杆状病毒介导LacZ基因转染体外培养的人虹膜色素上皮细胞

目的：研究重组杆状病毒(baculovinus)载体介导β—半乳糖苷酶基因(LacZ)对体外培养虹膜色素上皮(IPE)细胞的转染和表达情况。方法：将质粒pCMV—β中的CMV—LacZ表达盒插入杆状病毒表达栽体pFast BacI的Eco RI／Hind Ⅲ位点，构建重组质粒pBac—β，并利用Bac—to—Bac表达系统在Sf9细胞中产生出重组杆状病毒BV—β。将MOI为200的BV—β感染经酶消化加显微法分离培养的IPE细胞，24h后进行X-gal染色。在显微镜下观察IPE中LacZ表达阳性的情况，记录阳性细胞所占的百分比。结果：限制性酶切分析及测序结果表明，我们已成功构建表达质粒pBac—β及重组杆状病毒BV—β。X-gal染色证实杆状病毒介导LacZ在细胞中的表达呈蓝色，弥漫于整个胞浆。感染后24h时表达阳性率达85％。结论：重组杆状病毒可有效介导报告基因在体外培养的IPE细胞中表达，为利用杆状病毒构建可供移植的基因工程化虹膜色素上皮细胞提供了实验依据。     

武警部队医学生心理健康状况调查

目的　了解武警部队医学生心理健康状况 ,探讨增进武警部队学员心理健康的对策。方法　采用症状自评量表 (SCL - 90 )为工具 ,对随机抽取的 312名武警医学生进行心理健康状况测试。结果　武警医学生SCL - 90各项因子分普遍低于武警军人组和国内常模青年组 (P<0 .0 5 ) ;总均分 1.39± 0 .34,低于武警军人组 (1.4 7± 0 .4 2 ,P <0 .0 1)。结论　武警医学生心理健康状况优于武警军人和国内常模青年组。但仍存在问题 ,部队教育工作者应根据武警院校学员特点 ,积极开展心理卫生教育 ,以提高军校学员整体心理素质     

海洛因依赖者支气管哮喘的临床特点及防治

目的：探讨海洛因依赖者支气管哮喘临床特点，为防治和治疗提供科学根据。方法：2004年1月至2005年1月1752例海洛因依赖者中伴发哮喘40例与随机抽取同期戒毒的100例患者进行回顾性分析与对照。结果：研究组病例的日滥用量、吸毒方式、吸毒年限与对照组病例相比均呈显著差异（P〈0．01）。研究组中：轻度发作24例（60％）；中度发作12例（30％）；重度发作3例（7．5％）；危重度1例（2．5％），哮喘多出现在脱毒中期；在有效脱毒的基础上，抗炎平喘，结合心理治疗与干预，轻度发作者多在4小时内缓解，中度发作者多在48小时内缓解，重度及危重度发作者多在3～5天内缓解。结论：长期大剂量烫吸海洛因是支气管哮喘发作的危险因素。应完善相关检查、及时发现，积极有效抗炎平喘，制定合理治疗方案，注意心理因素的影响。更重要的是，对海洛因依赖者进行教育，使他们了解哮喘知识、戒除毒品，才能从根本上预防和治疗此类并发症。     

无创心输出量监测在暴发性心肌炎患儿中的应用

目的 探讨无创心输出量监测系统(non-invasive cardiac system, NICaS)在暴发性心肌炎(fulminant myocarditis, FM)患儿中的应用价值。方法 纳入FM患儿39例作为试验组,同期住院的肺炎患儿47例作为对照组。2组均行NICaS和经胸超声心动图(transthoracic echocardiography, TTE)检查,监测心脏指数(cardiac index, CI)、△CI、格兰夫-高尔指数(Granov Goor index, GGI)及左心室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF)等参数,比较试验组患儿NICaS和TTE参数的差异及相关性;试验组随机分为A1组(n=21,参照NICaS制定治疗方案)和A2组(n=18,参照TTE制定治疗方案),比较2组预后。结果 试验组TTE和NICaS测得的CI均小于对照组,试验组NICaS测得的CI小于TTE,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,试验组和对照组NICaS与TTE测得的CI呈显著正相关(r=...     

基于文献计量学的病毒性肺炎免疫应答调节机制研究进展分析

[目的] 了解病毒性肺炎及其免疫应答机制的研究现状,分析该领域的热点和研究发展趋势。[方法] 检索Web of Science(WOS)核心合集数据库中有关病毒性肺炎免疫应答相关的文献为文献样本,基于文献计量学,利用Citespace对该领域文献进行国家合作、机构合作、关键词等分析。[结果] 共检测到相关文献796篇,美国的发文量、研究者数量及研究成果在全球都处于领先地位,美国国立卫生研究院为发文最多的机构;中国研究处于不断发展阶段,与其他国家有良好合作,国内交流有待增强;主要的热点话题有呼吸道合胞病毒、流感、发病机制、细胞因子表达、炎症反应等。[结论] 该领域研究受疫情爆发的影响,正处于发展阶段,全球应加国内外强科研合作,提高防治疫情整体研究水平。     

膝关节盘状半月板损伤患者关节镜术后疼痛的列线图预测模型构建

目的 分析膝关节盘状半月板(DLM)损伤患者关节镜术后疼痛的危险因素,并构建列线图预测模型。方法 收集2017年1月至2021年12月行关节镜手术治疗的217例DLM损伤患者临床资料。依照NRS数字分级法评估术侧膝关节及髌周疼痛情况,将患者分为疼痛组(≤4分,n=26)和非疼痛组(≥4分,n=191)。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析获取有统计学意义的连续性变量的最佳截断值。采用多因素logistic回归模型分析DLM损伤患者关节镜术后疼痛的危险因素。构建预测DLM损伤患者关节镜术后疼痛的列线图预测模型,采用校正曲线对列线图预测模型进行内部验证和性能评价,决策曲线对列线图预测模型的预测效能进行临床净收益评估。结果 疼痛组患者年龄、关节软骨损伤比例、术后无冷敷比例均高于非疼痛组(P<0.05),术后负重时间早于非疼痛组(P<0.05)。ROC曲线分析显示：年龄、术后负重时间的AUC分别为0.767、0.774;最佳截断值分别为54岁、7 d。年龄(>54岁)、关节软骨损伤(有)、术后负重时间(≤7 d)是DLM损伤患者关节镜术后疼痛的独立危险因素,术后冷敷(有)是D...     

SARS冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

目的 制备SARS冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白特异性单克隆抗体(McAb)，为SARS的快速诊断及致病机制的研究提供实验材料。方法 用纯化的重组SARS-CoVN蛋白免疫BALB/c小鼠，经细胞融合和亚克隆后获得分泌针对N蛋白的杂交瘤细胞株，用Western blot和间接免疫荧光法检测这些细胞株分泌的单克隆抗体特异性，并将N蛋白分3段表达初步定位单克隆抗体识别表位所在区域。结果 通过细胞融合和3轮克隆化，筛选出分泌抗N蛋白的6个杂交瘤细胞株。Western blot及免疫荧光显示，获得的McAb可与SARS-CoVN蛋白及SARS-CoV发生特异性反应，有4个细胞株分泌的抗体的识别位点位于N蛋白N端，2个位于C端。结论 获得了SARS-CoV特异性单克隆抗体并进行了初步定位，可用于SARS的早期诊断及致病机制研究。     

IFN-γ基因对表达DHBV preS/S蛋白质的DNA疫苗诱生免疫应答的影响

目的 利用DHBV感染鸭模型，研究鸭IFN-γ真核表达质粒作为免疫佐剂对：DNA疫苗诱导免疫应答的影响和预防DHBV感染的作用。方法 用DuIFN-γ真核表达质粒与DHBpre S／S DNA疫苗共免疫，或用DHBpreS／S DNA疫苗单独免疫正常幼鸭，检测经免疫前后鸭PBMC表达DuIFN-γ的mRNA水平(半定量竞争性RT-PCR)、诱生的抗体水平(ELISA)、病毒攻击免疫鸭后血清和肝脏中的病毒DNA变化(斑点和Southern印迹核酸杂交)。结果 IFN-γ表达质粒作为免疫佐剂，可以增强DNA疫苗诱导的鸭PBMC IFN-γ的mRNA表达水平。用大剂量病毒攻击免疫鸭的结果显示，用DuIFN-γ表达质粒和DHB preS／S DNA疫苗共免疫鸭清除：DHBV的速度，明显比仅用DHBpreS／S DNA疫苗免疫鸭清除病毒的速度快，肝脏中DHBV总DNA和共价闭环DNA(eccDNA)的量也低于DHBpreS／S DNA单独免疫组。结论 IFN-γ真核表达质粒作为免疫调节佐剂在：DNA免疫中具有潜在的应用价值。     

RAAS系统在继发性高血压疾病中的应用进展

在人体体内分布最广泛的内分泌调节系统是肾素-血管紧张素-醛固酮系统(renin-angiotensin-aldosteron system,RAAS),该系统在内分泌调节环节中发挥着至关重要的作用.在内分泌系统中,可以通过RAAS来实现对人体体内血量流动和外周阻力的控制,并且还可以通过RAAS来进一步调节体内血压、水和电解质的平衡,确保人体环境能够保持在一个稳定的状态.组成RAAS的主要部分有肾素、血管紧张素和醛固酮.针对RAAS各个组成部分进行深入研究之后,发现在RAAS系统中的一些部分与嗜铬细胞瘤、副神经节瘤等继发性高血压疾病密切相关.通过检测RAAS的组分可以辅助诊断因RAAS系统失调所导致的多种疾病.本文将从RAAS组分的检测方法及其在继发性高血压中的临床应用进行综述.     

抗人CD40人-鼠嵌合抗体在CHO细胞中的表达及其功能研究

目的:实现抗人CD40的人-鼠嵌合抗体(ch-5C11)在的CHO细胞中的稳定表达并对其生物学活性进行初步的研究。方法:pIRES/hu5C11嵌合抗体重组表达质粒用脂质体法转染CHO细胞,采用RT-PCR对CHO细胞进行基因水平鉴定,以流式细胞术(FCM)和Western blot对表达上清中ch-5C11人免疫球蛋白Fc段和κ链成分进行检测,利用Protein G亲和层析和Lowry法进行纯化和定量,MTT实验检测表达ch-5C11对Daudi细胞增殖的抑制效应。结果:获得稳定分泌目的蛋白的CHO稳定株,RT-PCR结果表明目的基因成功整合在CHO稳定株中,FCM和Western blot结果表明稳定株上清中含有抗人CD40抗体,且含人免疫球蛋白Fc段和κ链;Lowry法定量ch-5C11浓度为0.535mg/L,并经SDS-PAGE蛋白电泳鉴定纯度良好;ch-5C11能抑制Daudi细胞增殖。结论:获得了持续分泌ch-5C11的CHO稳定株,功能学研究显示ch-5C11能抑制B细胞淋巴瘤细胞株体外增殖。