼠。检测血管球囊损伤后新生内膜形成以及单核细胞化学趋化因子1、核因子κΒp65和ERK2的表达水平。 主要观察指标：①核因子κΒp65寡核苷酸对血管平滑肌细胞增殖的效应。②核因子κΒp65基因表达定位和蛋白合成。③大鼠颈动脉球囊损伤后病理形态学改变。④单核细胞化学趋化因子1mRNA表达。⑤免疫组织化学检测球囊损伤后血管壁单核细胞化学趋化因子1的蛋白质表达。⑥We8lemblol检测球囊损伤后血管壁核因子KBp65．ERK2的蛋白合成。 结果：①增殖的平滑肌细胞内增殖标记物增殖细胞核抗原表达增加。②增殖的平滑肌细胞浆、细胞核内均有核因子κΒp65的基因表达；核因子κΒp65蛋白水平增加。观察核因子κΒp65基因表达水平，反义核酸组较对照正义组降低53．66％，诱骗性寡核苷酸组较诱骗对照组降低57．35％．差异均有统计学意义（P〈0．05）。③核因子κΒ反义和诱骗寡核苷酸抑制增殖细胞核抗原表达，较阳性对照组分别降低45．12％，45．05％。④大鼠血管球囊损伤后第5天。正义组、诱骗对照组、模型组内膜面积、中膜面积、内膜，中膜比值显著升高（P〈0．05），7d后达到高峰。反义组、诱骗组显著降低内膜与中膜比值，反义＋诱骗组较单独应用无统计学意义的降低效应。⑤反转录-聚合酶链反应显示球囊损伤后6h．单核细胞化学趋化因子1mRNA表达明显增加，1d后表达减少．3,5，7,d单核细胞化学趋化因子1mRNA持续而明显的表达增强．14d后略为降低。反义组、诱骗组、反义＋诱骗组在各时间点均能减少叽核细胞化学趋化因子1mRNA表达。⑥Westem Blot检测显示血管球嚏损伤后6h，核因子κΒp65、ERK2蛋白表达微弱。1d后ERK2蛋白表达略增强。核因子κΒ的蛋白合成明显增强。7d后p65，ERK2的蛋白合成达到高峰。第14天，ERK2与p65的蛋白合成较第7天减弱。反义组、诱骗组、反义＋诱骗组较模型组、正义组、诱骗对照组各时相点蛋白合成均减弱。结论：增殖的平滑肌细胞核因子κΒp65基因表达增加。核因子κΒ调控单核细胞化学趋化因子1的基因表达和蛋白质水平。血管球囊损伤后，血管平滑肌细胞增殖有动态性变化。局部转染核因子κΒ反义和诱骗寡核苷酸能抑制所调控靶基因表达。