持续性植物状态患者预后与体感脑磁图相关性的研究

近年来,随着医疗急救技术的提高,重度颅脑损伤的病死率明显下降,随之而来的是持续性植物状态（persistent vegetative state,PVS）的患病率增加。该病病程长,病情重,耗费大量的人力、财力,长期以来其诊断及预后判断多依靠临床表现。本研究通过对20例PVS患者脑磁图（magnetoencephalography,MEG）体感诱发磁反应的研究,希望能为PVS的诊断及预后判断提供一个客观的指标,以减少治疗的盲目性。     

强心Ⅰ号方强心作用有效部位提取与分离

目的提取分离强心Ⅰ号方强心作用的有效部位。方法以大孔吸附树脂为分离材料,将强心Ⅰ号方组成药材的水提物、醇提物分别经蒸馏水,10％乙醇,30％乙醇,50％乙醇,70％乙醇,95％乙醇洗脱制得样品,然后通过离体蛙心试验观察受试样品的强心作用。结果水提物经30％乙醇,50％乙醇洗脱的样品和醇提物经30％乙醇,50％乙醇洗脱的样品对离体蛙心作用明显,其强心作用的半数有效浓度分别为：0．017g生药／ml,0．58g生药／ml,10．11g生药／ml,21．44g生药／ml。结论强心Ⅰ号方中各味药材的水提物经30％乙醇,50％乙醇洗脱的样品和醇提物经30％乙醇,50％乙醇洗脱的样品具有明显强心作用。     

肝癌与肝炎患者血凝指标变化的比较研究

多数肿瘤患者尤其是晚期肿瘤患者都有一项或多项凝血异常。凝血机制异常而导致大出血死亡是晚期肝癌的主要表现之一,而肝癌患者由于经过长期的放、化疗治疗,大都有凝血机制异常。而临床上普遍重视的是患者是否会出现红、白细胞及血小板的减少,肝癌患者凝血机制发生的变化却往往得不到足够审视。为探讨这方面的问题,本文通过晚期肝炎和慢性肝炎与肝癌作对照,联合检测凝血酶元时间（PT）、凝血酶时间（TT）、活性部分凝血酶时间（APTT）和纤维蛋白原含量（FIB）四项血凝指标,以期动态观察肝癌和肝炎的病情发展及顸后,为其预防和诊治提供参考。     

糖皮质激素受体α调节剂高通量筛选模型的建立及应用

目的建立不同分子作用机制的糖皮质激素受体α(GRα)调节剂高通量筛选模型,筛选新型糖皮质激素受体调节剂。方法克隆GRα的配体结合域LBD和全长基因,构建哺乳动物细胞表达载体pBIND-GAL4-GRαLBD、pTARGETGRα,分别与已构建的含GAL4响应元件5×UAS的荧光素酶报告质粒p5×UAS-luc和含有4×GRE的报告质粒pGRE-luc共转染HeLa细胞,建立两种不同机制的报告基因细胞筛选方法,通过报告基因的表达检测化合物对GRα受体转录调控功能的调节剂作用;利用实时定量PCR方法进一步验证化合物对糖皮质激素受体靶基因mRNA水平的调控作用。结果经过分别共转染表达质粒和报告质粒,GRα激动剂地塞米松可剂量依赖地诱导5×UAS-luc和4×GRE-luc两个模型的荧光素酶的表达,在5×UAS-luc模型中,最大上调倍数可达(9.0±0.2)倍,EC50值为(0.28±0.07)mmol/L,Z’因子为0.52。在4×GRE-luc模型中,最大上调倍数可达(3.2±0.3)倍,EC50值为(1.81±0.13)mmol/L,Z’因子为0.49。利用模型pBIND-GAL4-GRαLBD/p5×UAS-luc从2000多个微生物和植物来源的天然以及合成化合物中筛选得到1个微生物来源的天然产物黑麦酮酸D,黑麦酮酸D对GRα具有2~3倍的激动活性。进一步的定量PCR的结果说明黑麦酮酸D能有效上调多个GRα调控的靶基因的表达。结论两种报告基因筛选方法灵敏、稳定,可以用于GRα调节剂的高通量筛选。     

闭锁综合征1例

患者,男,53岁.主因左侧肢体无力、意识不清1h于2005年1月29日8:15入院.根据:(1)患者中年男性;(2)既往高血压病史5年,最高180/110 mm Hg,2年前行心脏搭桥术,平素口服路南欣康、脂必妥.     

100例癫痫患者脑电图与磁共振分析

目的:观察脑电图和头颅MRI在确诊癫痫及其病因诊治方面的应用,探讨痫性放电与结构异常之间的关系。方法:选100例癫痫患者,均作REEG、AEEG、头颅CT和MRI检查。比较四种检查方法的阳性率和异常病灶的分布。应用卡方检验,比较痫性放电与结构异常之间的关系。结果;REEG痫性放电35例(35%),AEEG76例(76%),比REEG多提供了41%的异常信息。CT发现颅内异常25例(25%),MRI发现异常58例(58%)。在EEG单侧局灶放电的53例中,MRI异常42例,18例双侧半球放电中,MRI异常5例,经x2检验,局灶痫性放电者MRI异常率显著高于双侧半球痫性放电者(P<0.01);MRI正常的42例患者中EEG痫性放电26例,异常率为61.9%,MRI发现结构异常的58例患者中,EEG异常放电50例,异常率为86.2%,经x2检验发现MRI结构异常患者,痫性放电出现率高(P<0.01)。结沦:AEEG是确诊癫痫、指导治疗的有利依据;MRI可作为癫痫患者病因诊断的首选影像检查。痫性放电与结构异常有一定关系。     

抗大豆Ⅱ号亚型钙调素单克隆抗体的制备与鉴定

目的:制备抗大豆Ⅱ号亚型钙调素(SCaM-2)单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定。方法:从含有pSCaM-2的大肠杆菌BL21中,提取并纯化SCaM-2。以其作为抗原免疫BALB/c小鼠后,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞经细胞融合筛选及克隆化,建立稳定分泌SCaM-2mAb的杂交瘤细胞株并对抗SCaM-2mAb进行鉴定。结果:经两次细胞融合,共获得10株可稳定分泌抗SCaM-2mAb的杂交瘤细胞株。对其中3株杂交瘤细胞制备的腹水mAb(6F11F3、7C5E9、7E10E2)用间接ELISA及免疫印迹实验表明,在高稀释度时,mA6F11F3可识别SCaM-1和SCaM-2,而mAb7C5E9和7E10E可分别识别SCaM-4和SCaM-5。Ig亚类鉴定结果表明,mA6F11F3和7C5E9均为IgG2a,mAb7E10E2为IgG1。相加实验的结果显示,mAb6F11F3和7C5E9可能识别SCaM-2相同的抗原表位;而mAb7E10E2可能识别不同的抗原表位mAb6F11F3对SCaM-2的亲和常数为(2.127±0.418)106M-1,mAb7C5E9对SCaM-4的亲和常数为(9.69±2.406×106M-1,mAb7E10E2对SCaM-5的亲和常数为(1.2030.429)×107M-1。结论:制备了可识别不同SCaM亚型的mAb6F11F3、7C5E9及7E10E2,为研究SCaM的特性及功能提供了重要的制剂。     

抗菌肽在食品防腐剂中的研究应用

抗菌肽是生物防御系统产生的一类对抗外源性病原体的肽类物质,对细菌、部分真菌、病毒、原虫、肿瘤细胞都具有杀伤作用,它的杀菌和安全无毒害作用的优势使得它具有做天然食品防腐剂的潜在应用价值。本文分析综述了不同抗菌肽在食品防腐中的应用。     

真菌来源的蛋白酶体抑制剂F04W2166A的研究

目的 通过蛋白酶体抑制剂筛选模型从微生物代谢产物中筛选出具有蛋白酶体抑制活性的化合物.方法 对1株筛选得到的阳性真菌进行放大发酵,通过硅胶和Sephadex LH-20柱色谱等分离手段进行单体化合物分离.结合理化性质和质谱及核磁共振等数据的分析,确定其化学结构.测定化合物的蛋白酶体抑制活性以及抗肿瘤细胞增殖活性.结果 从1株具有活性的轮枝孢霉菌F04W2166中得到活性化合物F04W2166A,并确定其结构与环缩酚酞类己知化合物Pullularin C相同.体外酶抑制活性说明该化合物对蛋白酶体有很强的抑制活性,其IC_50为3.1μg/mL.进一步的抗肿瘤细胞增殖活性结果证明该化合物对人结肠癌细胞株HT-29和人乳腺癌细胞株MDA-MB-231的增殖均有很高的抑制活性,其IC_50分别为28.3和271.6ng/mL.结论 F04W2166A是一个环缩酚酞类的蛋白酶体抑制剂,具有强的体外抗肿瘤细胞增殖活性.