全文获取类型
收费全文 | 12358篇 |
免费 | 1154篇 |
国内免费 | 667篇 |
专业分类
耳鼻咽喉 | 48篇 |
儿科学 | 221篇 |
妇产科学 | 68篇 |
基础医学 | 808篇 |
口腔科学 | 219篇 |
临床医学 | 1807篇 |
内科学 | 996篇 |
皮肤病学 | 122篇 |
神经病学 | 244篇 |
特种医学 | 427篇 |
外科学 | 761篇 |
综合类 | 3421篇 |
现状与发展 | 1篇 |
预防医学 | 1605篇 |
眼科学 | 113篇 |
药学 | 1436篇 |
16篇 | |
中国医学 | 1278篇 |
肿瘤学 | 588篇 |
出版年
2024年 | 31篇 |
2023年 | 116篇 |
2022年 | 306篇 |
2021年 | 413篇 |
2020年 | 381篇 |
2019年 | 186篇 |
2018年 | 222篇 |
2017年 | 306篇 |
2016年 | 240篇 |
2015年 | 486篇 |
2014年 | 639篇 |
2013年 | 778篇 |
2012年 | 1298篇 |
2011年 | 1414篇 |
2010年 | 1202篇 |
2009年 | 1026篇 |
2008年 | 1227篇 |
2007年 | 1028篇 |
2006年 | 949篇 |
2005年 | 614篇 |
2004年 | 423篇 |
2003年 | 338篇 |
2002年 | 186篇 |
2001年 | 166篇 |
2000年 | 130篇 |
1999年 | 29篇 |
1998年 | 5篇 |
1997年 | 8篇 |
1996年 | 7篇 |
1995年 | 8篇 |
1994年 | 6篇 |
1993年 | 2篇 |
1992年 | 2篇 |
1990年 | 1篇 |
1989年 | 1篇 |
1988年 | 2篇 |
1985年 | 1篇 |
1984年 | 1篇 |
1983年 | 1篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 15 毫秒
91.
目的:为了解决小口径(直径7mm以下)人造血管术后通畅率低下的问题,利用生物-人工复合血管,结合分子生物学手段,将转入血管内皮生长因子(VEGF165)基因的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)种植于复合血管内腔面,为解决此临床难题提供新的思路和手段。材料方法:构建VEGF165真核表达质粒pCI-neo-VEGF165,获得正确的质粒用于转染HUVEC。从中科院购买HUVEC(代号:ECV-304),用脂质体介导法将pCI-neo-VEGF165转入细胞,经G418筛选后,计数阳性克隆,以比较脂质体和质粒在不同比例情况下转染效率的高低。实验组按质粒和脂质体比例的不同分为4组:1μg/3μl;2μg/6μl;2μg/8μl;3μg/12μl。ELISA检测瞬时转染后HUVEC培养上清中VEGF的表达。再将VEGF165基因瞬时转入HUVEC,利用自己设计的旋转培养装置,将细胞均匀地粘附、种植于复合血管内腔面。复合血管是人工材料(聚酯)和生物材料(成纤维细胞长入,胶原形成)有机结合而成,是将包有聚酯网的硅胶棒埋入绵羊背部皮下组织,3个月后取出,抽去硅胶棒而得到的。结果:脂质体转染效率以2μg/8μl组阳性克隆数最多;ELISA测定瞬时转染后HUVEC培养上清中VEGF的表达量为532·5±43·1pg/ml。使用旋转培养装置的细胞均匀地粘附于复合血管,未使用者细胞积聚于血管腔面下部;转入和未转入VEGF165基因的HUVEC在复合血管内腔面覆盖面积百分比分别为69·9%±3·5%、43·7%±2·5%,有明显改善。结论:转入VEGF后可促进HUVEC在复合血管上生长,旋转培养装置有利于细胞的均匀粘附。 相似文献
92.
人成纤维细胞在裸鼠体内生长和胶原分泌的观察 总被引:2,自引:1,他引:2
目的观察人成纤维细胞注射移植后是否在裸鼠体内增殖并分泌胶原。方法将经原代培养的2×1010L-1人成纤维细胞1mL注射于BALB/CNU裸鼠真皮内,于1、2和3个月处死取材,行HE和Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组化染色。结果在1、2和3个月时可以观察到人成纤维细胞在裸鼠体内呈分裂象,随着时间的推移细胞外基质Ⅰ、Ⅲ型胶原分泌量呈增多趋势。结论人成纤维细胞注射移植裸鼠后,能够自行分裂、增殖并分泌人Ⅰ、Ⅲ型胶原,为自体成纤维细胞作为移植材料,发挥充填功能的持久性提供了理论依据。 相似文献
93.
目的:利用一种特殊的脂蛋白脂酶(LPL)基因缺陷的极度高甘油三酯血症(HTG)小鼠,作为HTG性胰腺炎的实验动物模型,研究其胰腺炎发病特点。 方法:检测野生型及LPL缺陷的遗传性极度HTG小鼠血浆淀粉酶活性并观察胰腺的形态学改变,研究自发性胰腺炎的发生情况;通过腹腔注射左旋精氨酸(L-Arg)诱导小鼠发生急性胰腺炎(AP),研究HTG时胰腺炎易感性的变化。 结果:对胰腺组织的病理观察表明,LPL缺陷小鼠中约34.5%可发生自发性胰腺炎,特点主要为炎细胞浸润和腺泡破坏,有时伴纤维化和出血,病变严重程度与血浆TG水平呈正相关(r=0.604,P<0.05),血浆淀粉酶活性与对照组相比无明显差异。L-Arg诱导的LPL缺陷实验组小鼠胰腺炎病理损害明显重于野生型实验组(P<0.01),但两组间血浆淀粉酶活性无显著差异。 结论:LPL缺陷的HTG小鼠可发生自发性胰腺炎,对于L-Arg诱导的AP比野生型小鼠更加易感,为进一步研究HTG性胰腺炎的发病机制提供了理想的动物模型。 相似文献
94.
目的观察青蒿琥酯(artesunate,Art)对人食管癌Eca-109细胞系的抑瘤作用,并进一步探讨ATt诱导肿瘤细胞周期阻滞与CDC25A、TGF-β表达的关系。方法体外培养人食管癌Eca-109细胞系及正常人外周血单个核细胞(hPBMC),利用MTT法测定细胞增殖;采用流式细胞术(FCM)测定细胞周期;应用RT.PCR方法检测CDC25AmRNA表达,应用Western blot方法检测蛋白表达。结果Art能显著抑制Eca-109细胞的增殖,ICS0为(68.80±0.76)μmol/L,而对hPBMC的增殖则没有明显抑制作用。低浓度Art可将细胞阻滞于G0/G1期,S期细胞显著减少,当浓度达到100μmol/L时,细胞阻滞于G2/M期。Art可显著抑制Eca-109细胞CDC25AmRNA及蛋白表达,同时显著上调TGF-β的蛋白表达水平。结论Art可抑制肿瘤细胞生长,上调TGF-β表达,抑制CDC25A表达。 相似文献
95.
目的:研究表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和β-环糊精(β-CD)组成的人工分子伴侣系统辅助鸡IL-18重组蛋白的复性,以提高鸡IL-18重组蛋白复性率,获得更多具有良好活性的蛋白.方法:将重组原核表达质粒pGEX-mChIL-18转化宿主细胞大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG于37℃诱导培养获得表达.表达产物主要以包涵体的形式存在.包涵体经超声波破碎、洗涤后以6 mol/L的盐酸胍溶解,使蛋白彻底变性,然后利用人工分子伴侣系统辅助蛋白复性.复性产物经透析纯化后,利用淋巴细胞增殖试验来检测其活性.结果:经SDS-PAGE分析表明,表达产物是与ChIL-18重组蛋白相符的Mr约44000的蛋白条带.利用人工分子伴侣系统辅助复性,鸡IL-18重组蛋白获得了42.54%复性率.鸡淋巴细胞增殖试验表明,表达产物对鸡淋巴细胞具有明显诱导增殖作用.结论:人工分子伴侣系统能够较好地辅助鸡IL-18重组蛋白复性,获得较高的复性率.其产物具有良好的生物学活性,为下一步鸡IL-18重组蛋白的应用研究奠定了试验基础. 相似文献
96.
人MASP1 N端片段原核表达载体的构建及其表达 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:在大肠杆菌中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶1(MASP1)N端片段.方法:采用PCR技术从含人MASP1 cDNA的质粒pGEM-MASP1中扩增MASP1-N端基因片段,将其插入原核表达载体pGEX4T-1,转化BL21(DE3)感受态菌诱导表达MASP1-N端蛋白,通过GSTrap亲合层析柱纯化目的蛋白,以SDS-PAGE和Westernblot进行鉴定,并以ELISA分析了目的蛋白与重组MBL-CLR、重组MBL的结合活性.结果:从pGEM-MASP1中扩增得到约860 bp的基因片段,构建成重组载体经酶切出现约4 900 bp和860 bp片段,测序结果与预期的完全一致.纯化蛋白经SDS-PAGE可见Mr60000蛋白带,该蛋白可与抗GST抗体反应并能与重组人MBL-CLR、重组人MBL蛋白结合.结论:获得了表达人MASP1 N端片段的大肠杆菌菌株和重组人MASP1 N端片段/GST融合蛋白,为MASP1分子的进一步研究提供了条件. 相似文献
97.
目的 研究1例ABO亚型及基因特征。 方法 采用试管法对家系3代共7例标本进行ABO血型血清学鉴定;对正反定型不一致的标本运用聚合酶链式反应序列特异性引物(polymerase chain reaction-sequence specific primer, PCR-SSP)法基因分型;并对ABO基因第6和7外显子扩增产物进行测序分析。 结果 ABO血型血清学发现7例标本中正反定型不符3例,其中2例红细胞表型为cisAB/A 或ABx,1例为cisAB/O或A2Bx;基因分型为ABO*cisAB01/A101、ABO*cisAB01/O01。ABO基因序列分析:ABO*cisAB01/A101第7外显子发生467C>T、803G>C的特征性突变,ABO*cisAB01/O01第6外显子261位缺失G,第7外显子在467C>T、803G>C存在特征性突变。测序结果均携带有ABO*cisAB01基因。 结论 ABO*cisAB01基因能导致A抗原或者B抗原的弱表达并能稳定遗传,因此应将血型血清学和分子生物学方法相结合才能准确鉴定ABO亚型。 相似文献
98.
丁磊左安俊蒋光峰李环廷 《中国卫生质量管理》2022,(7):058-61
国内普遍认为病例组合指数(CMI)属于医疗服务能力维度,体现收治疾病的疑难复杂程度和医疗服务的整体技术难度。通过结构方程模型分析发现,CMI与时间消耗指数、费用消耗指数等服务效率维度指标联系更紧密,与DRG组数、入组病例数及总权重等服务能力维度指标联系相对较弱,故应归属医疗服务效率维度。CMI的直接应用主要是对平均住院费用的预测控制及对科室绩效的评价;CMI的间接应用主要是对管理指标的调整/校正。医院管理者应准确把握CMI内涵,恰当应用CMI对不同层级及不同类别住院费用进行预测、评价与控制,并对其他管理指标进行调整后再评价。 相似文献
99.
郭振军左燕廉江平周楠李茁朱亚宁张鹏 《中国卫生质量管理》2022,(9):068-71
通过开展以“合理用药”为核心的重点监控药品管理,促进合理用药水平提升。采取事后处方点评及处方前置审核,建立和完善重点监控药品管理方案,对不合理用药进行拦截、宣教、绩效处罚、限量采购、约谈等,实现了重点监控药品规范化管理。实践后,不合理医嘱减少,处方点评合格率提升,辅助用药种类减少。认为建立重点监控药品管理的相关制度及流程,对提升合理用药水平有一定促进作用。 相似文献
100.
超重肥胖已成为影响我国儿童青少年身心健康的重要公共卫生问题,相关研究表明肥胖会影响儿童的各个方面,包括高血压、2型糖尿病、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)、血脂异常,还与哮喘和多种肿瘤如结直肠癌、乳腺癌有关,肥胖儿童的焦虑和抑郁发生率也较高。本文就儿童青少年肥胖产生的健康危害进行综述,提高人们对儿童肥胖防控的重视。 相似文献