人质膜型唾液酸酶在前列腺癌细胞凋亡中的作用

目的:探讨人质膜型唾液酸酶(NEU3)在维生素K3（VK3）诱导的人雄激素非依赖型前列腺癌PC3细胞凋亡中的作用及可能机制。方法:以稳定转染人质膜型唾液酸酶基因（neu3）的前列腺癌细胞(PC3-neu3细胞)为靶细胞,通过MTT、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色观察VK3作用下NEU3与凋亡的关系;应用细胞内活性氧(ROS)测定,Western blotting检测p65、Bcl－XL蛋白表达,探讨NEU3影响细胞凋亡的机制。 结果:(1)VK3浓度相同时,PC3-neu3细胞的生存率高于PC3细胞,凋亡率低于PC3细胞;PC3-neu3细胞内ROS产生的荧光强度弱于PC3细胞。(2)在VK3的作用下,p65的蛋白表达在两组细胞中具有相同的趋势,均随VK3浓度的增加,蛋白表达增强; Bcl-XL的蛋白表达趋势则相反,PC3细胞组,Bcl-XL的表达随VK3浓度的增加逐渐减弱,而PC3-neu3细胞组则增强,两组比较差异显著(P＜0.01)。结论:NEU3对VK3诱导的细胞凋亡具有抵抗作用,这一作用是通过降低细胞内活性氧水平,上调Bcl-XL和p65的蛋白表达实现的。     

基于肾虚血瘀理论探讨老年缺血性心脑血管病的心脑同治

中医学认为心、脑在生理、病理上存在密切联系,在治疗上应本着"心脑同治"的原则,但临床上对于老年缺血性心脑血管病的治疗,不能局限在心、脑二者之间,还应重视到"肾虚"和"瘀血"两方面在发病中的重要作用。本文通过从"肾虚血瘀"理论探讨老年缺血性心脑血管病的心脑同治,体现"肾虚血瘀"是老年缺血性心脑血管病的重要病机,在治疗上应补肾活血与心脑同治并举,并重视其治未病作用。     

KDR基因遗传变异与接受5-FU辅助化疗的结直肠癌患者预后的关系

[摘要] 目的：探讨激酶插入区受体（kinase insert domain receptor,KDR）基因遗传变异与接受5-FU 为基础辅助化疗的结直肠癌（colorectal cancer, CRC）患者预后的关系。方法：回顾性分析2012 年1 月至2017 年12 月在郑州人民医院肛肠外科接受手术切除治疗的CRC 患者共176 例的临床资料,并收集93 例术后癌组织标本。采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCRRFLP)技术检测KDR基因多态性位点基因型,采用qPCR检测癌组织中KDR基因mRNA的表达水平。通过logistic 回归模型分析多态性位点的基因型与其他变量的相关性,非参数检验分析KDR不同基因型的表达,采用Kaplan-Meier 生存分析单变量KDR基因型与患者预后的关系,并通过Cox 风险比例模型对其他变量进行校正。结果：在KDR 的多态性位点中,仅发现了rs2071559 位点具有临床意义。该位点在176 例CRC患者中的分布频率：TT基因型95 例（53.98%）,TC基因型70 例（39.77%）,CC基因型11 例（6.25%）;最小等位基因频率为0.26;3 种基因型分布符合Hardy-Weinberg 遗传平衡定律（P=0.690）。携带C等位基因的TC/CC基因型患者与野生型TT基因型患者的中位无复发生存期（mDFS）分别为4.4 和3.2 年（P< 0.05）;TC/CC基因型和TT基因型患者的中位总生存期（mOS）分别为5.2 和4.0 年（P<0.05）。对OS构建多变量的Cox模型校正后,TC/CC基因型对mOS具有明显影响（OR=0.55,P<0.05）。rs2071559 位点TC/CC基因型患者相对于野生型TT 基因型患者KDR mRNA 表达水平显著降低（P<0.01）。结论：KDR基因rs2071559 位点多态性与CRC患者临床治疗效果相关,其机制是可能通过影响KDR mRNA表达水平进而影响CRC患者的预后。     

消炎止痒酊的制备及质量控制

 目的:本文介绍了消炎止痒酊的处方、制备方法和临床疗效，建立了制剂的质量控制方法。方法:以氯霉素为主药，用高效液相色谱法（HPLC法）测定其含量。结果:用HPLC法测定氯霉素在100～500 μg·ml^-1浓度范围内线性良好。结论:该制剂的配制和质控方法是可行的。     

减毒沙门氏菌靶向携带共表达质粒p53/siRNA-survivin抗前列腺癌的体内研究

目的：以人减毒沙门氏菌为基因运载体，探讨其携带p53、siRNA-survivin及其共表达质粒p53／siRNA-survivin对肿瘤的靶向性及抗人前列腺癌效应，方法：复制裸鼠前列腺癌皮下移植瘤模型，分别将已构建的重组表达质粒siRNA-scramble，p53，siRNA-survivin及共表达质粒p53／siRNA-survivin转化到减毒人伤寒沙门菌Ty21a，制备成对应重组减毒沙门菌，通过灌胃及瘤内注射到前列腺癌荷瘤裸鼠体内，观察成瘤时间及瘤块大小；以携有绿色荧光蛋白siRNA-survivin的重组茵作为报告基因，流式细胞术检测其在肝、脾、肿瘤组织中靶向分布及基因呈递作用；应用RT-PCR，Western blot，及免疫组织化学染色方法检测治疗后肿瘤组织p53和Survivin基因及蛋白表达。结果：各治疗组均较对照组肿瘤生长缓慢，肿瘤体积小，共表达质粒组与单独基因治疗组比较，肿瘤体积明显缩小，抑瘤率高；荷瘤裸鼠肿瘤组织可测及survivin mRNA表达下降，p53基因表达增强，p53相关基因GRIM-19 mRNA和蛋白表达增强；FCM检测结果发现，减毒人沙门氏菌可在肝、脾及肿瘤组织中存活及表达，但以肿瘤中绿色荧光聚集明显且维持时间较长，其他脏器仅见极少的绿色荧光，结论：人减毒沙门氏菌可作为外源基因载体携带重组质粒，对前列腺癌移植瘤有明显的靶向性，其靶向介导的p53，siRNA-survivin及其表达基因p53／siRNA-survivin，对前列腺癌荷瘤裸鼠有治疗作用，共表达基因较单基因治疗效果好，具有显著的协同作用。     

第3批缩宫素国家标准品的建立

目的 建立首批HPLC含量测定用缩宫素国家标准品。方法 第3批缩宫素国家标准品采用冻干制备。使用核磁共振和HPLC法对缩宫素进行结构确证;采用HPLC法测定待标品的质量分数,并测定待标品水分及氨基酸比值;以缩宫素USP对照品为标准,采用HPLC外标法和大鼠子宫法分别测定待标品的生物效价。结果 经核磁共振和HPLC法确证缩宫素的结构;待标品水分含量为4.8%,各氨基酸比值均在限度范围内,经HPLC检测质量分数为99.69%;待标品经HPLC法测定每支含量为274 IU,经大鼠子宫法测定每支含量为275 IU。结论 建立的待标品可作为第3批缩宫素国家标准品,供缩宫素效价测定及鉴别使用。     

皮肤软组织扩张器注水术及护理

皮肤软组织扩张器注水术及护理沈阳军区总医院（１１００１５）梁英曹丽华李晓洁宋丽皮肤软组织扩张术是将扩张器埋植于皮下或软组织内，通过定期向扩张器内注入生理盐水使皮肤及软组织扩展伸长，从而获得修复局部皮肤及软组织缺损所需要的额外皮肤及软组织的新的整复技术...     

电针神庭、百会对大脑中动脉闭塞大鼠学习记忆的影响及机制研究

目的:研究磷酸化的环磷腺苷效应元件结合蛋白(p-c AMP-response element binding protein,p-CREB)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)在大鼠脑缺血再灌注中的表达,探讨电针神庭、百会对脑缺血再灌注大鼠学习记忆功能的影响及其可能机制。方法:36只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组和电针组,每组分配12只。采用大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)法建立局灶性脑缺血再灌注大鼠模型。电针组电针神庭、百会穴干预7d。各组采用Morris水迷宫实验评估大鼠的学习记忆功能;TTC染色观察缺血梗死体积;免疫组化染色检测海马CA1区pCREB,BDNF的表达。结果:与假手术组比较,模型组鼠到达水下平台的潜伏期长些(P0.01),通过平板的次数少些(P0.01)。电针组与模型组比较潜伏期显著短些(P0.05),通过平台的次数显著多些(P0.01)。与假手术组比较,模型组的p-CREB阳性细胞明显减少而BDNF光密度明显增加。与模型组比较,电针组的p-CREB阳性细胞明显增加(P0.01)而BDNF光密度也增加(P0.05),梗死的体积则小些。结论:电针神庭、百会可改善脑缺血再灌注大鼠的学习记忆功能,其作用机制可能与上调缺血侧海马CA1区pCREB,BDNF的表达有关。     

尾叶香茶菜二萜类化合物B对小鼠前列腺癌细胞细胞周期的影响及其机制

目的：观察尾叶香茶菜二萜类化合物B(DB)对小鼠前列腺癌细胞株RM-1细胞周期的影响并分析其机制。方法：MTT法观察不同时间、不同剂量的DB对RM-1 细胞增殖率的影响；相差显微镜观察对RM-1细胞形态影响；流式细胞术分析细胞周期变化；RT-PCR和Western blotting分别观察DB作用后RM-1细胞p53、GRIM-19、STAT3 和细胞周期相关因子CHK1、CDK2 mRNA和蛋白水平的表达。结果：（1）MTT结果：DB可抑制RM-1 细胞的增殖，呈时间、剂量依赖性；（2）形态学观察和流式细胞术检测：经DB处理后的RM-1细胞出现生长抑制，细胞主要阻滞在G1期；（3）RT-PCR结果： DB (2 mg/L,4 mg/L,8 mg/L) 分别作用RM-1细胞12 h、24 h、48 h后，p53、CHK1、GRIM-19 mRNA的含量明显高于对照组，CDK2、STAT3 mRNA的含量明显低于对照组（P<0.05）；（4）Western blotting 结果：DB (2 mg/L,4 mg/L,8 mg/L) 分别作用RM-1细胞12 h、24 h、48 h后，P53、GRIM-19 蛋白表达水平高于对照组，而CDK2蛋白表达水平则低于对照组。结论：DB可抑制RM-1细胞增殖，其机制可能是与细胞周期相关基因p53的上调，CDK2表达下降有关，影响了G1期进入S期，同时GRIM-19-STAT3-CDK2途径可能也参与G1期阻滞的过程。     

胎盘早剥的危险因素及其对母婴妊娠结局的影响

目的 探讨胎盘早剥(PA)的危险因素及其对其对母婴妊娠结局的影响。方法 回顾性选取127例PA产妇为病例组,同期随机选取254例未发生PA的产妇为对照组;采用单因素、多因素logistic回归法分别筛选PA的危险因素,使用χ2检验比较两组间的母婴妊娠结局。结果 影响PA的危险因素包括高龄产妇(OR=2.210)、无规律产检(OR=3.854)、妊娠期高血压疾病(OR=5.641)、胎膜早破(OR=3.586)、羊水异常(OR=2.784)及机械性损伤(OR=4.773)等。病例组的剖宫产率、产后出血率、DIC率、子宫胎盘卒中率、胎儿窘迫率、低体质量儿率、新生儿窒息率及围生儿死亡率均高于对照组(P<0.01)。结论 PA的高危因素包括高龄产妇、无规律产检、妊娠期高血压疾病、胎膜早破及羊水异常及机械性损伤等,PA对母婴妊娠结局均产生较大影响。