人原生殖细胞的分离与培养

目的:探讨人原生殖细胞(PGC)的分离取材时机与体外培养方法,为人类胚胎生殖细胞(EG)的建系研究奠定基础。方法:取不同孕龄的人胚,分离人PGC,在不同培养体系中,观察其增殖与分化情况。结果:孕8、9周较孕7周人胚用酶机械法分离PGC后,原代克隆形成率高,以小鼠胚胎成纤维细胞或STO细胞作为饲养层,并且在培养液中加入hLIF、hbFGF\,hSCF,能较好地维持人PGC的增殖并保持未分化。结论:孕8、9周龄人胚为分离PGC的适宜材料,酶机械法分离PGC简单有效,饲养层细胞与生长因子为人PGC细胞体外培养所必需。     

多功能医用护理钳

目前临床护理人员在常见的技术操作中,使用新的辅助工具往往仅具备单一功能,如:剪刀、止血钳、砂轮(切割安瓿用)、输液瓶及铝盖开启器等,给工作带来诸多不便。为此我们结合临床护理工作的需要,试制了“多功能护理钳”。该钳经临床使用,效果颇佳,现将结构特点及使用方法介绍如下。     

多胎妊娠减胎术16例临床分析

目的研究多胎妊娠早期选择性减胎术的可行性、安全性及对妊娠的影响。方法2002年1月-2005年12月在我院生殖中心行体外受精-胚胎移植受孕的16例多胎妊娠（A组）孕早期在阴道B超引导下穿刺,采用氯化钾心腔内注射或单纯胚芽穿刺抽吸法行减胎术,并与同期进行体外受精-胚胎移植受孕的64例双胎妊娠（B组）相比较。结果16例减胎术均一次成功。其中3例流产,13例患者已分娩（其中早产5例）,24个新生儿平均孕周（37.2±1.4）周,出生体重（2660.0±417.5）g,均健康无畸形。B组64例患者中4例孕早期流产,3例孕晚期流产,57例（其中早产24例）分娩109个新生儿,其中2个重度窒息死亡,2个先天畸形,平均孕周（37.0±2.0）周,出生体重（2603.3±459.7）g。两组的流产率、活产率、早产率、平均孕周、平均出生体重等均无明显差别。结论在B超引导下,多胎妊娠早期减胎术是安全、有效治疗多胎妊娠的方法。     

冷冻胚胎解冻移植264个周期临床分析

 【目的】探讨影响冷冻胚胎解冻移植妊娠率的因素。【方法】收集2001年11月到2006年1月264位病人在本中心进行冷冻胚胎解冻移植264个周期的资料,进行回顾分析。【结果】264个周期中有67个周期妊娠,周期妊娠率25.38%。妊娠组平均每次移植胚胎个数多于非妊娠组(2.84±0.57 vs 2.45±0.82,P<0.05),移植1个、2个、3个及以上冷冻解冻胚胎的妊娠率分别为9.38%、18.67%、38.22%,其中移植3个及以上胚胎者的妊娠率高于移植1个和2个胚胎者的妊娠率(P<0.05)。胚胎解冻后体外培养24h平均细胞数增长率≥50%者的妊娠率(34.43%)高于增长率<50%者(17.28%),P<0.05,至少移植一个胚胎细胞数在6细胞及以上的周期妊娠率明显高于移植胚胎细胞数小于6细胞的周期(35.85% vs 16.67%,P<0.05);移植Ⅰ级胚胎与Ⅱ级胚胎的妊娠率分别为35.26%、17.58%,P<0.05。新鲜移植周期妊娠者其冻融周期妊娠率为42.86%,而在新鲜移植周期未妊娠者其冻融周期妊娠率为28.31%,差异有显著性,P<0.05。自然周期、激素替代周期妊娠率分别为28.21%、21.30%，无统计学差异。LH峰日内膜厚度及类型无统计学差异。【结论】移植胚胎的个数、质量、发育潜能、原新鲜周期的结局影响冷冻胚胎移植能否妊娠。     

不同促排卵方案对宫腔内人工授精妊娠结局的影响

目的探讨不同促排卵方案对宫腔内人工授精(IUI)妊娠结局的影响。方法收集2009年4月至2014年4月期间在本院生殖中心,采用自然周期(NC)和克罗米芬(CC)、来曲唑(LE)、人绝经期促性腺激素(HMG)、CC+HMG和LE+HMG 5种促排卵方案用于IUI共2 528周期,并对其临床资料进行回顾性分析。结果 (1)NC组、CC组、LE组、HMG组、CC+HMG组、LE+HMG组的临床妊娠率分别为9.49%、13.74%、14.95%、15.73%、19.13%、21.80%;5个促排卵组的临床妊娠率高于NC组,差异具有统计学意义(P0.05);LE+HMG组临床妊娠率高于CC组、LE组、HMG组,差异亦具有统计学意义(P0.05),与CC+HMG组比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)NC组、CC组、LE组、HMG组、CC+HMG组和LE+HMG组多胎妊娠率分别0%、4.26%、2.38%、9.88%、9.52%、1.72%;促排卵周期组总多胎妊娠率及其中HMG组、CC+HMG组多胎妊娠率高于NC组,差异具有统计学意义(P0.05);5个促排卵组多胎妊娠率组间比较无统计学差异(P0.05)。(3)NC组、CC组、LE组、HMG组、CC+HMG组和LE+HMG组自然流产率、异位妊娠率的组间比较无统计学差异(P0.05)。结论促排卵治疗可提高IUI的临床妊娠率,对自然流产率和异位妊娠率无明显影响,但增加多胎妊娠率。LE+HMG方案可以提高临床妊娠率,多胎妊娠率和自然流产率较低,值得在临床推广。     

单胚胎移植和全胚胎冷冻对卵巢过度刺激综合征高风险患者的效果

目的：研究单胚胎移植及全胚胎冷冻对卵巢过度刺激综合征（ OHSS）高危患者临床结局的影响及对OHSS的预防价值。方法回顾性分析行IVF－ET的OHSS高危患者246例,其中51例行单胚胎移植,126例行双胚胎移植及69例行全胚胎冷冻。比较三者间的一般临床特征、获卵总数、GN使用总量、HCG日E2水平、妊娠结局及OHSS的病情。结果（1）单胚胎移植患者和双胚胎移植患者的胚胎种植率、临床妊娠率、继续妊娠率分别为51.0％和41.7％、51.0％和66.7％、47.0％和55.6％,差异无统计学意义（ P＞0.05）,多胎妊娠率分别7.7％和31.0％,差异有统计学意义（P＜0.05）;（2）单胚胎移植、双胚胎移植及全胚胎冷冻患者的中重度OHSS发生率分别为3.9％、8.7％和5.8％,差异无统计学意义（P＞0.05）;（3）单胚胎移植及全胚胎冷冻患者的住院率较低、病情较轻。结论在IVF中对于OHSS高危患者,充分评估病情后可尝试使用单胚胎移植或者全胚胎冷冻以减少OHSS和多胎妊娠的风险。     

来曲唑、他莫昔芬和氯米芬治疗多囊卵巢综合征不孕疗效比较

目的比较多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者经纠正内分泌代谢紊乱后应用3种不同促排卵药物的效果及对子宫内膜的影响。方法选择2009年3月至2010年1月中山大学孙逸仙纪念医院妇产科生殖中心128例PCOS不孕患者,于本院行第1次促排卵,有高雄激素或胰岛素抵抗者经预处理至少3个月。随机分为3组,来曲唑44个周期、他莫昔芬40个周期和氯米芬44个周期。结果月经第10天的子宫内膜厚度,他莫昔芬组[(6.4±1.2)mm]高于来曲唑组[(5.4±1.7)mm]和氯米芬组[(5.4±1.3)mm](P=0.01);HCG日血雌二醇(E2)水平,来曲唑组[(838.6±678.2)pmol/L]低于他莫昔芬组[(2629.2±1931.5)pmol/L]和氯米芬组[(1971.2±1222.8)pmol/L](P<0.001);3组间加用尿促性腺激素(HMG)周期数,HCG日子宫内膜厚度、血黄体生成素及孕酮、直径≥18mm成熟卵泡数,妊娠率和早期流产率,差异无统计学意义(P>0.05);HCG日子宫内膜的厚度与注射HCG的月经周期日及月经第10天的子宫内膜厚度呈正相关(P<0.05),与药物的种类及HCG日血E2水平等无显...     

不同浓度血管活性肠肽(VIP)对新生大鼠原始卵泡体外发育影响的实验研究

目的:观察不同浓度血管活性肠肽(VIP)对新生4 d大鼠卵巢体外培养过程中原始卵泡存活和生长发育的影响。方法:取新生4 d大鼠的卵巢72个,随机分为6组:新鲜组、基础培养组和不同浓度VIP组(10-9~10-6 mol/L)。新鲜组不经培养、其余各组体外培养14 d行组织形态学检查、增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学和TUNEL凋亡分析。结果:①各培养组的1级(早期初级)卵泡百分比明显高于新鲜组(P<0.05),且VIP 10-7 mol/L组最高。②各培养组PCNA阳性率与新鲜组比较均有统计学差异(P<0.001);不同浓度VIP组与基础培养组比较有统计学差异(P<0.05);VIP 10-7 mol/L组卵泡PCNA阳性率最高,与其他VIP浓度组比有显著差异(P<0.05),③各培养组卵泡凋亡率均显著高于新鲜组(P<0.001),培养组中以VIP 10-7 mol/L组较低,与VIP 10-8 mol/L组和VIP 10-9 mol/L组间有统计学差异(P<0.05)。结论:在卵巢体外培养过程中,VIP可以促进新生4 d大鼠的原始卵泡向初级卵泡转化;不同浓度的VIP均可降低卵巢组织卵泡细胞的凋亡,提高卵泡体外存活能力,VIP10-7 mol/L较其他浓度更明显地促进卵泡细胞的增殖,降低卵泡细胞的凋亡。