湖南省1999～2008年卫生事业发展的综合评价

目的了解1999～2008年间湖南省卫生事业的发展变化趋势,为卫生管理者制定相关决策提供依据。方法采用秩和比法对湖南省10年来卫生事业动态发展状况进行综合评价。结果湖南省卫生事业工作状况较好的是2007、2008年,其次是2001、2002、2005、2006年,较差的是1999、2000、2003、2004年。结论湖南省卫生事业状况总体呈现向上的良好发展趋势。     

以“三种能力”为导向的针灸主干课程教学模式之探索

知识获取能力、临证思维与操作能力以及科研创新能力是衡量中医人才质量的重要指标。成都中医药大学针灸专业本科生在三种能力的培养方面大胆探索,从《经络腧穴学》、《针灸医籍选》、《刺法灸法学》、《针灸治疗学》和《实验针灸学》五门主干课入手,进行了专业核心课程教学模式的改革,提出了以"三种能力"为导向的教学和评价方案,以保证和提高针灸专门人才培养的质量,适应社会的需求。     

艾灸补髓促进老年学习记减退大鼠海马神经发生

目的 观察艾灸补髓能否促进老年学习记忆减退大鼠海马神经发生.方法选取督脉"百会"和"命门"两穴对学习记忆减退SD老年大鼠进行艾灸治疗,腹腔注射5溴-2脱氧尿苷(BrdU)后以免疫荧光双标记技术观察BrdU阳性和BrdU与神经丝巢蛋白(Nestin)双阳性的细胞,结合细胞增殖与NSCs特异性标志物表达评价海马神经发生.结果艾灸能增加老年学习记忆减退大鼠海马BrdU阳性细胞的数量,提高BrdU和Nestin双阳性细胞的表达.结论提示艾灸具有促进老年学习记忆减退大鼠海马神经发生的作用.     

失代偿性肝硬化患者肠内营养风险评估及管理方案的构建

目的 构建失代偿性肝硬化患者肠内营养风险评估及管理方案,为临床干预提供参考依据。 方法 检索国内外数据库获取相关文献,初步拟订失代偿性肝硬化患者肠内营养风险及管理方案,于2021年9月—11月采用德尔菲法进行2轮专家函询,确定方案内容。 结果 共14名专家完成2轮函询。2轮函询中,专家的权威系数分别为0.838和0.839。第2轮函询中,一、二、三级指标的肯德尔和谐系数分别为0.836、0.714、0.683（P<0.05）,各指标的变异系数为0~0.23。最终构建的失代偿性肝硬化患者营养风险评估及管理方案包括5项一级指标、14项二级指标、18项三级指标。 结论 该研究构建的失代偿性肝硬化患者肠内营养风险评估及管理方案具有较好的科学性、可靠性、实用性,可为临床干预提供参考依据。     

地西他滨联合丙戊酸钠促进胃癌MGC-803细胞凋亡和G0/G1期阻滞的机制研究

目的: 探讨地西他滨(DCA)和丙戊酸钠(VPA)联用对胃癌细胞株MGC-803凋亡和细胞周期的影响及机制。方法: DCA 1.5 μmol·L^-1、DCA 3.0 μmol·L^-1、VPA 1.5 mmol·L^-1、DCA 1.5 μmol·L^-1+VPA 1.5 mmol·L^-1和DCA 3.0 μmol·L^-1+VPA 1.5 mmol·L^-1作用MGC-803细胞72 h。Annexin V/PI法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期,实时荧光定量PCR检测nm23-H1 mRNA表达。结果: VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 1.5 μmol·L^-1联合用药组 和VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 3.0 μmol·L^-1联合用药组 凋亡率均高于其相应单药组,差异有统计学意义(P<0.01)。MGC-803细胞G₀/G₁期比例在VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 1.5 μmol·L^-1联合用药组(61.55%±2.38%)和VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 3.0 μmol·L^-1联合用药组(66.75%±2.48%)的表达水平均高于其相应单药组,差异有统计学意义(P<0.01)。nm23-H1 mRNA在VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 1.5 μmol·L^-1联合用药组(1.84±0.46)和VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 3.0 μmol·L^-1联合用药组(2.88±0.42)的表达水平均高于其相应单药组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论: DCA联合VPA能显著促进MGC-803细胞凋亡及G₀/G₁期阻滞,其机制可能与促nm23-H1基因的表达有关。     

肾康灵汤剂对IgA肾病患者外周血T淋巴细胞体外作用研究

IgA肾病（IgA nephropathy,IgAN）是一类机体产生抗微生物抗原IgA抗体,继而大量IgA抗原和抗体形成免疫复合物在系膜区沉积,激活补体旁路途径,引起肾脏损伤的疾病[1]。有报道显示,IgAN患者通常存在T细胞亚群的明显失衡[2],进而造成免疫应答紊乱。肾康灵汤剂主要由黄芪、生地黄、太子参、丹参等成分组成,在临床应用中,     

人源化乙肝表面抗体重链克隆、表达及免疫学特性初步鉴定

目的建立一种利用单细胞分选技术克隆人源化乙肝表面抗体重链的方法。方法从乙肝疫苗接种志愿者外周血中分选得到单个抗体分泌细胞,单细胞RT-PCR筛选20个单菌落,挑选其中有IgG保守区域的克隆全长,并将IgG(H)基因全长克隆到pEGFP-N1载体,转染COS-7细胞,取上清液进行Western blotting验证,并采用Batty饱和法测定亲和力常数。结果筛选得到IgG(H)能与HBsAg结合,且Ka值达到2.39×109L/mol。结论利用单细胞分选克隆技术获得的抗体重链亲和力较高。     

依那普利联合吲达帕胺治疗糖尿病合并高血压的临床分析

目的 观察依那普利与吲达帕胺联合治疗老年2型糖尿病合并高血压的临床疗效.方法 将99例确诊糖尿病合并高血压的患者随机分为治疗组和对照组,治疗组（50例）用依那普利加吲达帕胺治疗,对照组（49例）单用依那普利治疗.治疗12周比较治疗前后的降压效果、血浆内皮素-1及血清钾、降糖疗效.结果 治疗组的降压效果（82.0%）和降低血浆内皮素-1[（75.42±12.16）pg/ml]方面要优于对照组[65.3%,（99.09±13.31）pg/ml],但两组在血清钾和降糖方面无显著性差异（P＞0.05）.结论 依那普利与吲达帕胺联用可作为治疗糖尿病合并高血压的一种较好的治疗方案.     

香菇多糖LNT2的提取分离纯化、结构及体外抗肿瘤活性研究

目的 从香菇子实体中分离纯化得到精制香菇多糖,并对其结构和体外抗肿瘤活性进行研究。方法 采用碱提-醇沉法提取香菇粗多糖,并通过脱色、超滤分离纯化得到精制香菇多糖,命名为LNT₂。苯酚-硫酸法测定总糖量,高效凝胶色谱法测定相对分子质量,紫外光谱检测蛋白质和核酸,旋光度实验测定比旋光度。综合运用酸水解、高碘酸氧化、甲基化等化学分析法和傅里叶红外光谱、核磁共振光谱等光谱分析法对LNT₂的化学结构进行分析;通过刚果红实验对LNT₂的糖链构象进行考察;采用四甲偶氮唑盐（MTT）比色法测定LNT₂对小鼠肝腹水瘤H₂₂细胞增殖的抑制率。结果 经测定香菇多糖LNT₂为均一组分多糖,其相对分子质量（M_W）为1.852×10⁵、含糖量为94.99%,比旋光度为+8.03°;紫外光谱显示LNT₂在280和260 nm处无吸收峰。综合化学分析和光谱分析推出LNT₂为β构型的葡聚糖,其主链由1-3连接的葡聚糖组成,分支点位于糖的6位,侧链由末端葡萄糖残基组成;刚果红实验表明LNT₂分子在较低浓度NaOH溶液中呈三螺旋构象。体外抗肿瘤实验表明LNT₂能显著抑制小鼠肝腹水瘤H₂₂细胞的增殖,且呈量效依赖性。结论 精制香菇多糖LNT₂为均一相对分子质量的多糖组分,其结构为β构型1-3连接葡聚糖;初步表明LNT₂为三股螺旋结构,且具有一定的抗肿瘤活性,为其进一步的开发利用奠定了一定的基础。     

从兔外周血直接克隆B细胞κ轻链的可变区

目的 从兔外周血总RNA中直接扩增出B细胞κ轻链的可变区序列.方法 首先从IMGT/GENE-DB数据库中获取大耳白兔Ig胚系基因Vκ(IGKV)、Jκ(IGKJ)和Cκ(IGKC)的cDNA序列、设计引物,然后以非免疫兔外周血总RNA为模板进行RT-PCR扩增,回收产物并克隆到T载体,随机挑选单克隆测序,最终将序列提交到IMGT/V-QUEST,分析出每个克隆的Vκ-Jκ组合,并利用BioEdit的本地Blast程序比较出Cκ的基因型.结果 共设计出4对引物,其中引物对RK.C1[4-5-9]无产物,引物对RK.C1[1-2-7]、RK.C1[3-6-8]和RK.C2[1-2-3-4]有产物,分别回收、克隆到T载体后各挑取20个克隆,共获得51个克隆的插入子序列.没有任何2个克隆的插入子序列完全相同,每个克隆均包含完整的兔Vκ、Jκ及Cκ的5'端序列,其中Vκ-Jκ-IGKC1组合的克隆33个,Vκ-Jκ-IGKC2组合的克隆18个;68个Vκ胚系基因中有22个出现,其中频率最高的是IGKV1S10*01(12次),其次是IGKV1S36*01、IGKV1S37*01和IGKV1S4*01(各5次),其余均为3次以下;8个Jκ胚系基因中只有1个出现,为IGKJ1-2*01;2个Cκ基因的等位基因分别为IGKC1*01和IGKC2*03.33个Vκ-[IGKJ1-2*01]-[IGKC1*01]克隆中有17种不同的组合方式,其中频率最高的为[IGKV1S10*01]-[IGKJ1-2*01]-[IGKC1*01](7次).18个Vκ-[IGKJ1-2*01]-[IGKC2*03]克隆中有11种不同的组合方式,频率最高的为[IGKV1S10*01]-[IGKJ1-2*01]-[IGKC2*03](5次).Vκ-Jκ-Cκ组合方式相同的克隆,序列仍具有明显的差异.结论 利用自行设计的兼并引物,成功并特异地从兔外周血总RNA中直接扩增出了κ轻链的可变区,且产物具有良好的多样性,但所有Vκ-Jκ-Cκ组合中只出现了1种Jκ基因.