顺铂诱导人小细胞肺癌细胞系NCI-H446细胞的凋亡

背景与目的:近年的研究表明,诱导细胞凋亡是多种作用于核酸代谢不同环节的化疗药物抗肿瘤的重要机制。但顺铂杀灭人小细胞肺癌(SCLC)细胞的药物效应除了损伤其DNA外,诱导该类恶性肿瘤细胞凋亡是否是其杀灭细胞的重要机制尚无相应研究。基于此,本研究旨在探讨顺铂诱导人SCLC细胞系H446细胞凋亡的机制及其在SCLC化疗中的作用。方法:分别采用形态学观察、流式细胞仪分析技术和原位DNA断裂点的末端标记法,检测顺铂诱导H446细胞的凋亡作用。结果:终浓度分别为0.1、0.5、1.0、2.0、5.0μg/m l的顺铂均可诱导H446细胞凋亡,且呈浓度依赖性(处理48 h时,其凋亡指数分别为1.47±0.03、8.28±0.54、11.02±1.05、12.74±1.08、27.16±1.15);终浓度为2μg/m l的顺铂在24~72 h持续诱导细胞凋亡且诱导凋亡作用逐渐增强,呈时间依赖性;终浓度为5μg/m l的顺铂可阻滞H446细胞于细胞周期的S期,终浓度<5μg/m l顺铂可阻滞H446细胞于细胞周期的G2期和S期。结论:诱导细胞凋亡可能是顺铂抗肿瘤作用的重要机制。     

我院门诊药房新型调剂模式的实践与思考

目的:探求提高门诊药房工作效率和工作质量的调剂模式。方法:介绍我院门诊药房“按清单摆药”模式的硬、软件构成和运转情况,并与传统模式比较,分析其优劣。结果与结论:该摆药模式提高了门诊药房调剂工作的效率和质量,值得在大、中型医院推广。     

低氧诱导大鼠外周血单核细胞表达TNF-α与PKC膜易位及活性变化关系的研究

目的研究低氧诱导大鼠外周血单核细胞（peripheral blood monouclear cells,PBMCs）膜内PKC膜易位及活性变化对肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达的作用,探讨缺氧与全身炎症反应综合征（system inflammation response syndrome,SIRS）的关系。方法采用明胶法分离大鼠外周血单核细胞,于低氧条件下（3％O2,5％CO2,92％N2）培养0、1、3、6、9、12、24h后,收集细胞,分别采用免疫沉淀法、SDS-PAGE、PKC活性检测试剂盒及逆转录PCR（RTPCR）检测PKC膜易位、PKC活性及TNF-α表达量,采用SPSS10．0分析以上指标变化的相关性。结果低氧1～9h,大鼠外周血单核细胞膜PKCα含量及活性明显增高（P〈0．01）。低氧1～24h,大鼠外周血单核细胞膜PKCε含量及活性无明显变化。缺氧1～9h,大鼠外周血单核细胞TNF-α mRNA表达明显增高（P〈0．01）。低氧1～24h,PKCα膜蛋白含量及活性变化与TNF-α mRNA表达水平间呈显著正相关（P〈0．01～0．05）。结论低氧可诱导PKCα向膜易位并被激活,活化的PKCα可增强促炎症因子TNF-α的表达。这些变化可能与急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory dysfunction,ARDS）时血浆中大量促炎症因子持续存在密切相关。     

一氧化碳对大鼠血管平滑肌细胞低氧性增殖反应的作用

目的 :观察低氧时大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMC)受血管舒张因子一氧化碳的作用。方法 :随机分为常氧组、低氧组 ( 1%O2 5 %CO2 94%N2 )、一氧化碳组 ( 3%CO 5 %CO2 92 %N2 ) ,采用流式细胞仪、增殖细胞核抗原 (PCNA)、[3H]-胸腺嘧啶 ( [3 H]-TdR)摄取量 ,检测PASMC增生的情况。结果 :( 1)流式细胞仪检测低氧组PASMCG2 M期细胞比例明显增多(P <0 .0 1) ,G0 /G1 期细胞比例明显减少 (P <0 .0 1) ,CO组与常氧组的PASMC各期细胞数差异不显著 (P >0 .0 5 )。 ( 2 )PCNA免疫组化染色 ,低氧组PASMC细胞核阳性反应颗粒明显增加 ,而CO组为弱阳性。 ( 3) [3 H]-TdR的摄取量 ,低氧组可明显促进PASMC摄取 [3H]-TdR (P <0 .0 5 ) ,CO组与常氧组比没有明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :低氧可以促进PASMC的增殖 ,而CO可以部分抑制低氧对PASMC的作用     

缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的效应

本实验应用免疫组织化学染色 ,3H TdR掺入 ,流式细胞仪检测技术探讨缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PSMC)增殖的影响。结果 :缺氧 12h其增殖细胞核抗原 (PCNA)阳性反应颗粒增加 ,2 4h明显增加 ,其含量是常氧组 2 1倍 ;低氧 8h可使PSMC的3H TdR摄取量减少 (P <0 .0 5) ,12h则促进其摄取 ,2 4h则明显较常氧对照组增多 (P <0 .0 5) ;流式细胞仪检测显示其G2 /M期细胞比例明显增多 (P <0 .0 1) ,G0 /G1期细胞比例明显减少 (P <0 .0 1) ,细胞内总蛋白含量有所降低 (P <0 .0 1)。说明 ,缺氧早期抑制或损害PSMC增殖 ,而后促使PSMC的表型改变 ,出现增殖 ,从一侧面证实缺氧可以直接促进PSMC增生     

一氧化碳对大鼠血管平滑肌细胞低氧性增殖反应的作用

目的 :从细胞周期的角度探讨降钙素基因相关肽 (CGRP)对人血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖的影响 ,揭示其对抗动脉粥样硬化的作用机制。方法 :应用流式细胞仪分析CGRP对VSMC细胞周期的影响 ,免疫组织化学检测细胞周期蛋白D1 、E的表达。结果 :CGRP使细胞停留于G0 /G1 期 ,并能降低细胞中周期蛋白D1 、E的表达。结论 :CGRP可能是通过抑制周期蛋白D1 、E的积累 ,使人VSMC停留于G0 /G1 期 ,限制细胞周期的进程 ,抑制VSMC增殖